1' w.r t^ - n H'f'-i. a; ^^^ .d-^ l^'^- «fei < :!^ ."* «II „-^.^i* m MARINE BIOLOGIGAL LABORATORY. Received Accession No. Given by Place, *^* flo book op pampiilet is to be removed fpotn ttie Iiab- opatopy taitbout the permission of tbe Tpustees. ZEITSCHRIFT FÜR WISSENSCHAFTLICHE MIKROSKOPIE UND FÜR MIKROSKOPISCHE TECHNIK Unter besonderer Mitwirkung von Prof. Dr. Leop. Dippel in Darmstadt Prof. Dr. P. Schiefferdecker Prof. Dr. R. Brauns in Bonn in Giessen herausgegeben von Dk. ernst Küster in Halle a. S. Bmid XX (Jahrgang 1903) Mit 1 Portrait, 1 Lichtdrucktafel und 33 Holzschnitten LEIPZIG Verlag von S. H i r z e 1 1903 Alle Rechte vorbehalten. 2] ? Inhaltsverzeichniss. I. Abhandlungen. Seite Andre, E., Concretions dans le vert de methyle acetique .... 412 Bluntschli, H. , Einige Neuerungen am R. Jung'schen Studenten- Mikrotom 1 Cajal, S. R. , üeber einige Methoden der Silberimprägnirung zur Untersuchung der Neurofibrillen, der Achsencylinder und der Endverzweigungen 401 Colombo, G., Di un metodo per tingere „intra vitam" i granuli proto- plasmatici degli elementi cellulari della Cornea e per fissare stabilmente la colorazione ottenuta 282 Culmann, P., Monoculares, bildaufrichtendes Prismen-Mikroskop . . 416 Fischel,. R., Ueber eine neue Methode zum Auf kleben von Celloidin- schnitten und die Anwendung derselben für Schnittserien . . 288 Friedländer, Friedr. v., Eine Modification des Pantographen (Storch- schnabel) zum Zeichnen mikroskopischer Präparate .... 12 Gelbliim, S., Discussion des conditions generales que doit remplir le dispositif d'arret du tube ä tirage dans tout microscope, et description du moyen pratique pour arriver ä ce resultat . . 129 — , — , Le mouvement lent du tube de microscope 421 Groot, J. G. de, Eisen-Carmalaun 21 Harz, C. O., Paraffinöl als Ersatz für Canadabalsam zu mikroskopi- schen Dauerpräparaten 187 — , — , Erwiderung 292 Heidenhain , M. , Ueber die Vervverthung der Centrifuge bei Ge- legenheit der Herstellung von Präparaten isolirter Zellen zu Kurszwecken 172 IV Inhaltsverzeichniss. Seite Heidenhain , M., Ueber die zweckmässige Verwendung des Congo und anderer Amidoazokörper, sowie über neue Neutralfarben 179 Helly, K., Eine Modification der Zenker'schen Fixirungsflüssigkeit . . 413 Hinterberger, A., Thermophore für Färbezwecke . 14 Hoflfmann, W., Deckglastransporteur für Schnittfärbung 171 Konaschko, P. , Ueber ein neues Verfahren der Neutralisation der Carminleimmasse 280 Kreflft, P., Rotations-Mikrotom „Herzberge" 7 Küster, E., Entomologisches Arbeitsmikroskop von Brüder Ortner u. Co 429 Mayer, P., Notiz über Hämatein und Hämalaun 409 Oppermann, E., Dr. Wilhelm Behrens f 273 Ramön y Cajal, S. R., siehe Cajal. Regaud, Cl., et Fouilliand, R., Regulateur electro-thermique et etuves electriques 138 Reinsch, J. F., Neue Methode der Darstellung von Horizontalschnitten dünner mehrschichtiger vegetabilischer Flächengewebe ... 28 Richter, E., Diapositivwechsler der optischen Werkstätte von Carl Zeiss in Jena 132 Schoebel, E., Einfacher Auswaschapparat 168 Schuberg, A., Fläschchen für Immer sionsöl 17 Stransky, E. , Bemerkungen zu dem Aufsatze „Paraffinöl als Ersatz für Canadabalsam zu mikroskopischen Dauerpräparaten" von Dr. C. 0. Harz 279 Strehl, K., Ueber die Natur des Vorticellenstieles 189 Tompa, A. v., Zwei botanische Tinctionsmethoden 24 II. Referate. Aders, W. M. , Beiträge zur Kenntniss der Spermatogenese bei den Coelenteraten 50 Allen, Ch. E., The early stages of spindle formation in the pollen- motlier-cells of Larix 107 Altschüler, E., Eine Typhusanreicherungsmethode 94 Ancel, P., Histogenese et structure de la glande hermaphrodite de l'Helix pomacea 446 Anleitung für die bacteriologische Feststellung der Cholerafälle (Er- lass des Ministers der geistlichen, Unterrichts- und Medicinal- Angelegenheiten vom 6. November 1902) 91 Aquisto, V., Particolaritä di struttura della membrana amniotica della cavia 228 Arnold, J., Ueber Plasmosomen und Granula der Nierenepithelien . 70 Inhaltsverzeichniss. V Seite Arnold , J. , Weitere Mittheilungen über vitale und supravitale Gra- nulafjirbung (Epithelien, Endothelien, Bindegewebszellen, Mast- zellen, Leukocyten, Gefässe, glatte Muskelfasern) 435 Arnoldi, AV., Beiträge zur Morphologie der Gymnospermen. VI. Ueber den Bau der Zellkerne im Embryo von Ginkgo biloba . . . 489 Aller, K., Ueber die Bastfasern der Moraceen 252 Awerinzew, S., Ueber die Structur der Kalkschalen mariner Rhizo- poden 200 Bäcker, R., Die Augen einiger Gastropoden 60 Bardeen, Chi. R. , Variations in the internal architecture of the M. obliquus abdominis externus in certain mammals .... 321 Bargagli Petrucci , G., Concrezioni silicee intracellulari nel legno secondario di alcune Dicotiledoni 107 Baur , E. , Untersuchungen über die Entwicklungsgeschichte der Flechtenapothecien 1 490 Beard, J., The germ-cells. I. Raja batis . 216 Becker, A., Krystalloptik. Eine ausführliche elementare Darstellung aller wesentlichen Erscheinungen, welche die Krystalle in der Optik darbieten , nebst einer historischen Entwicklung der Theorien des Lichtes 110 Beguin, F., Contribution ä l'etude histologique du tube digestif des Reptiles 79 Benda, C, Markscheidenfärbung der peripherischen Nerven .... 231 Beruard, Ch., Sur l'embryogenie de quelques plantes parasites . . 251 Bertarelli , E. , Ueber einen ziemlich seltenen Tuberkelsputum- befund 488 Best, Ueber Glykogen, insbesondere seine Bedeutung bei Entzündung und Eiterung 357 Bielscliowsky, M., Die Silberimprägnation der Neurofibrillen . . . 462 Bloch, C. E., Anatomische Untersuchungen über den Magen: Darm- kanal des Säuglings . 470 Boissevain, M., Beiträge zur Anatomie und Histologie von Dentalium 445 Bolles Lee, A., L'eclairage et l'emploi du condensateur dans la micro- graphie histologique 191 Bongardt, J,, Beiträge zur Kenntniss der Leuchtorgane einheimischer Lampyriden 304 Bouuet, Beiträge zur Embryologie des Hundes. Zweite Fortsetzung 61 Borst, M., Ueber die Heilungsvorgänge nach Sehnenplastik .... 453 Brächet, A., Recherches sur l'ontogenese des Amphibiens urodeles et anoures (Siredon pisciformis — Rana temporaria) . . . 451 Braddon, W. L. , Handy method of preparing slides and slips for taking blood films : 77 Braeunig , K. , Ueber Chromatolyse in den Vorderhornzellen des Rückenmarks 350 Brand, F., Morphologisch -physiologische Betrachtungen über Cya- nophyceen _ 244 VI Inhaltsverzeichniss. Seite Bresslau, E., Beiträge zur Entwieklungsgeschiclite der Turbellarien. I. Die Entwicklung der Rhabdocoelen und Alloiocoelen . . 442 Breuer, R., Zur Technik der Leukocytenzälilung 78 Brinkmann, A., Histologie, Histogenese und Bedeutung der Mucosa uteri einiger viviparer Haie und Rochen 313 Briinings, W., Ein neuer Apparat für Blutkörperchenzählung . . . 323 Bugge, G., Zur Kenntniss des Excretionsgefäss-Systems der Cestoden und Trematoden 51 Cajal, S. R., siehe Ramön y Cajal, S. Carlson, A. J. , Changes in the Nissl's substance of the ganglion and the bipolar cells of the retina of the Brand cormorant Phalarocorax penicillatus during prolonged anormal Stimulation 481 Castaigne, J., et Rathery, F., Lesions experimentales du rein . . 330 Chilesotti, E., Eine Carminfärbung der Achsencylinder , welche bei jeder Behandlungsmethode gelingt (Urancarminfärbung nach Schmaus modificirt) 87 Ciaccio , C. , Communicazione sopra i canaliculi di secrezione neue capsule soprarenali 79 — , — , Ricerche sui processi di secrezione cellulare nelle capsule sur- renali dei Vertebrati 475 — , — , Sopra una nuova specie di cellule nelle capsule surrenali degli Anuri 475 Cohn, F., Zur Histologie und Histogenese des Corpus luteum und des interstitiellen Ovarialgewebes 229 — , — , Zur Histologie und Histogenese des Corpus luteum und des interstitiellen Ovarialgewebes 480 Coker, W. C, On the gametophytes and embryo of Taxodium . . 251 Cook, M, Th., Development of the embryo-sac and embryo of Casta- lia odorata and Nymphaea advena 253 Courant, Ueber die Präputialdrüsen des Kaninchens und über die Veränderungen derselben in der Brunstzeit 65 Dale, E., Observations on Gymnoascaceae 247 Dangeard, P.-A., Recherches sur les Eugleniens 98 Davis, Br. M., Oogenesis in Saprolegnia 99 Deganello, IT., Ueber die supravitale Färbbarkeit der Zellen des acuten und chronischen Eiters des Menschen 229 — ■, — , Ueber die Structur und Granulirung der Zellen des acuten und chronischen Eiters des Menschen (Beitrag zur Kenntniss der eitrigen Entzündung) 325 Deklmizen, C, Un liquide fixateur isotonique avec l'eau de mer . . 434 — , — , Liquide tixateur isotonique avec l'eau de mer pour les objets dont on ne veut pas eliminer les formations calcaires . . . 435 Dexter, F., The development of the paraphysis in the common fowl 84 Dogiel, A. S., Das periphere Nervensystem des Amphioxus (Branchio- stoma lanceolatum) 211 Doi), P., Sur le pollen des Asclepiadees 379 Inhaltsverzeichniss. VII Seite Dumez , R. , Rapports du cy toplasme et du noyau dans Toeuf de la Cytherea chione L 211 Enderlein, G., Eine einseitige Hemmungsbildung bei Telea polyphemus von ontogenetischem Standpunkt. Ein Beitrag zur Kenntniss der Entwicklung der Schmetterlinge 55 Endo, S., Ueber ein Verfahren zum Nachweis der Typhusbacillen . 368 Engelmann, E. , Einiges über die sogenannte „physiologische Koch- salzlösung" 296 Erdheim, J., Zur normalen und pathologischen Histologie der Glan- dula thyreoidea, parathyreoidea und Hypophysis 334 Eriksson, J. , u. Tischler, G., üeber das vegetative Leben der Ge- treiderostpilze. I. Puccinia glumarum (Schm.) Eriks, u. Henn. in der heranwachsenden Weizenpflanze 493 Fick, J. , üeber metachromatische Färbung des Keratohyahns durch Kresylechtviolett 222 Ficker, M., Zur Agglutinationstechnik 96 — , — , Ueber den Nachweis von Typhusbacillen im Wasser durch Färbung mit Eisensulfat 369 Fischer, Einige Bemerkungen über die Färbung pathologischer Gliaformationen 356 Fischer, B., Ein neues Injectionsverfahren zur Darstellung der Capil- laren 224 — , — , Ueber die Fettfärbung mit Sudan HI und Scharlach R . . . 198 — , — , Ueber Chemismus und Technik der WEiGERx'schen Elastin- färbung 40 — , — , Weiteres zur Technik der Elastinfärbung 439 Fischer, H., Mikrophotogramme von Inuhnsphäriten und Stärkekörnern 103 Flint, J. M., Das Bindegewebe der Speicheldrüsen und des Pankreas und seine Entwicklung in der Glandula submaxillaris . . . 472 Fraenkel, C, Ueber den Gefässbündelverlauf in den Blumenblättern der Amaryllidaceen . 109 Fraenkel, E., Ueber eine neue Markscheidenfärbung ...... 345 Freemanu , W. , A method of staining sections quickly with picro- carmine 301 Frothingham , Die Diagnose des Rotzes nach der STRAUSS'schen Methode 96 Fjichs, F., Ueber die sogenannte „intracelluläre" Entstehung der rothen Blutkörperchen junger und erwachsener Säuger . . . 329 Fuchs, H. , Ueber die Spinalganglienzellen und Vorderhornganghen- zellen einiger Säuger 349 Fiijii, K., Ueber die Bestäubungstropfen der Gymnospermen . . . 375 Geneau de Lamarliere, L. , Recherches sur quelques reactions des membranes lignifiees 248 Gola, G., Lo zolfo e i suoi composti nell'economia delle piante . . 102 Goldschmidt, R., Histologische Untersuchungen an Nematoden. I. Die Sinnesorgane von Ascaris lumbricoides L. und A. megalo- cephala Cloqu 203 YIII Inhaltsverzeichniss. Seite Gordon, M. H., Notiz über die Anwendung des Neutralroths (Roth- berger) zur Differenzirung von Streptokokken 368 Gi'am, B., lieber die Proteinkörner im Samen der Oelgewächse . . 105 Graudis, V., et Mainini, C, Sur une reaction coloree qui permet de reveler les sels de calcium deposes dans les tissus organiques 45 Grönberg, G. , Die Ontogenese eines niederen Säugergehirns nach Untersuchungen an Erinaceus europaeus 83 Gross, J., Untersuchungen über die Histologie des Insectenovariums 208 Grünberg, K. , Untersuchungen über die Keim- und Nährzellen in den Hoden und Ovarien der Lepidopteren. Ein Beitrag zur Kenntniss der Entwicklung und Ausbildung der Keimdrüsen bei den Insecten 209 Grüss, J., Peroxydase, das Reversionsenzym der Oxydase .... 376 Gueuther, K., Keimfleck und Synapsis. Studien an der Samenreifung von Hydra viridis 441 Guiliiermond, A., Recherches cytologiques sur les levures .... 245 — , — , Contribution ä l'etude de l'epiplasme des Ascomycetes et recherches sur les corpuscules metachromatiques des Cham- pignons 247 — , — , Contribution ä l'etude de la formation des asques et de l'epi- plasme des Ascomycetes 491 Haack, W., Ueber Mundhöhlendrüsen bei Petromyzonten .... 330 Hagemauu, C, Zum Nachweis von Tj^phuserregern im Wasser . . 236 Halkin, H., Recherches sur la maturation, la fecondation et le deve- loppement du Polystomum integerrimum 444 Halpern, B., Das Hüll- und Stützgewebe des Bauchmarks bei Astacus fluviatilis 53 Hardesty, J., The neuroglia of the spinal cord of the elephant with some preliminary observations upon the development of neu- roglia fibers 86 Hartwich, C, u. Uhlmaun, W. , Ueber den Nachweis fetter Oele durch mikrochemische Verseifung 103 — , — , Beobachtungen über den Nachweis des fetten Oeles und seine Bildung, besonders in der Olive 103 Heidecke, P., Untersuchungen über die ersten Embryonalstadien von Gammarus locusta 448 Hennings, C, Das TÖMÖsvAR'sche Organ der Myriopoden .... 449 Herxheimer, G., Bemerkung zu dem Aufsatze des Herrn Dr. B. Fischer „Ueber die Fettfärbung mit Sudan III und Scharlach R" in Nummer 23 dieses Centralblattes 300 Herzog, F., Beiträge zur Entwicklungsgeschichte und Histologie der männlichen Harnröhre 477 Hesse, Zur quantitativen Bestimmung der Wasserkeime 88 Hesse, G., Beiträge zur Herstellung von Nährböden und zur Bacterien- züchtung 485 'o Inhaltsverzeichniss. IX Seite Hesse, R., Uebei- den feineren Bau der Stäbchen und Zapfen einiger Wirbelthiere . 482 Hetsch, H., Weiteres zur culturellen Diflferenzirung der Ruhrbacillen gegenüber ruhriihnlichcn Bacterien 363 — , — , Beitrag zur Frage über die Leistungsfähigkeit des Peptun- wasser- Anreicherungsverfahrens in der praktischen Cholera- diagnose 366 Hinze, G., Thiophj'sa volutans, ein neues Schwefelbacterium . , . 238 — , — , Ueber Schwefeltropfen im Innern von Oscillarien 245 Hirschbruch, u. Schwer, Die Choleradiagnose mit Hülfe eines Special- agars 483 Hoffmann, W., Ueber die Wirkung der Radiumstrahlon auf Bacterien 235 — , — , Ueber Fortzüchtung von Tuberkelbacillen auf Glycerinkar- toffeln während zweier Jahre 487 — , — , Ueber das Auftreten von Agglutininen nach cutaner Injection 97 Hoffmann, W., u. Ficker, M., Ueber neue Methoden des Nachweises von Typhusbacillen 361 Ikeda, T., Studies in the physiological functions of antipodals and related phenomena of fertilization in Liliaceae. I. Tricyrtis hirta 494 Ikeno, S., Beiträge zur Kenntniss der pflanzlichen Spermatogenese: Die Spermatogenese von Marchantia polymorpha 495 Illiugworth, J. F., The anatomy of Lucapina crenulata Gray . . 210 Irgang , G. , Ueber saftausscheidende Elemente und Idioblasten bei Tropaeolum majus 109 Issel, R., Ancistridi del golfo di Napoli 199 Jagic, N. , Normale und pathologische Histologie der Gallencapil- laren. Ein Beitrag zur Lehre vom Ikterus und der biliären Cirrhose 333 Janssens , F. A. , et Hertens , Ad. , Etüde microchimique et cyto- logique d'une Torula rose 376 Joseph, H., Beiträge zur Flimmerzellen- und Centrosomenfrage . . 39 — ,_ — , Untei'suchungen über die Stützsubstanzen des Nervensystems nebst Erörterungen über deren histogenetische und phylogene- tische Deutung 51 Jost, J., Beitrag zur Lehre von der Blutentwicklung des embryonalen Rindes und Schafes 76 Jürgens, Zur Aetiologie der Ruhr 367 Justus, J., Ueber den ph5'siologischen Jodgehalt der Zelle .... 192 Kahn, R. H., Ein Beitrag zur Lehre von den Pilomotoren .... 322 Kappers , C. U. A. , Recherches sur le developpement des gaines dans le tube nerveux 344 Kasten, F., Ueber die Bildung von specifischen Antikörpern nach cutaner Injection 234 Kathariner, L., Ueber die Entwicklung von Gyrodactylus elegans . 444 Kirsch, Ueber Cambier's Verfahren zur Isolirung von Typhus- bacillen ... 369 X Inhaltsverzeichniss. Seite • Klemensiewicz, R., Weitere Beiträge zur Kenntniss des Baues und der Function der Wanderzellen, Pliag-oc3^ten und Eiterzellen. Mikroskopische und experimentelle Untersuchungen an Ba- trachiern 37 Koch, R., Epithelstudien am dritten Augenlide einiger Säugethiere . 312 Kohl, F. G., lieber die Organisation und Physiologie der Cyanophyceen- zelle und die mitotische Theilung ihres Kernes 240 Kohn, A., Die Paraganghen 84 Kolkvvitz, R., lieber Bau und Leben des Abwasserpilzes Leptomitus lacteus 247 Kolster, R. , Weitere Beiträge zur Kenntniss der Embryotrophe bei Indeciduaten 338 — , — , Zur Kenntniss der Embryotrophe beim Vorhandensein einer Decidua capsularis 340 Kopsch, F., Die Darstellung des Binnennetzes in spinalen Ganglien- zellen und anderen Körperzellen mittels Osmiumsäure . . . 347 Kotte , E. , Beiträge zur Kenntniss der Hautsinnesorgane und des peripheren Nervensystems der Tiefsee-Dekapoden 20G Krause, F. A,, u. Hartog, C, lieber Strumitis posttyphosa und den Nachweis der Typhusbacillen im Strumaeiter 3G5 Kroemer, K. , Wurzelhaut, Hjqjodermis und Endodermis der angio- spermen Wurzeln 106 Kromayer, E. , Neue biologische Beziehungen zwischen Epithel und Bindegewebe 69 Lagerlieim, G., Torftekniska Notiser 240 Lander, C. H., The anatomy of Hemiurus crenatus (Rud.) Luhe, an appendiculate Trematode 444 Landsteiner, K., lieber trübe Schwellung 355 Langstein, L., u. Mayer, M. , Versuche von Bacterienzüchtung in einer nativen Mucoidlösung 367 Lawson, A. A., On the relationship of the nuclear membrane to the protoplast 239 Lebrun, H., La vesicule germinative et les globules polaires chez les anoures 236 — , — , La vesicule germinative et les globules polaires chez les ba- traciens. Les cineses sexuelles chez Diemyctilus torosus . . 218 Legros , R. , Contributions ä l'etude de l'appareil vasculaire de l'Amphioxus 215 Lentz, O., ii. Tietz, J., Eine Anreicherungsmethode für Typhus- und Paratyphusbacillen 364 Lewis , T. , The structure and functions of the haemolymph glands and spieen 78 Liepmaun, W., lieber die BENDA'sche Reaction auf Fettnekrosen . 43 List, Th., Die Mytiliden des Golfes von Neapel und der angrenzen- den Meeresabschnitte 57 Loewe, F., lieber Neu- und Rückbildung im Ovarium vom Maifisch (Clupea alosa) 338 Inhaltsverzeichniss. XI Seite Loewenthal, N., Beitrag zur Kenntniss der Structur und der Theilung von Bindegewebszellen 319 Loewenthal, W., Beiträge zur Kenntniss der Basidiobolus lacertae . 375 Lubosch, W., Ueber die Nuclearsul)stanz der reifenden Tritoneneier nebst Betraclitungen über das Wesen der Eireifung .... 63 Lundie, A., Notes on micro-methods 98 Luzzatto, A. M., Ueber Ergebnisse der Nervenzellenfärbung in un- fixirtem Zustande 353 Lyon, H. L., Observatiuns on the embryogeny of Nelumbo .... 252 Maclaren, N. , Beiträge zur Kenntniss einiger Trematoden (Diplecta- num aequans Wagner und Nemathobothrium luolae n. sp.) . 443 Maire, R., Recherches cytologiques et taxonomiques sur les Basidio- mycetes 370 — , — , Recherches cytologiques sur la Galactinia succosa .... 377 Manicatlde, E., § Gälesescu, P., Cercetäri asupra leucocitosei in rugeolä 225 Martini, E., Ueber Furchung und Gastrulation bei Cucullanus elegans 204 Marx, H., Ein Beitrag zur Kenntniss der Chininwirkung 4G May, R., Ueber eine Pipette für Blutkörperchenzählung mit automa- tischer Einstellung 324 Mayus , O. , Die Peridienzellen der Uredineen in ihrer Abhängigkeit von Standortsverhältnissen 246 Mereslikowsky, S. S., Ein Apparat für Anaerobencultur .... 233 Meyer, A., Naphtolblau als Reagens für Bacterienfett 484 Meyer, O., Ueber das vegetabihsche Wachsthum der Tuberkelbacillen auf vegetabilischen Nährböden 487 Mezincescu,D,, Contributions ä la morphologie comparee des leucocytes 327 — , — , Ueber ein Eiterspirillum 362 Michaelis, H., Methode, Paraffinschnitte aufzukleben 299 3Iichaelis , L. , Beitrag zur Theorie des Färbeprocesses. Die Fär- bungseigenschaften der Cellulose 297 Miller, Cli. H., On embedding in celloidin 298 Miyake, K. , On the development of the sexual organs and fertiliza- tion in Picea excelsa 107 3Iolisch , H. , Die sogenannten Gasvacuolen und das Schweben ge- wisser Phykochromaceen 100 — , — , Ueber vorübergehende Rothfärbung der Chlorophyllkörner in Laubblättern 251 Mosse , M. , Ueber das färberische Verhalten der thierischen Zelle gegenüber Farbgemischen 36 Motta-Coco, A. , Contributo allo studio delle granulazioni fucsi- nofile e della struttura della cellula dei gangli spinali . . . 458 Müller , H. , Beitrag zur Embryonalentwicklung der Ascaris megalo- cephala 303 Münch, K., Ueber Nucleinspiralen im Kern der glatten Muskelzellen 453 Murbeck, S. , Parthenogenetische Embryobildung in der Gattung Alchemilla 109 — , — , Ueber die Embryologie von Ruppia rostellata 251 XJI Inhaltsverzeicliniss. Seite Musgrave, W. E., a. Clegg, M. T., Trypanosoma and trj^panosomiasis with special reference to surra in the Pliilippine islands . . 374 Myers, B. D., Beitrag zur Kenntniss des Chiasmas und der Cummis- suren am Boden des dritten Ventrikels 66 Nebel, A., lieber den Nachweis der Tuberkelbaeillen im Sputum , , 89 Neidert, L., u. Leiber, A. , lieber Bau und Entwicklung der weib- lichen Geschlechtsorgane des Amphioxus lanceolatus. . . . 215 Nemec, B., Die Perception des Schwerkraftreizes bei den Pflanzen . 379 Neresbeimer, E., lieber Lohmanella catenata 440 Neubauer, Ueber das Wesen der Osmiumschwärzung 44 Neuhaus, C, Die postembryonale Entwicklung der Rhabditis nigro- venosa 205 Neuhaus, E., Beitrag zur mikroskopischen Technik 431 Osterbout, W. J. V,, Cell studies. I. Spindle formation in Agave . 108 Otto, R., Weitere Beiträge zur Agglutination der Staphylokokken . 484 Pantanelli, E., Studi sull'albinismo nel regno vegetale 102 Pappenbeim, A., Färberisches zur Kenntniss des sogenannten Chro- matinkerns (Kernpunktes) von Protisten 35 _^ _^ Weitere kritische Ausführungen zum gegenwärtigen Stande der Plasmazellenfrage. Dazu ein Anhang: Die Histogenese des Tuberkels betreffend 73 Pappenbeim, P., Beiträge zur Kenntnis der Entwicklungsgeschichte von Dolomedes fimbr latus Clerk, mit besonderer Berücksich- tigung der Bildung des Gehirns und der Augen 54 Pee, P. V., Recherches sur l'origine du corps vitre 481 Petersen, W., Zur Anwendung der plastischen Reconstructions- methoden in der pathologischen Anatomie 302 Petit, L., Procedes de coloration du liege par l'alkanna, de la celiu- lose par les sels metalliques; triple coloration 380 Petren, K., Beobachtung über aufsteigend degenerirende Fasern in der Pyramidenbahn nebst einem Beitrage zur Beurtheilung der MARCHi-Präparate 351 Petri, L,, I metodi di Apäthy per l'istologia del sistema nervoso applicati alle cellule vegetali (nota preventiva) 492 Petrunkewitscb, A., Künstliche Parthenogenese 440 Pewsner-Neufeld, R., Ueber die Saftcanälchen in den Ganglienzellen des Rückenmarks und ihre Beziehung zum pericellulären Saftlückensystem 4b7 Pierantoni, Tl., Studii anatomici su Michaelsena macrochaeta Pierant. 449 Poebe, J., Ueber zwei neue in Siphonophoren vorkommende Flagel- laten nebst Bemerkungen über die Nomenclatur einiger ver- wandter Formen 49 Polowzow, AV., Ueber contractile Fasern in einer Flimmerepithelart und ihre functionelle Bedeutung •. 307 Porsch, O., Ueber einen neuen Entleerungsapparat innerer Drüsen . 250 Prall, Fr., Beitrag zur Kenntniss der Nährböden für die Bestimmung der Keimzahl im Wasser 235 Inhaltsverzeichniss. XIII Seite Prenant, A., Notes cytologiques. VI. Formations particulieres dans le tissu conjonctif interstitiel du muscle vesical du brochet . 452 Prentiss, C. W., lieber die Fibrillengitter in dem Neuropil von Hirudo und Astacus und ihre Beziehung zu den sogenannten Neu- ronen 207 Puchberger, G., Bemerkungen zur vitalen Färbung der Blutplättchen des Menschen mit Brillantkresylblau 451 Raehlraaun, E., Ultramikroskopische Untersuchungen über Farbstoffe und Farbstoftmischungen und deren physikalisch-physiologische Bedeutung 295 Ramön y Cajal, S., Methode nouvelle pour la coloration des neuro- fibrilles '. 342 — , — , Trois modifications pour des usages differents de ma methode de coloration des neurofibrilles par l'argent reduit .... 461 — , — , Metodo para colorear la mielina en las preparaciones del me- todo de Marchi 458 — , — , Un cunsejo ütil para evitar los inconvenientes de la friabilidad y arollamiento de los cortes en los preparados de Golgi y Marchi 432 Reed, H. S,, The development of the macrosporangium of Yucca fila- mentosa 252 Reich , F. , Ueber eine neue Methode der Herstellung feinster histo- logischer Präparate, insbesondere aus dem Gebiete des Nerven- systems, mittels Schüttel- bezw. Schnittcentrifugirung ... 44 Remec, B., Ueber die specitische Doppelbrechung der Pflanzenfasern 101 Renaut, J., Sur la tramule du tissu conjonctif 438 Retterer, E., Technique du tissu conjonctif dense et du derme en particulier 437 Retzius, G., Weiteres zur Kenntniss der Sinneszellen der Evertebraten 305 — , — , Zur Kenntniss des Gehörorganes von Pterotrachea . . . . 306 — , — , Zur Kenntniss der Riesenzellen und der Stützsubstanz des Knochenmarkes 321 — , — , Ueber einen Spiralfaserapparat am Kopfe der Spermien der Selachier 337 — , — , Zur Kenntniss der Gehirnbasis und ihrer Ganglien beim Menschen 341 Reuss, H. , Die Cercarie und Sporocyste des Distomum duplicatum Baer 206 Reusz, F, V. , Ueber Brauchbarkeit der GoLGi'schen Methode in der Physiologie und Pathologie der Nervenzellen 343 Reuter, K., Ein Beitrag zur Frage der Darmresorption 227 Reznik, B., Technika Mikroskopicka (Mikroskopische Technik) . . 190 Rodella, A., Beitrag zur Frage der Bedeutung anaerober Bacterien bei Darmkrankheiten 489 Rohde , E. , Untersuchungen über den Bau der Zelle. 1. Kern und Kernkörper 34 Rosenberg, 0., Ueber die Befruchtung von Plasmopara alpina Johans. 99 XIV Inhaltsverzeichniss. Seite Roth, E., Versuche über die Einwirkung des Coifeins auf das Bacte- rium typhi und coli 95 Rubaschkiu, W,, Zur Morphologie des Gehirns der Auiphibien . . 83 Ruhland, W. , Studien über die Befruclitung der Albugo Lepigoni und einiger Peronosporeen 378 Riizizka, V., Beiträge zur Kenntniss des Baues der rothen Blut- körperchen 325 Saltykow, S., Ueber Entzündung der quergestreiften Muskeln . . 223 Schaefer, F., Ueber die Schenkeldrüsen der Eidechsen 80 Schaper, A., Ueber die Fähigkeit des fertigen Dottersackepithels ge- formte Dotterelemente in sich aufzunehmen 64 Schenk , F. , u. Austerlitz , L., Weitere Untersuchungen über das elastische Gewebe der weiblichen Genitalorgane 477 Schenk, O., Die antennalen Hautsinnesorgane einiger Lepidopteren und Hymenopteren mit besonderer Berücksichtigung der sexu- ellen Unterschiede 54 Schepotieff, A., Untersuchungen über den feineren Bau der Borsten einiger Chätopoden und Brachiopoden 202 Schlesinger, A., Ueber Plasmazellen und Lymphocyten 74 Schmied, H. , Ueber Carotin in den Wurzeln von Dracaena und anderen Liliaceen 378 Schmincke, A., Ueber Ruminantierspermien und ihre Bewegung . . 476 Schnabel, H., Ueber die Embryonalentwicklung der Radula bei den Älollusken. II. Die Entwicklung der Radula bei den Gastro- poden 209 Schreiber, L. , Ueber ein bequemes Object zum Studium der Mast- zellen (Klasmatocyten) 76 Schuberg, A., Untersuchungen über Zellverbindungen 309 Schwangart, F., Studien zur Entodermfrage bei den Lepidopteren . 448 Schilder, Zum Nachweis der Typhusbacterien im Wasser .... 237 Shambaugh, G. E., The distribution of blood-vessels in the labyrinth of the ear of sus scropha domesticus 323 Siedentopf, H., u. Zsigmondy, R. , Ueber Sichtbarmachung und Grössenbestimmung ultramikroskopischer Theilchen mit be- sonderer Anwendung auf Goldrubingläser 295 Skrobansky, K. , Beiträge zur Kenntniss der Oogenese bei Säuge- thieren 337 Sjövall, E., Die Nervenzellenveränderungen bei Tetanus und ihre Bedeutung 352 Smirnow , A. E. v. , Zur Frage über den mikroskopischen Bau der Submaxillaris beim erwachsenen Menschen 332 Smith, W. H., A method of staining Sputum for bacteriological exa- mination 88 Smreker, E., Ueber die Darstellung der Kittsubstanz des Schmelzes menschlicher Zähne 317 Sommer, A., Zur Kenntniss des Perikardialepithels 314 Stempel!, W., Ueber Thelohania Mülleri [L. Pfr.] 47 Inhaltsverzeichniss. XV Seite Stephan , P. , Recherches sur quelqiies points de la Spermiogenese des selasiens 476 Stevens, N. M. , On the ovogenesis and spermatogenesis of Sagitta bipunctata 206 Stitz, H., Der Genitalapparat der Milvrolepidopteren 56 Stöhr, P., Entwicklungsgeschichte des menschlichen Wollhaares . . 316 Stolper, L., u. Herrmann, E., Die Rückbildung der Arterien im puer- peralen Meerschweinchenuterus 477 Streeter , G. L. , lieber die Verwendung der Paraffineinbettung bei Markscheidenfärbung 230 Strehl, K., Grundzüge der optischen Abbildung 294 Strong, R. M., The development of color in the definite feather . . 452 Suchanoff, S., Das endocelluläre Netz Golgi's in den Nervenelementen der spinalen Ganglien 85 Swingle, D. B. , Formation of the spores in the sporangia of Rhi- zopus nigricans and of Phycomyces nitens 374 Teiiffel, E., Zur Entwicklung der elastischen Fasern in der Lunge des Foetus und des Neugeborenen 226 Thesing, C, Beiträge zur Spermatogenese der Cephalopoden . . . 445 Thorel, Gh., Ueber die BENDA'sche Reaction der Fettgewebsnekrose 356 Timberlake, N. Gr., Development and structure of the swarm spores of Hydrodictyon 100 Trinci , G. , Di una nuova specie di Cytaeis gemmante del golfo di Napoli 201 Trotter, A. , Contributo alla conoscenza del sistema secretore in al- cuni tessuti prosoplastici 379 Tschassownikow, S. G. , Zur Frage nach der Entstehung und Be- deutung der „Saftcanälchen" in den Nervenzellen 469 Tsuneji, S., Zur mikroskopischen Technik 432 Türk, F., Ueber einige im Golfe von Neapel frei lebende Nematoden 306 Turner, J. , Ueber die Structur der menschlichen Gross- und Klein- hirnrinde , beobachtet bei einer Färbung mit Methylenblau- Wasserstofisuperoxydlösung 470 ühlmann, W., Ueber die Entstehung, das Vorkommen und den Nach- weis des fetten Oeles mit besonderer Berücksichtigung des Olivenöles 103 Unna, P. G., Zur Diflferentialdiagnose zwischen Hyalin und Bacillen- hüUen im Rhinoskleromgewebe 194 — , — , Eine Modification der PAPPENHEiM'schen Färbung auf Grano- plasma 196 — , — , Neue Untersuchungen über Kollagenfärbung 219 — , — , Die Färbung des Spongioplasmas und der Schaumzellen . . 320 Voltzenlogel, E., Untersuchungen über den anatomischen und histo- logischen Bau des Hinterendes von Ascaris megalocephala und Ascaris lumbricoides 52 Voornvekl, N. J. A. van, Das Blut im Hochgebirge 77 Voss, W., Ueber Schnallen und Fusionen bei den Uredineen . . . 246 XVI Inhaltsverzeiclmiss. Seite Wacke, R., Beiträge zur Kenntniss der Temnocephalen 51 AVarringsholz, H. , Beitrag zur vergleichenden Histologie der quer- gestreiften Muskelfasern des Pferdes, Rindes, Schafes und Schweines und Beobachtungen der Nebenscheibe und Mittel- scheibe beim Pferde und Schweine 454 Warsow, G., Systematisch -anatomische Untersuchungen des Blattes bei der Gattung Acer mit besonderer Berücksichtigung der Milchsaftelemente 494 Weber, L. W., Der heutige Stand der Neurogliafrage. Zusammen- fassendes Referat 465 Weevers, Th., Die physiologische Bedeutung einiger Glykoside . . 379 Wisselingh, C. v., Ueber abnormale Kerntheilung. Fünfter Beitrag zur Karyokinese 493 Wolflf, A., Ueber eine Methode zur Untersuchung des lebenden Knochenmarkes von Thieren und über das Bewegungsver- mögen der Myelocyten 456 — , — , Die Differentialdiagnose des Typhusbacillus vom Bacterium coli auf Grund der Säurebildung 238 Wolfrum, M. , Beiträge zur Entwicklungsgeschichte der Cornea der Säuger 354 Wormser, E. , Die Regeneration der Uterusschleimhaut nach der Geburt 478 Yatsu, N., On the development ol Lingula anatina 446 Yendo, K., Corallinae verae of Port Renfrew 244 — , — , Corallinae verae japonicae 244 Zietzschmann, E. H., Beiträge zur Morphologie und Histologie einiger Hautorgane der Cerviden 66 Zürn, J., Vergleichend histologische Untersuchungen über die Retina und die Area centralis retinae der Haussäugethiere .... 81 Verzeicliiiiss der Mitarbeiter an Band XX. Dr. E. Andre in Genf. Dr. H. Bluntsclili in Heidelberg-. Prof. Dr. Bürkner in Göttingen. Giov. Colombo in Bologna. Dr. P. Ciilmann in Paris. Dr. R. Fische! in Bad Hall. K. Fouilliand in Lyon. Dr. Friedr. v. Friedländer in Wien. S. Gelbluni in Lütticli. J. G. de Groot in Utrecht Prof. Dr. C. 0. Harz in München. Prof, Dr. M. Heidenhain in Tübingen. Dr. C. Kelly in Wien. Dr. A. Hinterberger in AVien. Dr. W. Hotfmann in Berlin. P. Konaschko in Kiew. Dr. P. Kretft in Berlin-Zehlendorf. Dr. E. Küster in Halle (S.). Prof. Dr. P. Mayer in Neapel. E. Gppermann in Brannschweig. XVIII Verzeichniss der Mitarbeiter an Band XX. Prof. S. Ramon y Cajal in Madrid. Prof. Ol. Regaud in Lyon. P. F. Reiusch in P^rlangen. B. Reznik in Neuliaus i. B. E. Richter in Jena. Prof. Dr. P, Scliiefterdecker in Bonn. Dr. E. Sclioebel in Neapel. Prof. Dr. A. Scliuberg in Heidelberg. Dr. E. Stransky in Wien. Prof. Dr. K. Strelil in Erlangen. Dr. A. von Tonipa in Puulapest. Band XX. Heft 1. Einige Keuerungen am R. Juiig'schen Studenteii- mikrotoin. Von Dr. H. Bluutsclili, Assistent am Anatomischen Institut in Heidelberg. Hierzu zwei Holzschnitte. Seit etwa Jahresfrist bringt die Firma R. JuxNG in Heidelberg ein Studentenmikrotom B (anch „Neues Stndentenmikrotom" genannt) in den Handel. Da das Instrument dem älteren Modell gleicher Firma gegenüber eine Reihe von Neuerimgen aufweist, welche sich mir bei mehrmonatlichem Gebrauch bewährten, will ich nicht länger zögern, die FachcoUegen auf dieses einfach gebaute und leicht zu handhabende Mikrotom aufmerksam zu machen , welches im Heidel- berger Anatomischen Institut bei den histologischen Uebungen von den Studirenden oft und gern benutzt wird. 'Der Fortschritt gegenüber dem älteren Modell^ besteht im wesentlichen in folgenden Momenten: 1) ist es ermögliclit, neben dem quergestellten Messer auch ein längsgestelltes anzuwenden, 2) kann die Neigung der Messer jederzeit beliebig verstellt werden und .3) erlaubt eine besondere Chloräthyl - Gefrierkammer in ausser- ordentlich einfacher Weise in kürzester Zeit Gefriersclinitte darzustellen. ^) Im Jahre 1892 von P. Schiefferdecker in dieser Zeitschr. Bd. IX, p. 168 ft'. beschrieben. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 1. 1 2 B 1 n n t s c h 1 i : Neuerungen am R. Jung'schen Stuclenteninikrotom. XX, 1. Da der Grundtypns des Instrumentes im wesentlicben derselbe ge- blieben ist, verweise ich für alle Details auf Schiefferdecker's unten citirte Mittbeilung und will micli darauf beschriinken an Hand der Figur 1 das Instrument in kurzen Zügen zu skizziren : Eine gusseiserne Klammer wird durch eine Schraube an der Tischkante befestigt. Sie trägt zwischen den beiden Klammerarmen eine senkrecht gestellte Achse Ä, an welcher in etwa gleicher Höhe und Fluchtlinie zwei horizontale Arme befestigt sind, deren einer als Messerträger (MT), der andere als Handgriff (H) dient. Der untere Klammerarm trägt ausserdem einen senkrechten Hohlcylinder (HZ), 1. in welchen ein zweiter Metallcylinder , der Objectträger , eingesetzt wird. Durch eine sinnreiche Einschnappvorrichtung wird beim Rotiren des Handgriffes nach jedem Schnitt der innere Metalltubus und da- mit das Object in senkrechter Richtung um ein gewünschtes Maass gehoben, und somit ein rasches Schneiden gewährleistet. Während nun beim alten Modell^ (Studentenmikrotom A) ein äusserst einfacher und sehr massiver Messerträger an der Achse befestigt ist, der sich jedoch nur zum Schneiden mit dem queren 1) Das alte Modell wird auch fernerhin von der Firma Jung ge- liefert und ist in Fällen, wo es sich um Schneiden besonders harter Objecte handelt, dem neuen Modell vorzuziehen. Ein vollständiges Studenten- XX, 1. B 1 u n t s c h 1 i : Neuerungen am R. Jung'schen Studentenmikrotom. 3 Messer eignet, ist beim neuen Modell der Messerträger zu einem langen horizontalen Eisenarm umgestaltet. Seiner Länge entsprechend ist er möglichst massiv gebaut. Figur 2 {MT) zeigt ihn in zwei Drittel Naturgrösse. von oben gesehen. Bei R^ und R'^ ist auf seiner oberen Fläche je eine Rinne von Gestalt eines halben Hohlcylinders angebracht, welche durch ein aufgeschraubtes Eisenstück {M'^ resp. ilf^), das seinerseits auf der Unterfläche eine in gleicher Weise ausgehöhlte Rinne besitzt, zu einer kurzen 1^/2 bis 2 cm langen cylindrischen Röhre ergänzt wird. In diese Röhre wird das Messer mit seinem runden Stiel eingeschoben und durch Anziehen der Schraube S mittels eines kleinen Metallhebels fest eingespannt. Eine Führungsleiste an dem röhrenförmigen Messerlager passt bei Normal- messerstellung in eine ganz feine Rinne am Messerstiel, doch — und darin sehe ich einen Hauptvorzug des neuen Modelies — findet dieser auch in jeder anderen gewünschten Messerneigung bei festem Anziehen der Schraube S eine absolut sichere Fixirung. Die quer- gestellten Messer (bicoucaves für Paraffinschnitte , beiderseits planes für Gefrierschnitte) werden in das Lager R^ eingespannt, Sie be- sitzen eine kurze Schneide , aber einen mehrere Centimeter langen Stiel , der ein Verschieben in der Längsachse zulässt , und so die Schnittfläche des Messers beliebig auszunutzen gestattet. (In Figur 2 ist die Stellung dieses Messers punktirt angegeben und die beiden Enden der Schneide sind mit a und ß bezeichnet.) Beim Rotiren des Handgritfes rotirt naturgemäss das Messer im umgekehrten Sinn mit und hobelt die gewünschten Schnitte vom Object, das direct im Einsatzcylinder fixirt ist, ab. Das andere Lager {R'^) wird beim Schneiden mit dem längs- gestellten Messer {LM) benutzt. Dieses letztere besitzt einen kurzen Stiel, aber eine 6 cm lange Schneide und ist planconcav geschliffen. Es wird mit der Schneide a — b nach aussen so in das Lager ein- mikrotom A kostet je nach Construction der Einschnapp Vorrichtung für grössere oder kleinere Abstände 28 bis 45 M, Dem gegenüber stellen sich die Preise für das neue Modell folgender- maassen : Vollständiges Instrument mit Einsatzcylindern für Paraffinobjecte, Celloi'dinpräparate und einer Gefrierkammer (die je nach Wunsch für Kohlen- säure , Schwefeläther oder Chloräthyl geliefert wird) , 3 Messern und Zu- behör bei einfacher Mikrometerschraube GO M., bei Mikrometerschraube mit Einschnappvorrichtung und Theilung (35 M., mit automatischer Einstellung der Schnittdicke in Abständen von 5, resp. 2'5 |W 73 resp. 76 M. 1* 4 Bluntschli: Neuerungen am R. Jung'schen Studentenmikrotom. XX, 1. gespannt , dass es mit der Seitentläclie der Klinge , in welche der Stiel eingebohrt ist, fest am Messerträger anstösst. Das Object [0) muss hier , wie ein Blick auf Figur 2 lehrt , in grösserem Abstand von der Drehungsachse als vorhin liegen. Um diese Forderung zu erfüllen wird ein besonderer Elinsatzcylinder in den Metalltubus ein- geschoben , der an einem massiven gabiigen Seitenarm ( G) den eigentlichen Objectträger {OT) trägt. Der Objectträger wird in b3-L 2. drei Modificationen hergestellt. Die erste, welche ausschliesslich für Celloidin-Präparate und andere Objecte, die aufgeklebt werden können, bestimmt ist, besteht aus einem viereckigen, oben runden Stück mit cylindrischem Loch zum Einsatz der Stabilitscheiben. Die zweite besteht aus einer Klammer, in welche Klötzehen oder härtere Ob- jecte direct eingespannt werden können, und ähnlich ist der dritte Halter, dessen Backen in der Mitte ausgehöhlt sind, um auch runde botanische Objecte gut einspannen zu können , gestaltet. Alle drei Halter können an der Gabel G in horizontaler Richtung verschoben. XX, 1. Bluntschli: Neuerungen am R. Jiing'schen Studentenmikrotom. 5 um eine senkrechte Achse gedreht und durch eine Schraube fest eingespannt werden. Viel Sorgfalt ist stets auf das Einstellen der Objecte zu verwenden und darauf zu achten, dass ihre längste Seite zuerst und möglich parallel von der Messerscheide a — b getrotfen wird , und dass die ganze Messerlänge beim Schneiden zur Aus- nutzung kommt. Besser als jede Beschreibung wird Figur 2 diese Verhältnisse klarstellen. Aus ihr ist auch leicht ersichtlich , dass der bestfixirte Theil der Messerschneide, also die Ecke 0, erst zuletzt das Object treffen wird und dass , wenn man sich die Bewegung des Messers in eine Reihe von Etappen zerlegt denkt, die einzelnen Schnittrichtungen a — ö, a^ — ^^, er — b" etc. nicht parallel verlaufen, sondern spitze Winkel bilden. Der theoretischen Erwägung gemäss muss also dort, wo das Präparat rascher vom Messer durcheilt wird, eine Stauchung eintreten, und in der That wird dieser Fehler bei grossen Objecten unangenehm empfunden, während er bei Objecten unter 0*8 cm Breite praktisch nicht mehr in Betracht kommt. Die Länge des Objectes kann die Breite übrigens beträchtlich über- treffen. P^ine weitere Neuerung ist die Chloräthyl-Gefrierkammer (GK), ein hohler Eiusatzcylinder, der in den Metalltubus eingeschoben wird und an seiner oberen Fläche eine isolirte Metallplatte trägt. Von der Seite her wird durch eine weite Oeffnung der Gefrierkammer Chloräthyl auf die Unterfiäche der Gefrierplatte und ein an ihr an- gebrachtes Geflecht gespritzt, während oben auf die Platte das mit Formolalkohol vorgehärtete und mit Wasser benetzte Object gelegt wird. Sobald letzteres an der Platte haftet, wird auch von oben her Chloräthyl aufgespritzt und damit für einige Minuten die zum Schneiden nöthige Consistenz erreicht. Hört nach einiger Zeit die Nachwirkung des angewandten Chloräthyls auf, so genügen wenige Tropfen, um alsbald wieder die gewünschte Härte zu erzielen. Diese ausserordentlich einfache und praktische Methode wird sich sicherlich rasch einbürgern. Das Chloräthyl ist bei sparsamer Verwendung nicht übermässig theuer (die Dr. HENNio'sche Flasche mit Moment- verschluss enthält jeweils 100 g und kostet 3 M., das Nachfüllen 2'50 M,), es ist fast ganz geruchlos, nicht feuergefährlich und greift die Metalltheile des Instrumentes nicht an. Der einzige Nachtheil der sehr zarten und wenig stabilen Flaschen, ihre grosse Zerbrech- lichkeit, wird durch einen praktischen Flaschenständer (Preis 50 Pf.) bedeutend eingeschränkt. Nicht unerwähnt möchte ich an dieser Stelle lassen, dass in unserem Institut das Chloräthyl auch zum Q Bluntschli: Neuerungen am li. Jung'schen Studentenmikrotom. XX, 1. Härten weicher Paraffinblöcke mit viel Erfolg angewandt wird nnd uns schon manches lästige Umbetten erspart hat. Was meine eigenen Erfahrungen mit den eben beschriebenen Neuerungen betritft, so möchte ich zunächst namentlich die Chlor- äthyl-Gefrierkammer warm empfehlen. Auch beim Paraffinschueiden erzielte ich sehr schöne Erfolge. Konnte Schiefferdecker das alte Modell 1892 als nur dort zweckmässig und empfehlenswerth be- zeichnen , wo es nicht auf feineres Arbeiten , auf lückenlose Serien ankomme, so lassen mich meine Erfolge das Instrument entschieden höher einschätzen. Ich habe eine ganze Anzahl lückenloser, embryo- logischer und histologischer Serien von 10, ja von 5 ju Schnittdicke herstellen können und bei geeigneten Objecten erzielte ich bisweilen Schnitte von 2'5 /u, Dicke. Dass man grosse Paraffinobjecte mit einem derartigen Instrument nicht zweckmässig schneiden kann, ist ja ohne weiteres zuzugeben , aber für die Bedürfnisse , für welche das Mikrotom vor allem gebaut wurde, für histologische und andere mikroskopische Uebungscurse, dann zur Verwendung für in Zeit und Instrumenten beschränkte Untersucher, wie vor allem Aerzte etc. — für diese Zwecke thut das Mikrotom recht gute Dienste und ist als entschieden preiswerth zu bezeichnen. Dass ein derartiges Instru- ment auch für Botaniker von nicht zu unterschätzender Brauchbar- keit ist, hat L. KocH^ mitgetheilt. Einigermaassen beschränkt ist die Verwendbarkeit des längs- gestellten Messers. Abgesehen davon, dass die Objectgrösse nicht ohne Nachtheil 0'8 cm in der Breite und 1'2 bis 1'5 cm in der Länge überschreiten darf, lässt sich, sofern es sich um einiger- maassen harte Celloidinpräparate handelt, nicht immer die gewünschte minimale Schnittdicke erzielen. Während weiche Celloidinobjecte sich bei 10 /^ gut schneiden Hessen, musste bei härteren die Schnitt- dicke mit 15, 20, ja eventuell 25 /u bemessen werden. Je sorg- fältiger die Objecte eingestellt wurden und je leichter der Handgritf bewegt wurde , um so schöner waren die erzielten Resultate , die sich mit zunehmender Uebung ausserordentlich besserten. Ja , ich möchte sie als erstaunlich gute bezeichnen, wenn ich die theoretischen Erwägungen , die sich der Construction des langen Messerträgers entgegenstellen , erwäge , und wenn ich die sicher unzweckmässige Thatsache, dass der am meisten federnde, freie Theil des Messers zuerst zum Schneiden kommt, in Betracht ziehe. — Ein etwas ab- 1) Pringsheim's Jahrb. f. wiss. Bot. Bd. XXIX, 1896. XX, 1. Krefft: Rotations -Mikrotom „Heizberge '•. 7 geändertes, stabileres Instrument gleichen Charakters, das auch bei harten Präparaten allen Anforderungen genügen soll, will die Firma Jung in nächster Zeit eventuell anfertigen. [Eingegangen am 24. Mai 1903.] Rotations -Mikrotom „Herzber^e". Von Dr. P. Krefft in BerUn- Zehlendorf. Hierzu zwei Holzschnitte. Wohl allen gebräuchlicheren (Schlitten-) Mikrotomconstructionen sind zwei Uebelstände gemeinsam : das Federn des meist recht langen und nur an einem Ende fixirten Messers und der unentwegte Druck, den dasselbe während der Schnittführung auf das zu schneidende Material ausübt. Das letztere Moment macht sich zwar bei Paraffin weniger störend geltend , um so mehr aber dort , wo es sich um elastische Schnittblöcke (Celloidin etc.j handelt. Die unausbleiblichen Folgen dieser Uebelstände , die sogenannten Treppenschnitte , kennt jeder Mikroskopiker, zum mindesten aus seiner Anfängerzeit her. Ueber die Beseitigung besagter Constructionsmängel hatte, ge- wiss unter vielen Anderen, auch der um die mikroskopische Technik in mehrfacher Hinsicht wohlverdiente, leider jung verstorbene Dr. L. Kaplan viel nachgedacht. Seine Stellung als Vorsteher des anato- mischen Laboratoriums der Berliner Städtischen Irrenanstalt „Herz- berge", die er neben der I. Assistenzarztstelle, daselbst bekleidete, gab ihm hierzu besonders reichlich Gelegenheit. Er wusste auch seine Mitassistenten, zu denen ich damals zählte, für sein Mikrotom- problem zu interessiren. Dasselbe zielte im wesentlichen auf die Construction eines Apparates ab , dessen (rundes) Messer etwa wie eine Kreissäge den Schnittblock sozusagen tangential an- und all- mählich durchschneiden sollte. Nach verschiedenem Hin- und Her- berathen gelang es mir, die Lösung des Messerproblems in ebenso 8 K refft: Rotations -Mikrotom „Herzberge". XX, 1. einfacher als, wie die Praxis hinterher lehrte, zweckdienlicher Weise zu bewerkstelligen. Ich ersann mir ein Messer mit halbkreisförmiger. nach aussen gekehrter Schneide, um eine mehr oder weniger excen- trisch daran zu befestigende Welle (Rotationsachse) rotirbar. Zu Beginn der Schnittführung würde das Messer mit dem kleinsten XX, 1. K refft: Rotations -Mikrotom „Herzberge". 9 Radius (vector) dem Block anliegeD, um sieb bei fortgesetzter Rota- tion unter constanter Zunahme des Radius vector ganz allmälilich in denselben einzuschleichen und ihn schliesslich ganz durchzuschneiden. Durch richtige Auswahl der Fixpunktexcentricität des Messers würde man es so einrichten können, dass zum Durchschneiden die ganze Länge der Messerschneide gerade verbraucht, am Schnittblock ge- wissermaassen abgewickelt würde. Das Halbkreismesser würde da- neben noch den grossen Vortheil darbieten, dass während es „hohl läuft", d. h. während der Dauer der zweiten Hälfte einer ganzen Achsenumdrehung, die zur Vorbereitung des nächsten Schnittes nöthige Blockhebung vermittels der Mikrometerschraube ungehindert von statten gehen könnte. So wurde denn nach meinem allgemein acceptirten Vorschlage zunächst ein Holzmodell gebaut, das die Anwendbarkeit des Principes völlig darthat. Herr Dr. Georg Meyer, der mit lebhaftem Interesse an unseren Berathungen theilnahm, hatte eine einfache , aber gut func- tionirende automatische Blockhebung vermittels eines aus der Rotations- achse herausragenden Spornes aus- findig gemacht, der während einer bestimmten Rotationsphase in ein 2. mit der Mikrometerschraube fest verbundenes Zahnrad einzugreifen und die Schraube dadurch empor- zudrehen bestimmt war. Unser allverehrter Chef, Herr Geheimrath Prof. Moeli, hatte darauf die liebenswürdige Gewogenheit, nach unseren Plänen einen derartigen Apparat von Herrn Instrumeutenmacher P. Thate in Berlin (N. Elsässerstr. No. 52) ausführen zu lassen. Der fertige Apparat, den die beigefügte Abbildung darstellt, zeigt noch einige, die ruhige Sicherheit der Function garantireude Modificationen , ins- besondere bezüglich der automatischen Blockhebung, weicht aber principiell in keiner Hinsicht von unserem oben geschilderten Mo- delle ab. Das Messer (Figur 2) hat etwa die Gestalt eines halben Suppön- tellers, wobei zu erwähnen ist, dass die Messerklinge den Rand und der Messergriff, an dem ein breiter, zur Befestigung der Rotations- achse dienender Schlitz bemerkbar ist , den Boden des Tellers dar- stellt. Beide Theile sind in einander gefalzt und durch Schrauben 10 Krefft: Rotations -Mikrotom „Herzberge". XX, 1. starr verbunden , doch lässt sich zum Zweck des Messerabziehens und -Schleifens ein besonderer, handlicher Messergriff an Stelle des Tellerbodens mit leichter Mühe anbringen. Das Verdienst , dieses besonders schwierig zu härtende Messer in tadelloser Qualität her- gestellt zu haben, gebührt der bewährten Firma "Walb in Heidelberg, die das Schneideiustrument iu zwei verschiedeneu Grössen mit dazu passender Abziehvorrichtung liefert. Das Messer wird zwischen einer am Kopfe der Rotationsachse befindlichen Scheibe und einer Schrauben- mutter solide eingespannt und zwar imter, je nach der Dicke des Schnittblockes zu wählender, excentrischer Verschiebung. Als Maass- gabe für die jeweils richtige Excentricität dient eine auf der Achsen- scheibe angebrachte Millimeterscala, deren Bezifterung so angeordnet ist, dass jede Theilstrichzahl den Durchmesser des bei dieser Ex- centricität unter völliger Ausnutzung der ganzen Messerlänge durch- schneidbaren Blockes (in Millimetern) angiebt. Verschiebt man also z. B. den (markirten) Mittelpunkt des Halbkreismessers excentrisch bis zum Theilstrich 12, so kann man bei dieser Excentricität gerade einen Block von 12 mm Durchmesser unter völliger Ausnutzung der ganzen Messerlänge durchschneiden. Die Hauptdrehuugsachse läuft zwischen Spitzen a la Drehbank, hat also eine ebenso sicliere als einfache Führung. Quer durch diese Achse geht ein breiter Schieber , der , durch eine darunter angebrachte Millimeterscala controlirt , in beliebiger Prominenz vermittels einer Klemmschraube befestigt werden kann und die automatische Blockhebung während der zweiten Rotations- phase, d. h. nach vollbrachter Schuittfühnmg, bewirkt. Der heraus- ragende Schieber zieht nämlich einen die Rotationsachse umfassenden Hebel mehr oder weniger weit zur Seite, wobei das andere Hebelende vermittels eines Sperrkeils in die Zähne des an der Mikrometer- schraube sitzenden Zahnrades ^ eingreift, wodurch dasselbe entsprechend weit gedreht Avird ; je weiter also der Stellschieber aus der Rota- tionsachse hervorragt, desto ausgiebiger ist der Hub der Mikrometer- schraube und mithin die Dicke des nächsten Schnittes. Während derselbe ausgeführt wird , federt der die Drehachse umgreifende Hebel, jedoch ohne das Zahnrad der Mikrometerschraube zurück- zudrehen , wieder in die Anfangsstellung selbstthätig zurück. Der gesammte Apparat wird in Thätigkeit gesetzt durch eine Kurbel, die ^) Die Peripherie desselben besteht aus 200 Zähnen; der Umdreiiung des Rades um einen Zahn entspricht ein ScUraubenhub um 0-0025 mm. XX, 1. Kr efft: Rotations -Mikrotom „Herzberge". H durch mehrere Zahnradübersetzuugen, also erst mittelbar und daher um so gleichmässiger auf die Hauptachse wirkt. Die Kurbel kauu beliebig auf das eine oder andere von zwei Zahuradsystemen auf- gesetzt werden, von denen das eine eine Uebertragung von 1 : 5, das andere, entsprechend langsamer, aber noch stetiger arbeitende eine solche von 1 : 15 besitzt. Zum Schneiden von Paraffinserien ist dem Apparate noch ein kurzes Hebelmesser beigegeben, das sich in derselben Weise wie das Halbtellermesser in die Rotationsachse einspannen lässt, welche es bei der Kurbeldrehung also radiär umkreist; die automatische Blockhebung vollzieht sich dabei natürlich in gleicher Weise wie zuvor geschildert. Die bereits theoretisch ohne weiteres ei'sichtlichen , aber auch durch nunmehr dreijährigen praktischen Gebrauch erwiesenen Yor- theile dieser Construction sind : 1) Das Federn (des Halbkreismessers) ist absolut ausgeschlossen. 2) Die Messerführung ist eine besonders sichere und zwar einerseits in Folge der sicheren und einfachen Rotation zwischen Spitzen, anderseits in Folge der mehrfachen Zahnradtransmissionen, die alle der manuellen Kurbeldrehung anhaftenden Ungleichmässig- keiten zum völligen Ausgleich bringt. :]) Die Handhabung ist die denkbar bequemste, insofern sie nur eine Hand überhaupt in Anspruch nimmt und keinerlei besondere Behutsamkeit erfordert. 4) Die Schuittfunction findet unter jeglicher Druckvermeidung in der Weise eines gleichmässigen spiralförmigen Einschleichens statt. Wir haben dem Apparate den Namen Rotatiousmikrotom „Herz- berge" gegeben und die oben erwähnte Firma P. Thate bis auf werteres mit der alleinigen Fabrication desselben betraut. [Eingegangen am 26. Juli 1903.] 12 V. Friedländer: Eine Modification des Pantographen. XX, 1. Eine Moditication des Pantographen (Storclisclmabel) zum Zeichnen mikroskopischer Präparate. Von Dr. Friedrich von Friedländer in Wien. Hierzu ein Holzschnitt. Die Reproductiou mikroskopischer Präparate bei geringer Ver- grösserung ist in Ermanglung mikrophotographischer Behelfe oder eines Projectionsapparates eine recht schwierige und zeitraubende Arbeit. Die technischen Berufe bedienen sich zur Reproduction kleiner flaclier Objecte schon lange eines Zeichenapparates, des Pantographen , der für diese Zwecke vollkommen genügt , bei der Behandlung mikroskopischer Präparate aber deshalb im Stiche lässt, weil der Elfenbeinstift , der den Conturen des zu reproducirenden Präparates folgt, von diesem um die Dicke des Deckglases absteht, weshalb bei der kleinsten Aenderung der Blickrichtung optische Ver- schiebungen eintreten , die jede genaue Wiedergabe der Conturen durch den Zeichenstift verhindern. Diesen Uebelstand habe ich durch eine kleine Modification des Pantographen, dessen Construction und Verwendung ich als bekannt voraussetzen darf, behoben. Jeuer Winkel des Parallelogranimes , der beim Storchschnabel den Führungsstift trägt , ist nicht wie bei diesem um eine solide verticale Achse zu variiren, sondern die beiden Schenkel des Parallelo- grammes, die hier zusammenstossen, articuliren in einem Ringgelenk von 40 mm lichter Weite, dessen idealer Mittelpunkt der Kreuzungs- stelle der Achsen beider Schenkel entspricht. Es ist dadurch die Möglichkeit geboten, das zu reproducirende Präparat direct von oben her zu betrachten. Der den Conturen des Präparates folgende Stift musste naturgemäss auch in seiner Gestalt und Lage geändert werden. Er ist bei dem nebenbei abgebildeten Apparat seitlich an einem Parallelogrammschenkel angebracht und geht schräge von dort bis XX, 1. V. Fr ie dl an der: Eine Modification des Pantographen. 13 zur Ebene des Präparates. Sein Lager ist um eine horizontale Achse drehbar, und der Stift selbst gleitet in einer schrägen Hülse, so dass seine Spitze trotz verschiedener Dicke der zu zeichnenden Objecte stets in den Mittelpunkt des Gesichtsfeldes gebracht werden kann. Sowohl der Stift in der Hülse als diese selbst können durch Schrauben in der gewünschten Lage fixirt werden. Das Riuggelenk beider Parallelogrammschenkel ist zur Aufnahme einer Lupe eingerichtet , wodurch die Abbildung mikroskopischer Präparate wesentlich erleichtert wird. Der ganze Apparat wird mit einer Schraube (bei Ä) auf einem Zeichenbrett fixirt, welches zweckmässig im Bereiche der Zeichenlupe einen mit Glas gedeckten Ausschnitt zur Ermöglichung des Arbeitens bei durchfallendem Lichte besitzt. Die Anwendung des Apparates •^, welcher das Object in zwei- bis zehnfacher Vergrösserung wiedergiebt, ist genau dieselbe wie die des Storchschnabels. Während die rechte Hand den bei C durch eine conische Schlitzschraube gesteckten Zeichenstift führt, coutrollirt das Auge von oben her durch den Ring , resp. durch die Lupe die Bewegungen des Führuugsstiftes am Präparate. Die Handhabung des sehr präcise arbeitenden Apparates ist bei einigem zeichnerischen Geschicke in kürzester Zeit erlernt. Selbst- verständlich ist er nicht nur zur vergrösserten Abbildung histolo- gischer Präparate, sondern auch zur Reproduction dicker flacher Objecte z. B. Knochenscheiben etc., oder von Zeichnungen verwend- bar , und dürfte sich auch zur raschen Herstellung schematischer Figuren zu Demonstrationszwecken eignen. ^) Er wird von Herrn Hermann Dümler, Mechaniker, in Wien IX, Schwarzspanierstr. 4, verfertigt. 14 Hinter berger : Thermophore für Färbezwecke. XX, 1. Schaltet man statt des Führungsstiftes einen feinen Bleistift ein, und legt man das zu reproducirende Object unter den Zeichenstift bei C, so lassen sich auch sehr exacte Verkleinerungen bewerk- stelligen. 'ö^ [Eingegangen am 21. April 1903.] Thermophore für Färbezwecke. Von Dr. A. Hiiiterberger in Wien. Hierzu ein Holzschnitt. Bei vielen Färbemetlioden spielt längere oder kürzere Erwärmung der Farblösungen eine wichtige Rolle. Das Erwärmen der Farb- lösungen über der Flamme hat aber oft Unbequemlichkeiten. Sowohl das Glasschälchen als auch besonders das mit der Farblösung be- deckte Deckglas kann springen und dadurch der Tisch des Ar- beitenden oder auch dessen Kleider arg verunreinigt werden, das Halten über der Flamme ist äusserst langweilig, wird auch zuweilen ermüdend, die Temperatur der Farblösung bei diesem einfachsten Vorgehen wechselt sprunghaft, wodurch Schnitte sich verbiegen und schrumpfen , eintrocknen der Farblösung auf dem Deckglase kommt vor u. dergl. unerwünschte Nebenerscheinungen. Ich habe daher die Oesterr. -Ungar. Thermophor-Unternehmung veranlasst , Thermo- phore für Färbezwecke nach meiner Angabe zu verfertigen und bringe hiermit diese einfachen Apparate zur Kenntniss. Das Bild ersetzt jede Beschreibung. Der Durchmesser der Kästchen ist 9 cm (ungefähr der gleiche der üblichen Petri-Schalen) , die Höhe 4 cm. Die Kästchen haben oben eine Einbuchtung für Krystallisationsschalen, in welche die warm zu haltende oder zu erwärmende Farblösung gegossen wird. Je nach der Füllung der Kästchen mit Natriumacetat oder Baryumhydrat halten die Kästchen kalt eingegossenes destillirtes XX, 1. Hinteiberger: Thermophore für Färbezwecke, 15 Wasser im unbedeckten Schälchen eine Stunde lang auf einer Tem- peratur von 44^ bis 41^ C. respective 54° bis 51° C. Im bedeckten Schcälcheu wird eingegossenes kaltes Wasser bald warm und sinkt dann innerhalb anderthalb Stunden von etwa 49 ° auf 43°, respective beim Baryumhydrat-Thermophor von 60° auf 42°. Der mit Natriumacetat gefüllte Thermophor muss 7 Minuten lang in kochendes Wasser gelegt werden, um seine Wirkung zu ent- falten , der mit Baryumhydrat beschickte Thermophor hält um so länger warm, je länger er vorher im kochenden Wasser erhitzt wurde. Das mit Natriumacetat gefüllte Kästchen hat an seiner Unter- seite eine Schraube , welche dazu dient , den Thermophor , im Falle derselbe zu lange erhitzt wurde , durch Drehen derselben wieder brauchbar zu machen. Die Thermophore würden nach Angabe der Ingenieure der Thermophorgesellschaft länger warm halten, wenn sie grösser wären, wenn also ein Kästchen mehrere Vertiefungen für Schälchen trüge. Ich habe aber die Kästchen klein machen lassen, damit man sie in kleinen Gefässen in kochendes Wasser legen kann, also rascher die Apparate bei Beginn der Arbeit zur Hand haben kann. Diese Thermophore , besonders der mit Natriumacetat gefüllte , sind auch für andere Kleinigkeiten verwendbar. Sie sind bequem zu verwenden, um beschickte Deckgläser durch Auflegen auf den warmen Ther- mophor schonend lufttrocken zu machen oder den Alkohol oder Wasser von gefärbten Deckglaspräparaten zu verjagen. In Bezug auf die Resultate bei Färbimgen mit diesen Thermo- phoren habe ich einstweilen nur beobachten können , dass Paraffin- 16 Hinterberger: Thermophore für Färbezwecke. XX, 1. schnitte auf kleinen Objectträgeru aufgeklebt und auf Tuberkel- bacillen unter Anwendung des Baryumhydrat -Thermophors gefärbt, gute Färbungsresultate ergeben, da der Schnitt nicht schrumpft, wie es hie und da beim Erwärmen auf dem Objectträger über der Flamme vorkommt. Deckglaspräparate mit tuberculösem Eiter zeigten keinen unterschied bei Färbung im Thermophor oder über der Flamme. Ich halte es nur für bequemer z. B. vier verschieden grosse Deckgläser mit verschiedenen Sputis eine halbe Stunde alle zusammen im Schälchen auf dem Thermophor liegen zu lassen, als vier Deckgläser vorsichtig, wenn auch nur kurze Zeit, einzeln über der Flamme halten zu müssen. Die halbe Stunde kann ja immer für andere Arbeit inzwischen verwendet werden. Es ist sehr indi- viduell, ob Jemand gerne mit Apparaten oder Instrumenten arbeitet oder nicht. Wer gerne Alles rasch mit möglichster Vermeidung von Apparaten , der Geschicklichkeit seiner Hand vertrauend , macht, wird diese Thermophore kaum gerne verwenden. Ich glaube aber, dass für manche feinere Färbemethoden und für Arbeiter, welche zwar langsam aber sicher arbeiten wollen , welche die Temperaturen der Farblösungen stets wissen, oder welche mehrere Präparate zugleich, mehrere verschiedene Färbungen neben einander zur gleichen Zeit ausführen wollen , diese Thermophore Werth haben können , weil man sie ja vor allem nicht beaufsichtigen muss , wne eine Flamme oder auch ein Wasserbad oder dergleichen. [Eingegangen am 19. April 1903.] XX, 1. Schuberg: Fläschchen für Immersionsöl. 17 Fläschclien für Immersionsöl. Von Prof. Dr. A. Schuberg- in Heidelberg. Hierzu ein Holzsclinitt. Die Zähflüssigkeit und Kiebrigkeit des als Immersionsflüssigkeit vorzugsweise benutzten eingedickten Cedernöls machen dieses viel- fach zu einem Gegenstande des Aergers und des Zeitverlustes. Bei den gewöhnlichen, zu seiner Aufbewahrung dienenden Gläschen älterer Constructionen ist es in der Regel auch bei sorgfältigster Benutzung nicht möglich, ohne Beschmieren des Gläschens, seines Stöpsels oder Deckels — oft genug auch der Finger — auszukommen. Es sind deshalb mehrfach besondere Fläschchen construirt und angefertigt worden, welche den erwähnten üebelständen abhelfen sollen. Die neuesten mir bekannt gewordenen Fläschchen sind die von Arthur Meyer ^ und W. Gebhardt. - Indessen scheinen mir beide noch nicht allen Anforderungen zu genügen. Vor allem können beide nur durch Ausspülen mit Flüssigkeiten gereinigt werden und enthalten Räume, welche für eine rein mechanische Reinigung oder Austrocknung un- zugänglich sind. Ferner aber sind sie im gefüllten Zustande, wenn auch nicht viUlig untransportabel, doch nicht ganz bequem zu verpacken und im Mikroskopkasten unterzubringen. Aus diesen Gründen habe ich geglaubt, ein schon vor einigen Jahren (1896) construirtes Gläschen, das auch die zuletzt erwähnten Uebelstände vermeidet, dennoch anfertigen lassen zu sollen. Da dasselbe in- zwischen durch längere Benutzung von verschiedenen Seiten als durchaus zweckmässig erprobt wurde , so dürfte seine Beschreibung an dieser Stelle wohl gerechtfertigt sein. Besonderen Dank schulde ich dem bewährten Optischen Institut W. u. H. Seibert in Wetzlar, ^) Meyer, A., Ein Glas für Immersionsöl und Canadabalsam (Diese Zeitschr. Bd. XIV, 1897, p. 174). ■-) Gebhardt, W. , Fläschchen zur Aufbewahrung des Immersionsöls (Diese Zeitschr. Bd. XIV, 1897, p. 348). Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 1. 2 18 Schuberg: Fläschchen für Immersionsöl, XX, 1. welches die praktische Ausführung zu veranJassen die Freundlich- keit hatte. ^ Bei den für Immersionsöl bisher meist üblichen Fläschchen mit eingeschlitfenem Glasstöpsel und aussen auf den Hals des P'Iäschchens aufgeschlitfener Glocke wird sehr bald der Raum ober- halb des Stöpsels sowie dessen Gritf vom Gele bedeckt. In Folge dessen läuft das Gel am Rande des Fläschchens herunter und be- schmiert nicht nur diesen und den Griff des Stöpsels, sondern klebt auch die aufgeschlitfene Glocke fest. Diesem Uebelstande steuert nun mein Modell dadurch , dass das Gläschen sich oberhalb des Halses, in welchem der Glasstöpsel sitzt, so erweitert, dass der Durchmesser der trichterfitrmigen Erweiterung dem Durchmesser des Fläschchens , das im übrigen die gewöhnliche Flaschenform besitzt, gleich ist. Auf den äusseren Rand dieser Erweiterung ist die bedeckende Glocke auf- geschliffen. Der Glasstöpsel, welcher zur Ent- nahme des Gels in einen , bis nahe zum Grunde des Gläschens reichenden Glasstab -a sich fortsetzt, überragt mit seinem abgeflachten Griff den oberen Rand der Erweiterung und besitzt drei tiefe Rinnen («), welche unterhalb seines Griffes beginnen und bis zum unteren Rande des Fläschchenhalses hinabreichen. Durch diese Rinnen läuft alles beim Heraus- nehmen des Stöpsels überflüssig mitgenommene Gel leicht und sofort in das Fläschchen zurück. Der die Fortsetzung des Stöpsels bildende Glasstab ist bedeutend dünner als der Stöpsel selbst und trägt an seinem Ende eine ganz kleine birn- förmige Verdickung. Es ist von \Yiehtigkeit , dass der Glasstab ziemlich dünn ist und keine zu grosse Verdickung an seinem Ende besitzt, da natürlich eine um so geringere Gehnenge mit ihm heraus- genommen wird, je kleiner sein Durchmesser, und damit auch seine Oberfläche bemessen ist. Um die , bei der zähen Consistenz des Oeles auch so noch immer etwas zu reichliche Menge desselben weiter zu verringern, streift man den Glasstab beim Her- a ^^ ^) Das riäschclien wurde schon in mehreren Katalogen von W. u. H. Seibeht angezeigt; da jedocli in dieser Zeitschrift n(tch kein Hinweis dar- auf gegeben wurde, dürfte die vorliegende Notiz vielleicht nicht überflüssig erscheinen. XX, 1. Schuberg: Fläschchen für Immersionsöl. I9 ausziehen an der unteren Kante des Flasclienhalses ab, der zu diesem Zwecke ziemlieh scharf von dem Hauptraum des Fläschchens abgesetzt ist. Die ganzen Dimensionen des letzteren nun , wie diejenigen seiner oberen Erweiterung und des Glasstabes sind so bemessen, dass man höchstens bei ganz schrägem Herausziehen des Stöpsels den oberen Rand der Erweiterung des Fläschchens mit dem Stöpsel oder Cllasstab berühren und damit mit Oel bedecken kann. Praktisch ist jedoch eine Verunreinigung des Randes beim Herausziehen des Stöpsels so gut wie unmiiglich 5 denn wenn man ihn vorher in der angegebenen Weise abgestreift hat, so ist ein Herabtropfen überschüs- sigen Oeles so gut wie ausgeschlossen. Der am Ende des Glasstabes verbleibende Tropfen genügt gerade zur Ausfüllung des Raumes zwischen Objectiv und Deckglas. Zweckmässig ist es, das Fläschchen nur etwa bis zur Hälfte mit Oel zu füllen, weil dann die Menge des an der Oberfläche des Glasstabes haftenden Oeles eine kleinere ist als bei reichlicherer Auffüllung. Die im Fläschchen enthaltene Oelmenge reicht auch so noch für sehr lange Zeit. Es läge nahe, aus diesen Gründen die gesammten Dimensionen des Gläschens kleiner zu wählen. Dies geschieht jedoch absichtlicli nicht, weil das Herabgehen unter ein gewisses Grössenmaass das Fläschchen weniger stabil machen würde, und weil das gewählte Verhältniss von Höhe und Durchmesser nothwendig ist , um ein Beschmieren des oberen Randes der Er- weiterung beim Herausnehmen und Abstreifen des Stöpsels, beziehungs- weise Glasstabes zu verhindern. Beim Transport wird der Glasstabstöpsel durch einen Kork- stopfen oder einen gewöhnlichen, besonders eingeschlifFeuen Glasstöpsel ersetzt ; in letzterem Falle ist dann nur zwischen den Stöpsel und die Glocke etwas Watte oder Papier zu stecken. Der Glasstab- stöpsel lässt sich, einfach in Papier oder Watte eingewickelt, bequem in dem zur Aufbewahrung der Objectklammern dienenden Räume des Mikroskopkastens unterbringen. Im Heidelberger Zoologischen Institut werden mehrere Fläsch- chen schon seit einigen Jahren und zum Theil von mehreren Per- sonen gemeinsam täglich benutzt und haben sich dabei aufs beste bewährt. Die Vorzüge der Fläschchen sind kurz zusammengefasst folgende: 1) Der zur Herausnahme des Oeles dienende Glasstab lässt sich, ohne das Fläschchen zu beschmieren, abstreifen und die Quantität 0* 20 Schuberg: Fläschchen für Immersionsöl. XX, 1. des Oeles sich dadurch leicht regulireu. 2) Eine Verunreinigung des Griifes des Glasstabes, des Fläschchenrandes und der übergreifen- den Glocke mit Oel ist so gut wie ausgeschlossen. 3) Alle Theile des Fläschchens sind der mechanischen Reinigung und Austrocknung leicht zugänglich. 4) Der Transport gefüllter Fläschchen ist einfach zu bewerkstelligen. Ein Nachtheil ist auch durch mein Modell nicht ganz zu be- seitigen. Das gewöhnlich zur Benutzung kommende stark ein- gedickte Cedernöl wird nämlich auch in meinen Gläschen bei längerem Stehen im Lichte (und eventuell auch in der Sonne !) noch zäher und dann haftet der Stöpsel natürlich gelegentlich ziemlich fest, wenn das Fläschchen sehr lange Zeit nicht benutzt wurde. In solchem Falle ist im Laboratorium das beste und einfachste, das Gläschen kurz auf den zur Paraffineinbettung dienenden Thermostaten zu stellen, wodurch das Oel wieder leicht flüssig wird. Dieser Uebel- stand wird jedoch auch durch kein anderes Gläschen ganz behoben und liegt nicht an diesem, sondern an der zu starken Eindickung des Oeles. Da diese auch sonst bei der Untersuchung sich vielfach recht störend geltend macht, wird seit einiger Zeit im hiesigen Institut ein leichter flüssiges Cedernöl benutzt. Wenn dieses auch natürlich nicht völlig den Brechungsindex des Glases erreicht, so sind die hierdurch veranlassten Verminderungen in der Leistung der Objeetive so geringe, dass sie, nach unseren Erfahrungen, auch bei feineren mikroskopischen Untersuchungen gefärbter Objecte praktisch völlig vernachlässigt werden können. Dieses leichter flüssige Cedernöl wird auch nach mehreren Monaten nicht so fest, dass ein unbenutztes Fläschchen nicht ohne Erwärmen zu offnen wäre. Die Fläschchen sind, mit Immersionsöl, von W. u. H. Seibert in Wetzlar zum Preise von 2 M. zu beziehen. [Eingegangen am 29. Juli 1903.] XX, 1. de Groot: Eisen -Carmalaun. 21 Eisen - Carmalauii. Von J. G. de Groot, Conservator am Zoologischen Institut zu Utrecht. NacLstehende Zeilen bebandeln die Darstellung eines Farb- stoffes , welcher in der Hauptsache eigentlich nur als das Product einer Aenderung der durch Prof. Mayer in Neapel angegebenen Vorschrift für die Herstellung des Carmalaun zu betrachten ist. Directe Kernfarbstoffe sind stets noch erwünscht, und da der für das am hiesigen Zoologischen Institut bearbeitete Material in Betracht kommende und von mir nach der Vorschrift Mayer's her- gestellte Carmalaun nur in einzelnen Fällen sich bewährte (eine von Dr. Grübler & Co. in Leipzig empfangene Quantität dieses Farb- stoffes erwies sich unseren Präparaten gegenüber als vollständig inactiv) , habe ich mich bemüht , den Carmalaun kräftiger , für die Färbung also wirksamer herzustellen und , was die Hauptsache ist, ein klares und klar bleibendes Extract zu erhalten. Durch folgende Zusammensetzung glaube ich mein Ziel erreicht zu haben : 1) Carminsäure (von F. A. Kahlbaum, Berlin SO.) ..lg 2) Eisenoxydulammonsulfat *J'l „ 3) Alaun 5 „ 4) Wasser, destillirt 200 cc Den unter 2) genannten Bestandtheil bringt man in einem Por- cellangefäss in 20 cc destillirten Wassers durch Erwärmung zur Auflösung und fügt dieser Lösung die unter 1) genannte Quantität Carminsäure hinzu. Ist auch diese letztere völlig aufgelöst, so giebt man nach und nach die übrigen 180 cc destillirten Wassers hinein, wobei man am besten so verfährt, dass man die Erwärmung nach jeden einzelnen Zusatz wiederholt. Ist das ganze Quantum bis zu massiger Dampfentwicklung er- wärmt, so streue man den Alaun darin aus, rühre laugsam mit einem Glasstabe und erwärme weiter , bis die Lösung eine klare , dunkel- violette Farbe annimmt, wonach man sie abkühlt und filtrirt. Jetzt füge man hinzu 2 Tropfen Salzsäure und einen Krystall 22 de Groot: Eisen -Carmalaun. XX, 1, Thymol von der Grösse eines Streichbolzkopfes. Die Salzsäure er- hält den Farbstoff klar, und das Thymol verbindert bekanntlich die Scbimmelbildung-, Trotzdem ist es mir bin und wieder passirt, dass eine auf diese Art hergestellte Lösung, nachdem sie einige Tage gestanden hatte, Spuren von Trübung zeigte. Diese verschAvanden jedoch nach noch- maligem P'iltriren, und die Lösung blieb hinfort klar. Wahrschein- lich war in solchen Fällen die beigegebene Quantität des Thymols um ein Weniges zu gross bemessen worden. Die nach obiger Vorschrift hergestellte Farbstofflösung ist unter dem Namen „Eisen-Carmalaun" au dem hiesigen Institut bereits seit längerer Zeit in Gebrauch, z, B. für die Durchfärbung ganzer Objecte, wie Uteri, Embryonen von verschiedenen Thierarten, Siphonophoren, Solenogastren etc. Die Dauer der Färbung ist natürlich nach der Festigkeit der Gewebe zu regeln , wobei folgende Winke von Nutzen sein können. Ein Embryo im Uterus von 10X7 mm von Mus musculus erfordert 24 Stunden, Embryonen von Tarsius (am hiesigen Institut vielfach zu mikroskopischen Präparaten verarbeitet) erfordern das Doppelte dieser Zeit; ein Oviduct vom Affen, 20x7 mm, ebensoviel. Ein Affenuterus von der ungefähren Grösse eines Zweimarkstückes (nach Abschueiden der äusseren Wandj erfordert dagegen 5 Tage. Die zu färbenden Objecte kommen alkoholfrei in den Farbstoff", nach der Färbung eine bis 3 Stunden (der Embryo von Mus musculus also beinahe eine Stunde , kleinere Objecte kürzere Zeit) in destil- lirtes Wasser, darnach so lauge in 70proceutigen Alkohol (der stetig zu erneuern ist) bis dieser ziemlich klar bleibt , und endlich in 90- procentigen Alkohol. Hat man gut couservirtes Material, dann erzielt man eine, der des Alauncarmin nach Grenacher mindestens gleichkommende, kräf- tige, schön violette Kernfärbung. Auch kann man mit dieser Lösung Schnitte auf dem Glase färben. Diese müssen jedoch, will man eine Kernfärbung erzielen, nachher mit halbprocentiger Salzsäure ausgewaschen werden. Fügt man , nach längerem Färben der Schnitte , der Salzsäure gleiche Theile einer halbprocentigen Lösung von gelbem Blutlaugensalz in Wasser hinzu , so kommt nach dem Auswaschen der Schnitte im destillirten Wasser , aber noch besser und deutlicher wahrnehmbar in dem darauf folgenden Bade in 70procentigem Alkohol, in Folge XX, 1. de Groot: Eisen -Carmalaun. 23 des Zusammentreffens mit dem in der Lösung vorhandenen Eisen eine blaue Färbung des Plasmas zu Stande. Hiermit habe ich mich jedoch nicht eingehender beschäftigen können, und nur Erfahrenen ist es anzurathen, des weiteren eventuell gewünschte Versuche damit zu machen. Für directe Kernfärbung der Schnitte löse man 5 g Alaun in 80 cc destillirten Wassers , erwärme und füge , sobald der Alaun gänzlich gelöst ist, 20 cc des oben beschriebenen Eisen- Carmalauns hinzu, erwärme noch einen Augenblick, wonach man wieder abkühlt, filtrirt, einen Tropfen Salzsäure und einen kleinen Krystall Thymol hinzufügt. Diese stark verdünnte Lösung bleibt ebenfalls klar, und man hat nach der vorgenommenen Färbung weiter nichts zu thun, als die Schnitte in destillirtem Wasser abzuspülen, sie etwas länger im TOprocentigen Alkohol liegen zu lassen, und nach steigendem Alkohol und Xylol in Balsam einzuschliessen. Erwähnenswerth scheint mir noch die durch mich gemachte Erfahrung, dass auch der Carmalaun nach Prof. Mayer's Angabe durch Hinzufügung von 2 Tropfen reiner Salzsäure auf 200 cc Färb- lösung klar bleibt (die beobachtete Lösung ist jetzt 5 Monate alt). Zum Vergleich hatte ich zwei Lösungen bereitet, von denen die eine — ohne die Salzsäure — nach 14 Tagen trübe war, während jetzt Boden und Wände der Flasche fast völlig mit einem Kieder- schlag bedeckt sind. Es ist mir bisher aber noch nicht gelungen, auch von dem (Jarmalaun eine verdünnte Lösung — wie vom Eisen-Carmalaun — herzustellen, die zur directen Kernfärbung ge- eignet wäre. 'O' -Utrecht, Mai 1903. [Eingegangen am 8. Juni 1903.] 24 V. Tompa: Zwei botanische Tinctionsmethoden. XX, 1. Zwei botanische Tinctionsmethoden. Von Dr. Arthur von Tompa in Budapest. Im Laufe einer morpliolog'isch - jjenetischen Untersuchung des Rebliolzes wurden unter anderen bei Durchprobirung der mikro- technischen Methoden auch die Tinctionsmethoden in Bezugnahme auf das gegebene Material untersucht. Es stellte sich heraus, dass unter den vielen, auch bei botanischen Untersuchungen angewen- deten Färbemethoden sich keine einzige fand, die bei sicherer Dilferen- zirung zugleich auch eine absolute Haltbarkeit hätte aufweisen können. Die sonst so leicht färbenden, jedoch wegen starker Oxydirbarkeit sowie wegen grosser p]mpfindlichkeit gegen Säuren und Alkalien sehr wenig haltbaren und schnell verblassenden The er färb Stoffe können diesen Anforderungen am wenigsten entsprechen. Es wurden nun nebst den in der zoologischen Mikrotechnik zur Anwendung gelangen- den verschiedensten Färbemethoden auch viele der als veraltet hin- gestellten durchprüft, dann wurden gänzlich neue versucht, bis endlich zwei davon als den gestellten Anforderungen entsprechend gefunden wurden, deren nähere Beschreibung ich nun folgen lasse : /. Die Safflor- Berlinerblau- Alkannatinctio7i. Sie beruht auf der altbekannten Thatsache , dass pflanzliche Gewebeschnitte in auf einander folgender Behandlung mit Eisen- chlorid- und gelben Blutlaugensalzlösungen durch einen in den Zell- wänden selbst entstehenden Niederschlag von Berlinerblau gefärbt werden. Dieser Färbung kommt , wie bekannt , an und für sich schon eine Differenzirung zu , da nur die unverdickten Zellwände gefärbt werden, während Gefässbündel und Sklerenchymgewebe, des- gleichen die Cuticularen und Korkgewebe ungefärbt bleiben. Ich ergänzte nun diese Färbung durch eine Vorbehandlung mit Safflor- tinctur , wodurch eben die aus dickwandigen und verholzten Zellen bestehenden Holz- und Bastfaserngewebe (Hartbast) leuchtend gelb XX, 1. V. Tompa: Zwei botanische Tinctionsmethoden. 25 gefärbt werden. Eine kurze Naclifärbung mit Alkannatinctur ver- leiht, wie bekannt, den Cuticular- und Korkgeweben eine aus- gesprochene Rothfärbung , ohne auf andere Gewebeparthien ein- zuwirken. Eine wuchtige Vorbedingung schön gefärbter Präparate ist, dass man den aus frischem Material verfertigten Schnitten ihren beträcht- lichen Gehalt an Gerbsäure entzieht, indem man dieselben 2 Tage lang in täglich erneuertem 96procentigem Alkohol liegen lässt. Wollte man Schnitte aus frischem Material ohne weiteres anwenden , so Avürde bei der Behandlung mit Eisenchloridlösung ein tiefschwarzer Tintenniederschlag dieselben unbrauchbar machen. Bei Schnitten, die aus älterem Alkoholmaterial stammen, genügt hingegen ein Aus- waschen derselben in Alkohol. Nun kommen die Schnitte in Safflortinctur , welche aus alkoho- lischem Auszug käuflichen Safflors (getrocknete Blumen von Crocus officinalis L.) besteht , worin dieselben mindestens 48 Stunden lang verbleiben müssen. Ein noch längeres Verweilen darin schadet ganz und gar nicht. Hierauf werden die Schnitte in destillirtem Wasser abgespült. (Alkohol entzieht den minder verholzten Geweben theil- weise die Gelbfärbung.) Controlirt man hierauf die Schnitte unter dem Mikroskop, so findet man, dass ausser den Holz- und Bastfaser- parthien auch die Bastparenchymzellen (Weichbast) , eventuell die Markparenchymgewebe mitgefärbt wurden. Dies ist jedoch kein Fehler, da diese dünnwandigen Parenchymgewebe bei den nach- folgenden Behandlungen ihre Gelbfärbung verlieren, während Holz- iind Sklerenchymgewebe dieselbe beibehalten. Jetzt werden die Schnitte in eine 0"25procentige wässerige Eisenchloridlösung gebracht, wo sie 15 bis 30 Secunden lang bleiben sollen, um nach leichtem Ab&pülen in destillirtem Wasser in eine 0*5procentige wässerige Lösung von gelbem Blutlaugeusalz zu kommen. Es ist ganz und gar nicht gleichgültig, ob man die Schnitte anstatt mit Eisenchlorid- lösung zuerst mit gelber Blutlaugensalzlösung behandelt, ein Umstand, welcher eine Begründung in den noch ziemlich unerforschten Ge- bieten der Stereochemie finden wird. Gute Resultate giebt nur die angegebene Reihenfolge. Findet man , dass die Schnitte in der Eisenchloridlösung sich an den Bastparthien stark imd mit freiem Auge sichtbar schwärzen , und dass sie , unter dem Mikroskop con- trolirt, noch ziemlichen Tintenniederschlag aufw^eisen, so ist dies ein sicheres Zeichen, dass die Alkoholbehandlung nicht genügend lange gewährt hatte , und es müssen dieselben noch vollkommener von 26 V. Tornpa: Zwei botanische Tinctionsmethoden. XX, 1. Gerbsäure befreit werden. Sobald die Sclmitte iu die Blutlaugen- salzlösuug gelegt werden, zeigt sich momentan und mit freiem Auge siebtbar au den Bastpartliien eine Blaufärbung, die schnell dunkel wird und nach Ablauf von 10 bis 20 Secunden constant bleibt. Die Schnitte werden nun in destillirtem Wasser , das mit einer kleinen Menge verdünnter Salzsäure angesäuert ist , abgespült , wodurch die Blaufärbung noch intensiver und lebhafter wird. Nach ausgiebigem Abwaschen in destillirtem Wasser gelangen alsdann die Schnitte auf einige Secunden (nicht zu lange !) in eine lieisse wässerige Lösung von Alkanna, welche aus einem concentrirt- alkoholischen Auszuge von Alkannarinde durch Hinzufügen von Wasser und Verdampfen- lassen des Alkohols frisch bereitet werden soll. Nach wiederholtem Abspülen können die Schnitte sowohl durch ,50procentiges Glycerin in Glyceringelatine als auch durch schnelles Durchführen in abso- lutem Alkohol, dann in ein Gemisch von gleichen Theilen Chloroform und absolutem Alkohol , schliesslich in wasserfreiem Chloroform , in durch Chloroform gelöstem Canadabalsam eingeschlossen werden. //. Die Goldti?ir,tionsmethode. Schon vor Jahren habe ich bei Prof. Apäthy in Kolozsvär dessen Jodwasser-Goldchlorid-Ameisensäure-Tinctionsmethode, mittels welcher man an thierischen Geweben so schöne Resultate erzielen kann , an Pflanzenobjecten versucht, habe jedoch gute Färbungen nur an meriste- matischen Geweben erhalten können. Wenn man jedoch Schnitte aus frischem Material, das von einem älteren Pflanzenorgane stammt, verfertigt und mit Goldchloridlösung behandelt, so wirken sowohl die in den Geweben reichlich anwesenden plasmatischen Stofte wie auch die in älteren Pflanzenorganen ziemlich überall sich vorfindenden organischen Säuren beziehungsweise Gerbsäure stark reducirend auf das Goldsalz ein, aus dem sofort eine beträchtliche Menge Gold- metalles niedergeschlagen wird. Dies giebt sich schon makroskopisch als ein dunkler Beleg um jene Gewebe kund , welche zum grössten Theile die oberwähnten reducirenden organischen Verbindungen ent- halten. Unter dem Mikroskop erscheint dieser Niederschlag als eine tiet violettschwarze üeberfärbung der einzelnen Zellen und ihres Inhaltes, wodurch eben das ganze Bild dunkel und verschwommen wird. Mit Ausnahme des oberwähnten Falles der meristematischen Gewebe erhält man bei Dauergeweben älterer Pflanzenorgane durch XX, 1. V. Tompa: Zwei botanische Tinctionsmethoden. 27 blosse Bebandhmg- mit Goldchloridlösung kein differenzirtes , sondern böchstens ein durebweg diffus gefärbtes Bild. leb versnobte nun durcb geeignete Vorbebandlung aucb ältere pflanzlicbe Dauergewebe mittels Goldtinction differenzirend zu färben. Dies gelang mir nacb vielen Versuchen endlich durcb eine Vorbehandlung der Schnitte mit verdünnter Zinnchlorürlösung, welche eben das specifische Reductions- mittel der unter dem Namen „Cassius-Pur pur" bekannten Hydrosollösung des Goldes ist. — Das Verfahren ist kurz das folgende : Schnitte aus Alkoholmaterial, oder solche aus frischem Material nach 48stündiger Alkoholbehandlung, kommen in eine schwache Lösung von Zinnchlorür. Da das käufliche Zinuchlorürsalz nicht dauerhaft ist und mit der Zeit eine tiefgehende Veränderung und Zersetzung erleidet, so ist es angerathen, dasselbe als Lösung selbst zu verfertigen. Zu diesem Beliufe lasse man Zinnmetall mit ver- dünnter Salzsäure einige Stunden lang kochen (Staniolfolien können trotz ihres ein- bis 2procentigen Bleigehaltes anstandslos benutzt werden). Man achte nur darauf, dass immer ein üeberschuss von Zinnmetall vorhanden sei. Nachdem eine genügende Menge von Zinnchlorür als weisser Bodensatz entstanden ist, giesse man nach dem Abkühlen das Ganze sammt dem darin befindlichen Zinnmetall in eine gut schliessende Glasflasche. Die coucentrirte Zinnchlorür- lösung ist nun lange Zeit hindurch haltbar. Von der concentrirten Lösung nehme man 0"5 cc auf je 10 cc destillirten Wassers. In diese 20fache Verdünnung der ursprüng- lichen Lösung werden die Schnitte , welchen vorher in Alkohol ihr reicher Gerbsäureugehalt entzogen wurde, auf 24 Stunden gelegt. Die herausgenommenen Schnitte kommen in destillirtes Wasser, das mit etwas Salzsäure augesäuert wurde (ein Tropfen verdünnter Salz- säure auf ein kleines Uhrglas), werden abgespült und gelangen in eine O'lprocentige wässerige Lösung von Aurum chloratum flavum, welche in demselben Grade wie das Abspülwasser angesäuert wurde, auf die Dauer von 10 bis 80 Secunden (nicht länger!). Es ist von Vortheil, die Goldchloridlösung, auf beiläufig 25^ C. erwärmt, in Gebrauch zu nehmen. Hierauf werden die Schnitte in dem schon vorhin gebrauchten angesäuerten Wasser leicht abgespült und in einer öOprocentigen wässerigen Glycerinlösung mindestens 24 Stunden lang liegen ge- lassen. Während dieser Zeit nimmt die Purpnrfärbung der Schnitte an Kraft und Brillanz der Töne bedeutend zu, und nur zu oft ent- 28 Reinsch: Horizontalschnitte vegetabiler Flächengewebe. XX, 1. steht die leuchtende Purpur- bis Carminfärbung erst mehrere Stunden nach der Goldchloridbehandlung. Da mit diesem merkwürdigen Nach- färbungsprocesse auch eine merkliche Nachdunkelung der Farbentöne Hand in Hand geht, so lasse man die Schnitte im Goldbade ja nicht zu intensiv färben, da sie sonst nach 24 Stunden unfeldbar über- färbt sein würden. Die Schnitte können hierauf durch Alkohole steigender Concentration und Chloroform in Chloroform -Balsam ein- geschlossen werden. Die Ditferenzirung dieser Tinction besteht darin, dass nur unverholzte Zellen wie jene der Bastparenchym-, der cambialen und der Markgewebe, desgleichen die Thyllen gefärbt werden. Auf diese Weise mit Gold unbegrenzt haltbar tingirte Präparate eignen sich unter anderen hauptsächlich zu mikrophotographischen Aufnahmen ohne Lichtfilter, als auch nebst den mit der oben beschriebenen Dreifarbentinctionsmethode gefärbten Präparaten zu directer mikro- skopischer Projectiou. [Eingegangen am 3, Juli 1903.] Neue Methode der Darstellung von Horizontalsclinitten dünner mehrschichtiger vegetabiler Flächengewebe. Von P. F. Reinsch in Erhangen. Hierzu zwei Holzschnitte. Bekanntlich ist es sehr schwierig. Horizontalschnitte anzufertigen (mit dem Mikrotom oder mit freier Hand) von sehr dünnen Flächen- geweben und hauptsächlich grössere (von über 20 qmm Ausdehnung), deren man unbedingt bedarf zur Beobachtung des Verlaufes von Zellsträngen und des Connexes von Parenchymschichten, w^orüber die gewöhnlichen Verticalschnitte nur ein unvollkommenes Bild liefern. An und für sich schon schwierig, den zu schneidenden Körper in XX, 1. Rein seh: Horizontalschnitte vegetabiler Fliichengewebe. 29 entsprechender Lage zu befestigen und einzubetten , ist es noch schwieriger, das Messer so zu führen, dass man eine der Aussen- fiäche genau parallele Schnitttiäche (also die Median-Durchschnitts- ebene des Gewebes) erhält, welche man ja doch in den meisten Fällen erstrebt. Es ist mir nun gelungen, nach vielen vergeblichen Versuchen zunächst an einem Objecte, und zwar an einem für derartige Durch- schnitte auf dem gewöhnlich üblichen Wege (dem Flächenthallus der Khodophyceae) recht schwierigen, ganz ausgezeichnete Resultate zu erzielen vermittels der hier kurz beschriebenen und darnach leicht auszuführenden Methode. Diese anatomische Präparationsmethode erfordert drei von einander gesonderte Arbeiten : 1) Macerirung der Substanz, einfach in Wasser oder mit ätzen- den Lösungen (Aetzkali, Ammoniak, verdünnte Schwefelsäure, Salpeter- säure u. a.). 2) Aufziehen der völlig gereinigten macerirten Substanz auf eine Glastafel und Eintrocknenlassen theils mit theils ohne Gummi oder eine transparente alkoholische Harzlösung. 3) Abziehen der wieder aufgeweichten Schichten der befestigten Substanz bis zu der gewünschten Durchschnittsebene mit einem mikro- skopischen zu der Arbeit geeigneten Scalpell. Ist das Object mit sauren oder alkalischen Lösungen macerirt worden, so muss dasselbe vor dem Aufziehen auf der Glasplatte von dem Aetzmittel befreit (neutralisirt) werden ; im ersten Falle mit Ammoniak, im letzteren mit verdünnter Salzsäure. Durch das Mace- riren ist in den meisten Fällen schon Klebstoff genug entwickelt, damit das Object an der Glasplatte festhafte. Wenn dies nicht ausreichend ist, so muss das Object mit einer sehr dünnen Gummi- oder alkoholischen Harzlösung befestigt werden. Die zweite Arbeit erfordert nur einige Aufmerksamkeit hinsicht- lich der planen und luftfreien Befestigung auf der Glasplatte. Die dritte Arbeit dagegen, um zum Ziele zu gelangen, einen mikroskopisch brauchbaren Durchschnitt in der verlangten Lage im Flächengewebe zu gewinnen, erfordert einige Uebimg und Erfahrung im mikro- skopischen Präpariren. Es kann hier nur Handarbeit in Frage kommen , mit maschineller Einrichtung ist bei diesem Verfahren nichts erreicht. Das gewöhnliche anatomische Schnittmesser lässt sich zur Ausübimg dieses Verfahrens nicht verwenden, und ich habe als zweckmässigstes Messer ein mikroskopisches Scalpell construirt, welches einfach aus der gewöhnlichen Nähnadel hergestellt wird. 30 Reinsch: Horizontalschnitte vegetabiler Flächengewebe. XX,1. Die gewöhnliche Nähnadel, welche aus dem Drahte des feinsten Stahles , den man hat , hergestellt wird , besitzt den erforder- lichen Härtegrad wie auch die nöthige Elastizität. Sie wird ohne weitere Vorbereitung in die Form geschliffen, welche man zu dem Instrumente für das Verfahren be- ^^^ darf. Die mittlere englische oder Schwabacher Nähnadel von 36 mm Länge wird an dem Oehreude nach beistehenden drei Typen zu 15 bis 18 mm Länge (d. h. Schneide) zu- geschliffen. Alsdann wird das Scal- pellchen mit dem spitzen Ende in ein Holzstielchen mit Schellack be- festigt^ (Figur 1). Um nun den dritten Theil des Verfahrens (den schwierigen) aus- zuführen , verfährt mau folgender- maassen. Das auf der Glasplatte ausgebreitete und festhaftende Flächengewebe wird mittels Wasser oder einer geeigneten aufquellend wirkenden Lösung schwach be- feuchtet imd alsdann sofort die aufgequollene Gewebeschicht (a Figur 2) mit dem Scalpelle entfernt. Durch Prüfung unter dem Mikroskope wird erkannt , ob man die gewünschte Gewebeschicht des Objectes vor sich hat oder nicht. Man kann alsdann das Verfahren nach vorheriger Befeuchtimg in derselben Weise an dem stehen gebliebenen 1. \////////////////////////////////L 2. Reste des Objectes {ß) fortsetzen. Man hat jedoch beim Befeuchten der Fläche darauf zu achten , dass die Flüssigkeit nur die Fläche selbst, nicht die Ränder derselben benetzt. ^) Ich habe die ersten dieser Instrumentchen selbst zubereitet. Herr Kleinknecht in Erlangen (Fabrik anatomischer und cliirurgischer Instru- mente) hat mir aber dieselben nachher nach meinen Angaben angefertigt. Die sehr zerbrechlichen Scalpellclien werden einfacher in ein mit Zwinge versehenes Holzstielchcn eingesteckt und werden bei Abgang einfach ein- gewechselt. Bei der erwälmten Firma sind diese Instrumentchen mit Stiel zu beziehen und bitte ich, sich dahin zu wenden. XX, 1. Heins ch: Horizontalschnitte vegetabiier Fliichengewebe. 31 Es würden sonst beim Bearbeiten der Fläclie mit dem Scalpell einzelne Tlieile derselben , welche sich durch Aufweichen von der Glasplatte abgelöst haben , abgerissen werden. Bei sehr delicateu Gegenständen (Blumenblättern, Delesserien, Rhodymenien, Plocamien und anderen Rhodophyceae) ist es geeignet, nur die kleine Fläche des Objectes zu benetzen, die man bearbeitet (also etwa 1 qmm). Man taucht zu dem Behüte das Scalpell in die Flüssigkeit und be- arbeitet den Flächentheil gleichzeitig mit der Benetzung durch die am Scalpell haftende Flüssigkeit. Man bearbeitet in kleinen Par- cellen auf diese Weise die ganze Fläche des Objectes. Die Schneide des elastischen Scalpelles wird leicht aufgesetzt und in schräger Richtung gegen die Fläche in schabender, nicht in schneidender Eigenschaft geführt. Die Ausübung des Verfahrens erfordert natürlich Uebung und Geschicklichkeit. Die ersten Ver- suche werden vielleicht missglücken, man wird aber bald durch die Leistungsfähigkeit des Verfahrens befriedigende Resultate erzielen. Das Verfahren^ habe ich zunächst an dem Thallus der Rhodo- phyceae von zusammengesetzter, mehrschichtiger Structur in aus- gedehnterer Weise in Anwendung gebracht, und besonders ist es geeignet zur Ermittelung der Structurverhältnisse oder Fructifications- organe dieser Pflanzen fStichydien, Coccidien, Cystokarpien, Anthe- ridien) von zumeist complicirtem Baue. Als ein Beispiel der Nütz- lichkeit des Verfahrens führe ich Auffindung und Herstellung der Ursprungsstelle der sporentragenden Fäden und Sporenketten im Cystokarpium bei den Rhodophyceae an. Diese Stelle wurde seit- her allgemein als in den Zellen der Medianschicht des Thallus liegend verlegt. Aus Präparaten mit dieser neuen Methode aber ergiebt sich, dass die sämmtlichen Sporenketten von einer einzigen Zelle entspringen , welche wohl ihren Ursprung einer Zelle der Me- dianschicht verdankt, aber durch Resorption der benachbarten Zellen der Medianschicht vermittels zahlreicher Protoplasmafäden wie auch namentlich durch die zahlreichen Verästelungen, welche zu sporen- tragenden Zellsträngen auswachsen , als Primärz^lle (Sporophorium) des zumeist halbkugeligen Sporencomplexes zu erkennen ist. "" Bei Verticalschnitten durch das Cystokarpium ersieht man nur Segmente *) Das Verfahren bezeichne ich als: „Mikrotomische Schabmanier" (Maniere microtomique par ratissement; Microtomic manner through scraping). -) Das Detaü hierüber , welches nicht hierher gehört , findet sich in der „Flora" wie in der „Hedwigia". 32 Reinsch: Horizontalschnitte vegetabiler Flächengewebe. XX, 1. der im Cystokarp flach sich ausbreitenden Primärzelle und kann diese im Schnitte mehr oder minder regulär umgrenzten Segmeute nicht anders deuten als zur Medianschicht gehörige Thalluszellen, was auch alle Abbildungen und Angaben von Cystokarpdurchschnitten ganz deutlich zeigen. Für die Histologie und die morphologische Anatomie der Gefäss- pflanzen lässt sich das „Schabverfahren" ganz entschieden sehr vor- theilhaft verwerthen, wie ich aus einigen vorläufigen Versuchen hierüber constatiren kann. Das auf die beschriebene Weise präparirte Blatt irgend eines breitblätterigen Sedum (am besten mit Kalilösuug macerirt) zeigt, nachdem die Epidermis von dem auf der Glasplatte aufgeweichten Blatte mit der Pincette abgezogen ist und die ausser- halb der gewünschten Lage befindlichen Zellschichten durch Präpa- ration mit dem Scalpell entfernt sind, ungemein schön den Verlauf und die Abzweigungen der Terminusgefässröhreu, sowie alle Details des Blattbaues (Luftkanäle in ihrem Zusammenhange und mit den Spaltöftuuugeu) ungemein klar. Auf Details , welche man an den üblichen Blattverticalschuitten nicht sieht, ist hier nicht einzugehen. Die angeführten Beispiele bezüglich der Nützlichkeit des neuen Verfahrens für Pflanzenauatomie mögen genügen , der Anatom wird in jedem einzelnen Fall das Detail des geeigneten Verfahrens, im allgemeinen beschrieben, nach mehreren Versuchen ausfindig machen. — Auch für die mikroskopische Anatomie der Thiere, insbesondere der Wirbellosen (Spongieu, Anthozoen u. a.) wird das Verfahren ge- wiss nutzbringend sein. Z u s a t z. Nach Schluss der vorstehenden Mittheilung wurde noch eine kleine Erweiterung und Vereinfachung des Verfahrens für einzelne Fälle ausfindig gemacht. Hat man es mit Zellflächen zu tliun von ungleicher und höckeriger Beschafl'enheit, z. B. dem frucht- tragenden flachen Thallus vieler Rbodophyceeu (Delesserien, Iridaeen, Plocamien , Sphaerokokken , Rhodymenien u. a.) , so lässt sich das Verfahren abkürzen. Die im Thallus versenkten sphäroiden oder ellipsoiden Goccidien ragen über die Thallusfläche beiderseits hervor. Um einen Horizontalschnitt durch das Coccidium zu gewinnen, wird das zubereitete Thallusstück auf die angegebene Weise befestigt. Bevor man die Schabarbeit mit dem Scalpellchen beginnt, wird der über die Fläche vorstehende Höcker, welclien das Coccidium bildet, nach vorheriger Befeuchtung mit schwacher Kalilauge mit einem scharfen , planen Mikrotommesser in der angedeuteten Richtung durch einen „Drehschnitt" von der Thallusfläche abgetrennt. Das XX, 1. Reinsch: Horizontalschnitte vegetabiler Flächengewebe. 33 abgeschnittene Kegelchen ergiebt für sich, aufgeweicht in Kalilauge, ein einzelnes Präparat, einerseits die Aussenfläclie (die peripherische Zelllamelle mit der Apertur), anderseits die Horizoutalschnittfläche des Coccidiums zeigend. Der stehengebliebene Rest des Coccidiuras lässt sich alsdann noch weiter in der angegebenen Weise bearbeiten. In wie weit dieser kleine Zusatz zum Verfahren , die gleichzeitige Anwendung des gewöhnlichen Schnittmessers hiermit, auch auf Gefäss- pflanzen (ausser dem angegebenen Falle) sich ausdehnen lässt (Ge- fäss-, Samen-, Frucht-Durchschnitte), habe ich noch nicht ermittelt. Erlangen (Bayern), 28. Juli 1903. [Eingegangen am 29. Juli 1903.] Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 1, 34 Referate. XX, 1. Referate. 1. Präparationsmethoden im allgemeinen. Rolide , E. , Untersuchungen über den Bau der Zelle. 1. Kern und Kernkörper (Zeitselir. f. wiss. Zool. Bd. LXXIII, 1903, p. 497 — 682 m. 9 Tfln.). Zur Untersuchung kamen alle Arten von Zellen, Eier, Ganglien- zellen , Muskelzellen, Drüsenzellen, Epithelzelleu, Bindegewebszellen, Neurogliazellen, Blutzellen und zwar von den verschiedensten Thier- klassen: Säugern, Amphibien, Fischen, Mollusken, Würmern, Arthro- poden; ferner von Protozoen die Kerne der Infusorien und von Actinosphaerium. Die Zellen der Metazoen -wurden theils frisch auf Zupfpräparaten in Blut oder in Methylenblau , theils auf Schnitten nach Sublimat- oder Osmiumfixirung untersucht. Bei letzterer ist unbedingt zu berücksichtigen, dass nicht zu grosse Stücke — höchstens ein viertel Erbsengrösse — genommen werden. Die Objecto blieben 10 bis 15 Minuten in einer einprocentigen Osmiumsäure und kamen dann für mindestens 24 Stunden in Weigert'scIics Pikrocarmin. Auf diese Weise ist meist eine gute Doppelfärbung von Kern und Plasma zu erzielen. Die Schnitte von Sublimatmaterial wurden theils in WEiGERT'schem Pikrocarmin und Hämatoxylin (besonders von Dela- field), theils mit rothblauen Farbstoffgemischen tingirt. Von letz- teren leistet besonders das Jodgrün-Fuchsin in der Zusammensetzung von Zimmermann recht gute Dienste. Ditferenzirt wurde hierbei theils nach den Angaben von Auerbach mit absolutem Alkohol, theils mit Giycerin. Bei letzterer Art von Difterenzirung wurden die mit ver- dünntem Alkohol auf dem Objectträger festgeklebten Schnitte für XX, 1. Referate. 35 wenige Minuten in die Jodgrün-Fuchsinlösung gebracht, darauf, ohne Abspülen des Farbstofltes , ein Tropfen Glycerin auf das Object ge- geben und mit dem Deckglas bedeckt. An dem einen Rande des letzteren wurde dann so lange neues Glycerin zugeführt und am entgegengesetzten Rande durch Fliesspapier wieder abgesogen , bis aller überschüssige Farbstoff' unter dem Deckglas entfernt schien. Die Diff'erenzirung erfolgt meist innerhalb weniger Stunden, bisweilen aber langsamer, ausnahmslos aber nach 24 Stunden. Ist die Diff'e- renzirung beendet , dann ist es nothwendig , dem Präparate so viel Glycerin zu entziehen , dass nur noch eine minimal dünne Schicht davon unter dem Deckglas bleibt, sonst leidet die Diff'erenzirung bald. Verf. bemerkt noch , dass auch das WEioERT'sche Pikrocarmin nach Sublimatfixirung sehr gute Doppelfärbung geben kann, die übrigens vor manchem Irrthum, zu dem die Jodgrün-Fuchsin-Färbung führen kann, bestens bewahrt. Die Protozoen wurden zu mehreren Hundert mit recht wenig Wasser in ein kleines Gefäss gebracht und mit einer reichlichen Menge 5procentiger Sublimat -Kochsalzlösung Über- gossen. Nach einstündiger Einwirkung der Fixirungsflüssigkeit kamen die Objecte für kurze Zeit in SOprocentigen Alkohol und wurden dann allmählich in TOprocentigen überführt. Die Färbung geschah auf dem Objectträger. 10 bis 12 Exemplare wurden gleichzeitig mit einem Tropfen der Jodgrün-Fuchsin-Lösung für mehrere Minuten be- deckt, dann nach Absaugen der Farbe mit Fliesspapier mit Glycerin difi"erenzirt. E. Schoehel {Neapel). Pappenlieiiii , A. , F ä r b e r i s c h e s zur K e n n t n i s s des so- genannten C h r m a t i n k r n s (Kernpunktes) von Protisten (Berl. klin. Wochenschr. 1902, No. 47, p. 1095). Verf. schliesst sich den vor kurzem in obiger Zeitschrift von Feinbebg publicirten Anschauungen über die principielle Verschieden- heit der Kernsubstanz bei höheren und bei einzelligen Orga- nismen auf Grund ihres verschiedenen färberischen Verhaltens gegen- über der Romanowsky' sehen Färbung an, hält es jedoch fiir gewagt, aus der entsprechenden Färbung der Krebszelleinschlüsse etwa auf deren parasitäre Natur zu schliessen. Man kann nicht jede Kernsubstanz deshalb für gleichbedeutend mit dem Chromatinkorn von Protisten halten, weil sie sich, wie dieses, durch das „Roth aus Methylenblau" färben lässt; hierbei muss auch ihr sonstiges Ver- halten berücksichtigt werden. Im Zellkern höherer Organismen hat Verf. ebenso wie Feinberg das Vorkommen eines besonderen „cya- 3* 36 Beferate. XX, 1. nophilen Nucleolus", der dem Chromatinkorn der Protozoen fehlt, nachgewiesen ; deshalb sei das Chromatinkorn weder mit dem Nuclein noch der Nucleoleusubstanz (Nucleolin) gleich bedeutend. Diese Verschiedenheit hält Verf. auch durch die Färbung mit basischem Methylgrün erwiesen, welches ganz specifisch nur das Nuclein chemisch tingire. Das Nuclein höherer Zellen färbt sich mit Methylgrün, während die einzelligen Organismen, z. B. der Malariaparasit, meist ungefärbt bleiben oder den Farbstoff nur ganz schwach aufnehmen. Ein Gemisch von Methylgrün und Pyronin färbt die Kerne höher stehender Zellen heller oder dunkler röthlichblau, während z. B. bei dem Malariaplasmodium die Stelle des Chromatinkorns ungefärbt bleibt und sich nur die Leibessubstauz roth (Pyroninfärbung) färbt. Das Chromatinkorn besitzt eben nur zu dem Roth aus Methylenblau oder Toluidinblau specifische Affinität. Dasselbe verschiedene Verhalten gegen Methylgrün erkennt man auch bei der Färbung der Kern- substanz höherer Zellen und der der einzelligen Bacterien. W. Hoffmann (Berlin). Mosse , M. , Ueber das färberische Verhalten der thie- rischen Zelle gegenüber Farbgemischen (Ber- liner klin. Wochenschr. 1902, No. 49). Je nachdem man mit dem das Methylgrün als Base enthaltenden Triacid von Ehrlich oder seinen Modificationen färbt , oder nach Methoden, bei denen Methylgrün als Base nicht zur Verwendung kommt , ergiebt sich ein durchgreifender Unterschied für die Baso- philie der Zelltheile. In Bezug auf neutrophile Elemente im Sinne Ehrlioh's stimmen aber auch die anderen im Original genannten Methoden nicht überein. Das Methylgrün im Triacid zeigt nur Baso- philie höheren Grades an, die anderen basischen Farbstoffe, das Methylenblau, das polychrome Methylenblau, das Safranin auch Baso- philie geringeren Grades. Es ist deshalb nicht richtig, bei der Färbung mit dem EHRLicn'schen Triacid oder seinen Modificationen Zelltheile schlechthin als nicht basophil zu bezeichnen, die das Methyl- grün nicht annehmen. In den Kernen der thierischen Zellen zeigt sich (entgegen der allgemeinen Annahme) das Kernkörperchen als basophil geringeren Grades, das Nuclein als basophil höheren Grades. Kernsaft und Protoplasma sind oxyphil. Eine besondere Stellung- unter allen Körperzellen nimmt die Nervenzelle einerseits, die Eizelle anderseits ein ; bei beiden ist das Kernkörperchen basophil geringeren Grades, das Chromatin aber nicht basophil (das der Nervenzelle nach XX, 1. Referate. 37 der Eosin -Methyleublaufärbung neiitrophil). Das Protoplasma der Nervenzelle ist zum Theil basophil (NissL'sche Schollen), zum Theil oxyphil (Zwischensubstanz). Die Dotterelemente haben keinen ein- heitlichen Charakter, sie verändern sich mit der Zunahme der Reife. Schiefferdecker {Bonn). Klemensiewicz, R., Weitere Beiträge zur Kenntuiss des Baues und der Function der Wanderzellen, Phagocyten und Eiterzellen. Mikroskopische und experimentelle Untersuchungen an Ba- t r a c h i e r n (Beitr. z. Pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. Bd. XXXII, 1902, p. 351—434 m. 3 Tfln.). Bei der Verwendung von Glaskammern und Schwammstücken zeigen die eingewanderten Zellen sich zunächst wenigstens normal. Bei Verwendung von Hollundermark erscheinen die zelligen Elemente nur an der Peripherie des Fremdkörpers , wo sie in die offenen Parenchymhöhlen eindringen, normal, dagegen dort, wo die Parenchym- hohlräume von allseitig geschlossenen Wänden begrenzt sind, schon in den ersten Versuchsperioden deutlich gequollen. Gerade deshalb erwiesen sich dem Verf. die Versuche mit Hollundermark am brauch- barsten, doch hat er auch solche mit Stückchen von entkieseltem Badeschwämme angestellt. Die Würfel des Hollundermarkes von 3 bis 4 mm Kantenlänge wurden zur Entfernung der Luft in Wasser ausgekocht, dann in Kochsalzlösungen von verschiedener Coucentra- tion oder auch in destillirtes Wasser übertragen und im Dampftopfe sterilisirt. Sollten infectiöse Substanzen mit dem Hollundermarke in den Thierkörper gebracht werden , so wurden grössere Würfel , die mit Gelatine durchtränkt waren, mit der infectiösen Substanz beimpft und nach dem Auswachsen derselben verwendet, oder aber die mit Nälirsubstrat durchtränkten Würfel wurden in eine Bouilloncultur gebracht und nach mehrtägigem Verweilen im Brutschranke zu den Versuchen benutzt. Die Fremdkörper wurden aseptisch in die Bauch- höhle der Versuchsthiere gebracht. Blutungen können bei einiger Uebung bei Salamandra maculata und S. atra leicht vermieden wer- den, bei Proteus anguineus ist die Operation etwas schwieriger. Nach 3 bis 4 Tagen sind bei Fröschen , Salamandern und bei Proteus schon beträchtliche Mengen von Leukocyten in die HoUundermark- stückchen eingewandert ; es wurden diese dann aus der Bauchhöhle der Thiere entfernt und in HERMANN'scher Flüssigkeit fixirt (Verf. ver- wendete meist: Platiuchlorid, einprocentige Lösung, 2 Voll., Osmium- 38 Referate. XX, 1. säure, 2procentig-e Lösimg, 2 Voll., Eisessig 1 Vol.). Zur Fixirung genügen wenige Stunden (3 bis 10). Dann 24stündiges Auswaschen in fliesseudem Wasser, steigender Alkohol von 60 Procent an, Celloidin oder Photoxylin. — F ä r b u n g. Recht gute Resultate ergab eine Eiseulackfärbung, die theils nach der von M. Heidenhain angegebenen Methode mit schwefelsaurem Eisenammonoxyd, theils auch, und zwar mit sehr gutem Erfolge, mit dem von Benda und Rawitz empfohlenen Liquor ferri sulfurici oxydati ausgeführt wurde. Die Schnitte kommen auf etwa 3 Stunden in die p]isenlösung, werden dann gut mit destil- lirtem Wasser abgespült und in eine einprocentige wässerige Lösung von Hämatoxylin übertragen (24 Stunden), dann halbstündiges Aus- wässern in Brunnenwasser. Die Differenzirung wird in derselben Eisenlösung vorgenommen, welche als Beize diente. Die Litensität der Entfärbung in der Eisenlösung muss bei verschiedeneu Schnitten entsprechend abgestuft werden , da es unmöglich ist , alle Elemente des Zellleibes in gleicher Weise, an einem einzigen Schnitte, deutlich gefärbt zu erhalten. Eine sehr zweckmässige Combiuation ist die Verbindung der Eisenlackfärbung mit der Färbung nach van Gieson ; die mit Eisen gebeizten und mit Hämatoxylin gefärbten Schnitte kamen nach dem Waschen in Wasser in eine Farbflotte von 10 cc concentrirter, wässeriger Pikrinsäurelösung und 1 cc wässeriger Lösung von Säurefuchsin (5 bis 10 Minuten). Ebensogut wie das eben ge- nannte Gemisch erwies sich zur Differenzirung eine wässerige Lösung von Methyleosin. Die Präparate sind nach gutem Auswaschen voll- kommen haltbar. Da es sich hauptsächlich um die Färbung der Substanz des Zellleibes handelte, so hat Verf. noch eine Reihe anderer hierfür empfohlener Methoden versucht. Als gute Dienste leistend empfiehlt er besonders die von Rawitz ersonneue Alizarinfärbuug. Sie ergab die vollständigste Färbung der Zell- und Kernsubstanzen. Da sie keine Differenzirungsfärbung ist , so muss die für die ver- schiedenen Objecte und Fixiruiigsflüssigkeiten passende Concentration und Einwirkungsdauer der Beize gefunden werden. Ist das einmal durch Vorversuche gelungen, so erhält man voi-tretflich gefärbte Präparate. Verf. benutzte meistens nach der Angabe von Rawitz eine Stammflüssigkeit, welche auf 140 Th. Wasser 70 Th. der Chrombeize GAJ der Höchster Farbwerke enthielt. In den Präparaten erscheint die Kernsubstanz in einem anderen Farbentone wie die verschiedenen Zellbestandtheile. In den durch Hermann's Flüssigkeit fixirteu Hollundermarkstückchen waren das Chromatin der Kerne meist violett bis violettbraun, die Fasersysteme orangeroth, die Gra- XX, 1, Referate. 39 nula und die Ceutrosomen röthlicli bis tief orangeroth. Es ist nach Verf. sehr bemerkenswerth, dass die Alizarinpräparate sehr gut zur Ergänzung der Eisenlackpräparate verwendet werden können. Will man nämlich einzelne Bestandtheile der Zellsubstanz untersuchen, welche ihrer Zartheit wegen leicht durch starke Färbungen verdeckt werden, so ist eine stärkere Differenzirung bei der Eisenlackfärbung anzuwenden. Auch bei der massigsten Differenzirung zeigt die Eisen- lackfärbung weniger Bestandtheile der Zelle deutlich gefärbt als die Alizarinfärbung. Erstere ist eine vortreffliche Färbungsmethode für Fasersysteme und Centrosomen, letztere für die Granula des Zell- körpers. Für die äusserste Schicht des Zellleibes (Grenzschicht) eignen sich beide Färbungen in gleicher Weise. Ausser diesen Färbungen hat Verf. auch noch andere Verfahren , wie z. B. die Safraniufärbung oder das Orangeverfahren nach Flemming oder die Triacidfärbung nach Ehrlich angewendet. Wenn diese Färbungen auch brauchbare Resultate lieferten, so ist er doch immer wieder zu den beiden Lackfärbungen zurückgekehrt, weil diese mit Sicherheit die Intensität der Färbung dem vorliegenden Zwecke anpassen Hessen und äusserst haltbar waren. Schiefferdecker {Bonn). Joseph , H. , Beiträge zur Flimmer zellen- und Centro- somenfrage (Arb. a. d. Zool. Inst. d. Univ. Wien Tom. XIV, 1902, p. 1—80 m. 3 Figg. u. 3 Tfln.). Zum Zweck der vorliegenden Untersuchungen wurden die Epi- thelien von zahlreichen Thieren untersucht (Lumbricus, Enchytraeus, Sigalion, Amphioxus, Ammocoetes, Salamandra, Lacerta, Cavia). Die Fixirung erfolgte mit Sublimat-Kochsalzlösung, Flemming's, Pekönyi's, Erik Müller's und Orth's Gemisch. Verf. schätzt die Gemische von Kaliumbichromat und Formaldehyd ganz besonders und hält die damit zu erzielenden Resultate denen mit Sublimatfixirung in vielen Fällen für bedeutend überlegen. Die Anwendung der HEioENHAiN'schen Eisenhämatoxylin-Methode ergiebt z. B. nach Fixirung in ORTH'scher Mischung Centrosomen und die allerfeinsten Structuren, die nach Sublimatfixirung oft fehlen. Die Einwirkung der ORTn'schen Mischung dauerte in der Regel 24 Stunden, dann folgte gründliches Waschen in Wasser und Nachbehandlung mit Alkohol steigender Concen ^^^^^<^"- E. Schoebel (Neapel). 40 Referate. XX, 1. Fischer, B. , lieber Chemismus und Technik der Wei- GERT'schen Elastinfärbung (Virchow's Arch. Bd, CLXX, H. 2, 1902, p. 285—305). Verf. geht zuerst genauer auf den Chemismus der Weigert- schen Färbung ein, weswegen auf das Original verwiesen wird. Er zeigt, dass man aus Fuchsin und Eisenchlorid den Farbstoff" (Ferri- fucbsin) darstellen kann, der der WEiGERT'schen Färbung im wesent- lichen zu Grunde liegt, man darf ihn daher nicht als Kresofuchsin oder Resorcinfuchsin bezeichnen. Man kann nicht nur mit Fuchsin sondern auch mit anderen Farbstoffen für die WEiGERT'sche Methode geeignete Farben herstellen. Um diesen einen besonderen Namen zu geben, hängt Verf., wenn die Farbstoffe nach der WEiGERT'schen Vorschrift mit Eisenchlorid und Resorcin dargestellt sind, die Silbe el an, also z. B. Safranelin, Gentianaviolettelin, Fuchselin etc. Wurde dagegen bei der Darstellung das Resorcin weggelassen, so bezeichnet Verf. den Farbstoff" einfach als Ferrifuchsin, Ferrivesuvin etc. Wegen der näheren Eigenschaften dieser Körper muss wieder auf das Original verwiesen werden; sie verhielten sich verschieden. Als bestes und zuverlässigstes Differenzirungsmittel erwies sich der reine Alkohol. Verf. hat demgemäss die verschiedenen Elastinfarbstoff"e nach ihrer Alkoholfestigkeit in zwei Gruppen geschieden , in die alkoholechten und die alkoholunechten Elastinfarbstoff"e. Mit den von Pranter mitgetheilten Resultaten kann sich Verf. nicht immer einverstanden erklären. — Verf. giebt dann eine Anzahl von speciellen Vorschriften, indem er nur die werthvollsten hervorhebt. Das Fuchselin (der WEiGERT'sche Farbstoff") ist allen anderen Elastinfarbstoff'en vorzu- ziehen; es färbt sich nur der Knorpel mit; alle anderen Angaben be- ruhen auf mangelhafter Alkoholdiff"erenzirung. Die koUagenen Binde- gewebsfasern nehmen einen blassgrauen (bei Carmingegenfärbung rothen) Farbenton an , während die ' elastischen Fasern bis in ihre kleinsten Fäserchen und Körnchen blauschwarz gefärbt sind. Mucin kann, wenn es mitgefärbt ist, durch absoluten Alkohol wieder ent- färbt werden. Will man den WEiGERT'schen Farbstoff" nicht selbst darstellen, was allerdings das beste ist, so kann man ihn von Grübler in Leipzig fertig beziehen oder an Stelle desselben eine Lösung von Resorcinfuchsin (Grijbler) 1"0, Alkohol, 94procentig, lOO'O, Salz- säure 2"0 anwenden (vor der Färbung filtriren). Indessen färben sich hierbei die Bindegewebsfasern ziemlich stark mit. Als Gegen- färbung empfiehlt sich Lithioncarmiu. L Methode : Die aufgeklebten Paraffinschnitte kommen der Reihe nach in Xylol, Alkohol, Fuchselin XX, 1. Referate. 41 (die WEiGERT'sche Farblösung) 25 bis 30 Minuten, abspülen in Wasser, absoluter Alkohol 10 Minuten, abspülen in Wasser, Litliioncarmin 12 bis 15 Minuten, einprocentiger Salzsäurealkohol 15 Minuten, ab- spülen in Alkohol, absoluter Alkohol 2 bis 18 Stunden (auch die Alkoholfestigkeit der Fuchselinfärbung ist anscheinend keine unbe- grenzte), Xylol, Balsam. — IL Methode: Xylol, Alkohol, Wasser, Lithioncarmin 20 Minuten, abspülen in Alkohol, Fuchselin 25 Minuten, abspülen in Alkohol, absoluter Alkohol 2 bis 18 Stunden, Xylol, Balsam. Die elastischen Fasern der Knorpel werden hierbei blau- schwarz gefärbt, die Kerne leuchtend roth, das Grundgewebe farblos oder rosa. Das Safranelin färbt die elastischen Fasern schön roth mit schwach gelblichem Anflug. Färbung nicht ganz so speci- fisch wie die vorige, daher gute Alkoholdifferenzirung nöthig. Die Lösung darf nicht älter sein als 6 Wochen; es ist dieses hier noch weit schädlicher als beim Fuchselin. Beachtet man alles genau, so erhält man mit Hämatoxylingegenfärbung sehr schöne Bilder, die vor der Fuchselinfärbung den Vortheil haben, dass die Färbung zarter ist und sich deshalb für dickere Schnitte besser eignet. Methode : Xylol, Alkohol, Wasser, Hämatoxylin - Alaun (Böhmer) 20 Minuten, überfärben (hier wie bei den folgenden Angaben ist die Färbekraft der angewendeten Hämatoxylinlösung genau zu berücksichtigen), ab- spülen in Wasser, Safranelin 12 Minuten, abspülen in Alkohol, dann in Wasser, verdünnte Lösung von Lithiumcarbonat 3 bis 5 Minuten (1 Th. conceutrirter Lösung auf 10 Th. Wasser), fliessendes Wasser 5 Minuten , absoluter Alkohol 1 % bis 3 Stunden , Xylol , Balsam. Elastische Fasern gelbroth. Kerne blau, Grundgewebe farblos oder mattrosa, Protoplasma der Zellen überall deutlich zu erkennen (grauer oder schwach röthlicher Hauch). Falls es sich nur darum handelt, elastische Fasern und Kerne deutlich gefärbt zu erhalten, möchte Verf. andere Methoden als die genamiten nicht empfehlen. — Will man zugleich das Bindegewebe färben , so verbindet man mit der Fuchselinfärbimg eine modificirte van Gieson - Färbung in der folgenden Weise: 1) Xylol, Alkohol, Wasser, Hämatoxylin - Alaun (Böhmer) 30 Minuten , überfärben , abspülen in Wasser , Fuchselin 25 Minuten, abspülen in Wasser, verdünnte Lithiumcarbonatlösung (1 Th. concentrirte Lösung auf 10 Th. Wasser) 3 Minuten, fliessen- des Wasser 3 Minuten, absoluter Alkohol 2 bis 18 Stunden, verstärkte GiEsoN-Lösung eine Minute (auf 50 cc Gieson- Lösung 1 cc concen- trirte, wässerige Säurefuchsinlösung) , abspülen in Wasser , dann in Alkohol (beides schnell), Xylol, Balsam. 2) Xylol, Alkohol, Fuchselin 42 Referate. XX, 1. 25 Minuten, abspülen in Wasser, dann in Alkohol, absoluter Alkohol 2 bis 18 Stunden, Häraatoxylin-Alaun 5 Minuten, abspülen in Wasser, verstärkte GiESON-Lösung eine Minute, abspülen in Wasser, in Alkohol (beides schnell) , Xylol , Balsam. Die erste Methode ist besser und sicherer. Elastische Fasern blauschwarz, Bindegewebe leuchtend roth. Kerne braun, besonders geeignet für Gefässe und Lungen. — Schöne Resultate erhält man auch, wenn mau die Safranelinfärbung mit der WEiGERT'schen Fibrinfärbung verbindet (Fuchselin lässt sich hierbei wegen des Farbeutones nicht verwenden) : Xylol, Alkohol, Safranelin oO Minuten (mau kann auch Vesuvelin oder Ferrivesuviu eine halbe bis eine Stunde lang einwirken lassen), absoluter Alkohol eine bis 2 Stunden, abspülen in Wasser, Anilinwasser-Gentianaviolett 8 Minuten, abspülen in Wasser, abtrocknen mit Fliesspapier, Jodjod- kaliumlösung (1:3: 300) 3 Minuten, abtrocknen mit Fliesspapier, differenziren in Anilin -Xylol 2:1, auswaschen in Xylol, Balsam. Elastische Fasern roth, Fibrin blau. Kerne violett. Verwendet man Vesuvelin , so werden die elastischen Fasern braun gefärbt. — Man kann die Elastinfärbungen natürlich auch mit Bacterien- färbungen verbinden. Dass man sie gleichzeitig mit der Gram- schen Färbung, sowie der WEiGERT'schen Modification derselben verbinden kann, geht schon aus der eben mitgetheilten Methode her- vor. — Eine Methode, mit den elastischen Fasern zugleich die Tuberkelbacilleu zu färben, ist bereits von Wechsberg ange- geben worden, ist aber verbesserungsfahig. Verf. giebt hierfür bei Verzicht auf die Kernfärbung die folgende Methode an. Xylol, Alkohol, Wasser, Carbolfuchsin 24 Stunden, abspülen in 70pro- centigem Alkohol, Fuchselin 25 Minuten, abspülen in Wasser^, dann in Alkohol, absoluter Alkohol 2 Stunden, Xylol, Balsam. Will man gleichzeitig die Kerne gefärbt erhalten , so muss man einen an- deren Weg einschlagen. Verf. färbt dann die elastischen Fasern mit Vesuvelin , die Kerne mit Hämatoxylin ; die Schnitte kommen also entweder in Xylol, Alkohol, Wasser, Carbolfuchsin 24 Stunden, abspülen in TOprocentigem Alkohol, Vesuvelin (oder Ferrivesuviu) eine Stunde, abspülen in Wasser, absoluter Alkohol eine Stunde, abspülen in Wasser , Hämatoxylin - Alaun 3 bis 5 Minuten , abspülen in Wasser, Alkohol, Xylol, Balsam. Oder Xylol, Alkohol, Wasser, Hämatoxylin - Alaun 30 Minuten , überfärben , auswaschen in Wasser 30 Minuten, Carbol-Fuchsin 24 Stunden, abspülen in TOprocentigem Alkohol , Vesuvelin (oder Ferrivesuviu) eine Stunde , abspülen in Wasser, verdünnte Lösung von Lithiumcarbonat (1 Th. concentrirte XX, 1. Referate. 43 Lösung auf 10 Th. Wasser) 5 Minuten, fliessendes Wasser 5 Minuten, absoluter Alkohol eine Stunde, Xylol, Balsam. Besonders die letzte Methode giebt vorzügliche Bilder. Kerne blau, elastische Fasern braun, Bacillen roth. Schiefferdecker [Bonn). Liepiuanii, W., ' U e b e r die BsNDA'sche Reaction auf Fett- Nekrosen (Virchow's Arch. Bd. CLXIX, H. 3, 1902, p. 532—535). Benda veröffentlichte in Virchow's Archiv Bd. CLXI eine Me- thode, mittels derer es in überraschender Weise gelingt, makroskopisch und mikroskopisch (an Gefrierschnitten) Fettnekrose nachzuweisen.-^ Er bediente sich zuerst der WEiGERx'schen Gliabeize , fand aber bald, dass das wirksame Agens der Beize allein die Kupferacetat- lösung war. R. Hahn hob 1901 im ärztlichen Verein zu Hamburg (12. Februar 1901) hervor, dass die wesentlichen Vorzüge der BENDA'schen Reaction auf Fettnekrosen gegenüber der Färbung mit Osmium , Sudan und Scharlach darin bestehen , dass es erstens ge- lingt, die normalen von den nekrotischen Fettzellen zu unterscheiden und zweitens, dass diese Methode schon gut makroskopisch erkenn- bare Resultate ergiebt. Endlich ist noch die Schnelligkeit hervor- zuheben, mit der die Methode arbeitet. Verf. hat nun in letzter Zeit fast alle Bauchspeicheldrüsen nach dieser Methode untersucht und dabei sehr häufig auch in solchen Fällen , wo makroskopisch keine Fettnekrosen nachweisbar waren, mittels der BENDA'schen Methoden solche nachweisen können. Er stellte sich dabei die Frage, ob nicht in vielen Fällen Leichenveränderungen im Fettgewebe die Ursache der Reaction gewesen seien. Die BENOA'sche Methode wurde in folgender Weise angewendet. Nachdem die zu untersuchenden Stücke der Bauchspeicheldrüse 24 Stunden in lOprocentigem Formalin gehärtet waren, wurden Querschnitte von etwa 0*5 cm Dicke durch das ganze Pankreas nebst dem umgebenden Fettgewebe gelegt. Diese wurden auf weitere 24 Stunden in die WEiGERT'sche Gliabeize ge- bracht und bei Zimmertemperatur stehen gelassen. Ein 24stündiger Aufenthalt im Brütofen (Benda) erwies sich als überflüssig. Die normalen Parthien zeigen nun selbst bei wochenlangem Verweilen in der Beize nur eine graungrüne Farbe, während die Stellen, wo sich Fettnekrosen finden , wie mit Grünspan oder besser noch wie mit Patina überzogen aussehen. Verf. kam zu den folgenden Schlüssen. 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVII, 1900, p. 459. 44 Referate, XX, 1. 1) Nach dem Tode tritt eine Umwandhing des Fettes in Fettsäuren, insbesondere in Oelsäure, wie sie bei der typisclien Fettgewebsnekrose statt hat, nicht ein. 2) Ergiebt die Benda^scIic Methode der Kupfe- rung der Fettgewebsnekroseu eine positive Reaction, so ist damit erwiesen , dass es sich nicht um Leichenerscheinungen handelt , son- dern um Fettnekrosen , die während des Lebens aufgetreten sind. Um sich über die Schnelligkeit , mit der die Wirkung eintritt , zu Orientiren, legte Verf. ein Präparat, das wie oben gehärtet war, in der Gliabeize in einen Brutschrank von 37®. Schon nach dreiviertel, besser allerdings nach einer Stunde, zeigte sich die charakteristische Färbung. Schiefferdecker {Bonn). Neubauer , U e b e r das Wesen der s m i u m s c h w ä r z u n g (72. Vers, deutscher Naturf. u. Aerzte i. Karlsbad, 21. — 26. Sept., 1902; vgl. Neurol. Centralbl. Bd. XXI, 1902, No. 20, p. 981). Verf. hat gefunden, dass das Gemeinsame der chemischen Ver- bindungen, die mit Osmiumsäure Schwarzfärbung ergeben, das Vor- handensein einer doppelten Bindung der C- oder CH-Atome ist: Von verschiedenen chemisch ganz ähnlich zusammengesetzten Stoffen zeigt nur der die Osmiumschwärzung, in dessen Formel eine doppelte Bindung des C-Atoms vorkommt. Geht in einem Körper durch Um- lagerung der Atome die vorher vorhandene doppelte Bindung in die einfache über, so geht die Eigenschaft der Schwärzung durch Osmium- säure verloren und umgekehrt. Das Osmium ist also kein Reagens auf Fett, sondern nur auf doppelte Bindung. Wenn bei Markscheiden- zerfall Schwärzung auftritt , so ist damit kein Fett nachgewiesen, sondern es ist dieselbe sehr gut vielleicht so zu erklären , dass aus dem Lecithin, das den Kohlenstoff in einfacher Bindung enthält, Neurin entstanden ist, das zwei doppelte Bindungen aufweist. Schiefferdecker (Botin). Reich , F. , lieber eine neue Methode der Herstellung feinster histologischer Präparate, insbeson- dere aus dem Gebiete des Nerveusystemes, mittels Schüttel- beziehungsweise Schnitt- centrifugirung (Neurol. Centralbl. Bd. XXI, 1902, No. 14, p. 647—649). Die bis jetzt zur Untersuchung histologischer Präparate übliche Methode besteht im wesentlichen in der Herstellung von Schnitten XX, 1. Referate. 45 oder von Zupfpräparaten. Feine zusammenhängende Schnitte von 5 bis 10 ju sind ohne Einbettung schwer zu gewinnen. Die Ein- bettung schädigt aber mehr oder weniger das Präparat. Das Ver- fahren des Verf., um die angegebenen Missstände zu vermeiden, ist entweder die Schüttelcentrifugirung oder die Schnitt- centrifugirung. Bei der ersten Art werden am besten mit Macerationsmittehi vorbehandelte , grob zerkleinerte Objecte durch gründliches Schütteln in einem Probirröhrchen zum Zerfall gebracht. Uebriggebliebene grössere Stücke werden durch Absieben entfernt. Die übriggebliebene Flüssigkeit wird centrifugirt. Bei dem Schnitt- verfahren wird das in Frage kommende Object nach vorhergegangener beliebiger Härtung in eine grosse Zahl feinster Schnitte zerlegt. Diese sammeln sich in Form eines Häufchens auf der Messerschneide an, werden mit Hülfe einer Nadel oder eines sonst geeigneten Instru- mentes in einem mit Wasser oder einem anderen gewählten Medium gefüllten Centrifugirglase suspendirt, dann centrifugirt. Nach Be- endigung des Centrifugirens giesst man die Flüssigkeit von dem Bodensatze ab und ersetzt sie durch irgend ein flüssiges Reagenz oder einen Farbstoff. Die Färb- und Differenzirungsflüssigkeiten werden zur Vermeidung von Verunreinigungen vorher auch centrifugirt. Nach Färbung und Differenzirung werden die Färbungs- oder Differenzi- rungsmedien , falls erforderlich , durch wiederholte Behandlung mit Wasser ausgewaschen. Sodann wird das Wasser durch Alkohol ent- fernt , dieser wird durch Xylol , dieses durch ein wenig Balsam er- setzt. Man braucht jetzt nur noch durch Schütteln die einzelnen feinsten Objecte im Balsam zu vertheilen und dann eine beliebige An- zahl von Objectträgern damit zu beschicken. Da das Centrifugiren sehr schnell geht, so kann man eine sehr grosse Zahl von Präparaten in sehr kurzer Zeit herstellen. Verf. hat die Methode bisher haupt- sächlich zur Bearbeitung des Nervensystemes verwendet. Schiefferdecker (Bonn). Orandis, Y. , et Mainini, C. , Sur une reaction coloree qui permet de reveler les sels de calcium deposes dans les tissus organiques (Arch. Ital. de Biol. t. XXXIV, 1900, p. 73— 78j. Zum Nachweis von Calciumsalzen in den Geweben finden Verff. hauptsächlich das Purpurin geeignet, welches mit Chlorcalcium einen in Wasser und Alkohol unlöslichen Niederschlag giebt. Die mit Alkohol fixirten Gewebsstücke oder die mit dem Gefriermikrotom 46 Referate. XX, 1. hergestellten Schnitte werden in einer gesättigten alkoholischen Lö- sung von Purpurin stark überfärbt. Für gewöhnlich genügen hierzu 5 bis 10 Minuten. Hierauf kommen die Objecte für kurze Zeit in eine etwa ^/^procentige Chlornatriumlösuug. Hierdurch bildet sich durch Umsetzen mit den in den Geweben meist als Phosphate oder Carbonate abgelagerten Calciumsalzen eine geringe Menge Chlor- calcium, welche genügt, das Purpurin niederzuschlagen. Wenn auch nicht immer die Behandlung mit Chlornatrium absolut nothwendig ist, vielleicht weil das Gewebe schon selbst die genügende Menge davon enthält, ist sie doch zu empfehlen, da die Färbung sicher da- durch an Schönheit gewinnt. Nach gehörigem Auswaschen in 70pro- centigen Alkohol werden die Objecte in gewöhnlicher Weise entwässert und weiter behandelt. E. Schoebel (Neapel). Marx , H. , Ein Beitrag zur K e n n t n i s s der C h i n i n w i r - kung (Wiener klin. Rundsch. 1902, No. 37; vgl. AUgem. med. Centralztg. Bd. LXXI, 1902, No. 93, p. 1107 — 1108). Verf. fand bei seinen Untersuchungen über die Wirkungen des Chinins die bisherige Angabe , dass es ein Protoplasmagift sei , be- stätigt. Die dem Chinin eigenthümliche Wirkung lässt sich zurück- führen auf seine Fähigkeit , thierisches Eiweiss zu coaguliren. So fand Verf. , dass , wenn man zu einem Tropfen Speichel unter dem Deckglase einen Tropfen einer 3- bis Öpromilligen Chininlösung zu- fliessen lässt, alle active Bewegung plötzlich aufhört. Bacterien und Leukocyten legen sich häufchenweise neben einander, werden agglu- tinirt. Die sogenannte Molecularbewegung der Speichelkörperchen hört auf, und man erkennt nun nach Verf. leicht, dass es lebende, von den Leukocyten aufgenommene Bacterien waren , welche die „Molecularbewegung" verursachten, deren Schauplatz das Protoplasma der Leukocyten ist. Nach Verf. werden die Bacterien durch das Chinin getödtet, und daher hört die Bewegung auf. Der Kern der Leukocyten und grossen Plattenepithelzellen zeigt sich gross, schollig, scharf umrandet. Schon eine einpromillige Chininlösung ruft die Ge- rinnung des Blutes hervor, die coagulirende Wirkung einer 5pro- milligen Chininlösung auf Milch steht derjenigen der reinen Salpeter- säure nur wenig nach. Schie ff erdecke r {Bonn). XX, 1. Referate. 47 2. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. A. Niedere Thiere. Stenipell, W., Ueber Thelohania Müller i [L. Pfr.] (Zool. Jahrb., Abth. f. Anat. u. Ontogeii. Bd. XVI, 1902, p. 235 —272 m. 1 TU.). Die in Gammarus piilex schmarotzenden Parasiten lassen sich in Localitäten, wo die Flohkrebse überhaupt inficirt sind, leicht ver- schaffen , da die mit Parasiten besetzten Thiere durch ihre trüb- weissliche Färbung von den gesunden Exemplaren leicht zu unter- scheiden sind. In grossen flachen Glasschalen, welche reichlich mit Wasserpflanzen beschickt an einem kühlen Orte aufgestellt sind, lassen sich die gefangenen Gammari lange Zeit am Leben erhalten, auch künstliche Infection gelingt. Die Untersuchungen wurden zu- nächst an frischem Material vorgenommen. Ein inficirter Gammarus wurde mit der Scheere ungefähr in der Körpermitte quer durch- schnitten, die an den Schnittflächen austretende Flüssigkeit , welche meist massenhafte Parasiten enthielt, wurde auf einen Objectträger gebracht , mit einem Deckglas bedeckt und bei sehr starker Ver- grösserung untersucht. Sehr störend bei der Beobachtung des frischen Materials ist die lebhafte Molecularbewegung der kleineu Objeete in der umgebenden Flüssigkeit. Verschiedene Versuche, die gemacht wurden, um diese Schwierigkeit zu überwinden, sind ge- scheitert. So haben z. B. Versuche mit Plattenculturen, welche mit- telst KocH'scher Nährgelatine nach dem in der Bacteriologie üblichen Verfahren hergestellt wurden, zu keinem Resultate geführt, weil die Parasiten selbst in stark verdünnter Gelatine immer bald zu Grunde gingen. Wurde die Parasitenmasse in ganz dünner Schicht auf ein Deckglas aufgetragen, dieses dann mit der Parasitenschicht nach unten auf einen Objectträger mit Hohlschliff" gelegt und an den Rändern mit Vaseline verschlossen, so fiel zwar die Molecular- bewegung fast ganz fort, aber eine längere Zeit fortgesetzte Be- obachtung einzelner Parasiten war auch bei dieser Methode unmög- lich, denn einmal starben nämlich gerade die Meronten und jungen Sporonten, auf deren Weiterentwicklung es vornehmlich ankam, sehr 48 Referate. XX, 1. bald ab, und ferner änderten die Parasiten in der zwischen zwei Beobachtungen gelegenen Zeit ihre Lage doch so beträchtlich, dass es meist nicht möglich war , dieselben Parasiteniudividuen wieder aufzufinden. Es blieb also weiter nichts übrig , als aus reichlichem Material die verschiedenen Stadien zu sammeln und sich so den ganzen Entwicklungsvorgang zu combiniren. Für gewisse Zwecke, z. B. um die in einem Sporenballen vereinigten reifen Sporen zählen und isolirt betrachten zu können , ist es vortheilhaft , einen starken Druck auf das Deckglas auszuüben. Um bestimmte, an den frischen Sporen nicht sichtbare Einzelheiten zu studiren , wurden dieselben ferner mit verschiedenen Reageutien behandelt, mit Osmiumsäure, Essigsäure, Salpetersäure, Aether, Bromwasser und Jodtinctur. Spe- ciell letztere ist ein vortreffliches Mittel , um die Polfäden zur An- sicht zu bringen. Zur Erforschung der an frischem Material nicht festzustellenden Kernverhältnisse sind gefärbte Dauerpräparate un- umgänglich. Am besten werden solche auf ähnliche Weise erhalten, wie ScHAUDiNN für Coccidien angiebt. Es wurde die Körperflüssig- keit mit den Parasiten resp. der Darminhalt der künstlich inficirten Thiere in dünner Schicht auf ein Deckglas gestrichen, und dann dasselbe mit der Parasitenschicht nach unten in ein Gefäss mit einer Mischung von zwei Theilen concentrirter wässeriger Sublimat- lösung, einem Theil absoluten Alkohol und einer Spur Eisessig ge- worfen. Die aufgestrichene Schicht gerinnt sofort und kann dann etwa wie ein aufgeklebter Schnitt weiter behandelt werden. Nach Entfernung des Sublimates durch Jodalkohol wurden die Deckglas- Ausstrichpräparate meistens in verdünntem DELAFiELo'schem Hämat- oxylin (etwa 1 cc P\nrbe -\- 200 cc destillirtes Wasser) gefärbt und zwar mindestens 3 bis 4 Tage lang. Ueberfärbung ist kaum zu fürchten. Nur bei den reifen Sporen ist es zuweilen vortheilhaft, die Farbe mit Salzsäure-Alkohol etwas auszuziehen. Für Special- zwecke wurde die RoMANOwsKv'sche Kernfärbung der Malariapara- siten in folgender Modification angewandt. Die mit Jodalkohol gut ausgezogenen Deckglas- Ausstrichpräparate kamen zunächst in Wasser und dann auf eine halbe Stunde in die frisch hergestellte, unfiltrirte Mischung von 1 Th. einer einprocentigen wässerigen Lösung des Methylenblau medicinale purissimum (Grübler) und 7 Th. einer ein- procentigen wässerigen Lösung von F.osin (Höchst). Dann wurden die Präparate in Wasser abgespült, schnell in 90procentigeu und absoluten Alkohol entwässert, in Xylol aufgehellt und in Canada- balsam eingeschlossen. Wenn man die Präparate nicht zu lange im XX, 1. Referate. 49 Alkohol liegen lässt, erhält man eine besonders schöne Kernfärbimg der reifen Sporen. Neben der Ausstrichmetliode wurde noch die Schnittmethode angewandt, um die Yertheilung der Parasiten in den Oeweben des Wirthes festzustellen. Zu diesem Zweck wurden die inficirten Gammari in kochendem Sublimat- Alkohol fixirt, mit Jod- alkohol behandelt, in Paraflin eingebettet und in dünne (etwa 2 bis 4 fx) Schnitte zerlegt. Auch hier ergab lange Färbung in verdünntem Hämatoxylin die beste Kernfärbung der einzelnen Parasiten. Als gutes Mittel, um die Parasiten durch Contrastfärbung gegen das um- liegende Muskelgewebe des Wirthes hervortreten zu lassen, erwies sich die oben angegebene Modification der RoMANOwsKv'schen Fär- bung. Wenn man beim Entwässern und dem damit verbundenen Ausziehen der Farbe durch Alkohol die richtige Zeitdauer abpasst, so gelingt es sogar, eine verschiedene Färbung der jungen Entwicklungs- stadien der Parasiten und der reifen Sporen zu erhalten. In solchen gelungenen Präparaten erscheinen die Kerne der Zellen des Wirths blau , das Protoplasma der Wirthszellen , besonders die Musculatur rosa, die reifen Sporen der Parasiten violett und die überall zwischen diese eingesprengten jugendlichen Sporonten und Meronten hellblau, resp. bei längerem Ausziehen mattrosa. Eine ähnliche , allerdings nicht so schöne Differenzirungsfärbung erhält man übrigens auch bei Anwendung der Eisenhämatoxylin- Methode nach Heidenhain - Benda, wenn man lange in der Eisenammoniumsulfat-Lösung difterenzirt. E. Schoebel [Neapel). Poclie , F. , Ueber zwei neue in Siphonophoren vor- kommende Flagellaten nebst Bemerkungen über die Nomenclatur einiger verwandter For- " men (Arb. a. d. Zool. Inst. d. Univ. Wien Tom. XIV, 1903, p. 307—358 m. 1 Tfl.). Die zu der Gattung Trypanosoma gehörenden, in Frage kommen- den Parasiten der Siphonophonen versuchte Verf. zunächst in den Wirthsthieren — speciell in Cucubalus — zu fixiren, aber ohne jeden Erfolg. Er verfuhr dann später so , dass er durch Druck auf das Deckglas, unter dem sich die Siphonophoren befanden, letztere mög- lichst zerquetschte, so dass wenigstens die Hauptmenge der Trypano- somen , zumal die in den grösseren Hohlräumen , in das auf dem Objectträger befindliche Seewasser gelangten. Der Druck muss im allgemeinen so stark sein, dass die Ernährungspolypen, Taster und Saftbehälter nicht nur breit gedrückt werden, sondern dass ihre Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 1. 4 50 Referate. XX, 1. Wände platzen und ihr Inhalt austritt. Vor dem Zerquetschen ist es vortheilhaft, das Wasser so weit als möglich zu entfernen. Die Fixirungsflüssigkeiten müssen dann rasch zugesetzt werden , um die bald auftretenden Absterbungserscheinungen an den Flagellaten nach Möglichkeit zu vermeiden. Schwache Chromosmiumessigsäure lieferte sowohl mit nachfolgender Färbung mit Alauncochenille als auch ohne solche recht gute Resultate. Gut bewährte sich ferner concentrirte Sublimatlösung in Seewasser mit nachfolgender Färbung in Dela- FiELü'schem Hämatoxylin , und ferner PßRENYi'sche Flüssigkeit und Triacidfärbung. Bei weitem die besten Resultate wurden aber mit der von Ziemann verbesserten RoMANOwsKY'schen Methode, die sowohl unverändert nach den Angaben von Zettnow^ als auch mit einigen Modificationen angewandt wurde. Diese Modificationen bestanden darin , dass Verf. das eine Mal die Trypanosomen durch Osmium- säuredämpfe fixirte , dann den Objectträger stehen Hess , bis die Flüssigkeit fast ganz verdunstet war, dann mit Wasser auswusch und dann erst das Präparat nach der angegebenen Methode weiter- behandelte, also mit Methylenblau-Eosin färbte etc. Das andere Mal benutzte er zur Fixirung PERENYi'sche Flüssigkeit , Hess dann die Objecte auf den Objectträger antrocknen , und zwar mit Nachhülfe durch gelindes Erwärmen über der Flamme , führte dann das Prä- parat, mit TOprocentigem Alkohol beginnend, allmählich in Wasser über und verfuhr dann in gewöhnlicher Weise weiter. Das Resultat war in allen Fällen ein gleich günstiges. E. Schoebel (Neapel). Aders , W. M. , Beiträge zur Kenntniss der Spermato- genese beiden Coelenteraten (Zeitschr. f. wiss, Zool. Bd. LXXIV, 1903, p. 64—108 m. 8 Figg. u. 2 Tfln.). Nach verschiedenen Fixirungsversuchen mit Sublimat, Sublimat- alkohol und anderen Reagentieu erwies sich schliesslich die PIerr- MANN'sche Platinchloridosmiumessigsäure als das beste. Es findet hierbei keine Schrumpfung statt, und die Zellgrenzen erscheinen mit grosser Deutlichkeit. Zur Färbung wurde die Hämatoxylin - Eisen- Methode von M. Heidenhain als weit brauchbarer als andere Tinc- tionen befunden. [Verf. spricht hierbei von unterscbwefligsaurem Eisenoxydammon als Beize , meint aber wohl den von Heidenhain empfohlenen Eisenalaun = schwefelsaures Eisenoxydammoniak. Ref.] Die Einschmelzung in Paraffin geschah mit Chloroform als Vormedium. ^) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVI, 1899, p. 254. XX, 1. Referate. 51 Ein langes Verweilen der Objecte im geschmolzenen Paraffin — es geniigen 30 Minuten — ist zu vermeiden. E. ScJioebel {Neapel). Wacke, K., Beiträge zur Kenntniss derTemnocephalen (Fauna Chilensis Bd. III, 1903, p. 1—116 m. 14 Figg. u. 9 Tfln.). Das Material war theils in Alkohol nach vorhergegangener Cocainbehandlung , theils in Chrom -Osmium -Essigsäure fixirt. Die Thiere wurden meist in toto mit DELAFiELo'schem Hämatoxylin, Alaun- carmin , Boraxcarmin , Pikrocarmin oder mit einfacher Pikrinsäure- lösung durchgefärbt und dann in gewöhnlicher Weise weiter behandelt. Beim Mikrotomiren war oft, um das unangenehme Zerreissen der Schnitte zu verhindern, das Ueberpinseln der Schnittfläche des Paraffin- blockes mit Mastixcollodium geboten. Die mit Eiweiss und Wasser aufgeklebten Schnitte wurden meist einer dreifachen Nachfärbung unterworfen, mit Hämatoxylin, Eosin und Orange G, wobei zu er- wähnen ist, dass Orange G am besten zuletzt angewendet wird. Als Einschlussmedium diente Canadabalsam oder Carbol-Glycerin. Die daneben hergestellten Totalpräparate wurden ebenfalls theils in Carbol- Glycerin, theils in Nelkenöl eingeschlossen. Solche Präparate eignen sich aber wegen der geringen Durchsichtigkeit , die sie erlangen, nicht für Untersuchungen mit starken ObjeCtiven. E. Schoebel {Neapel). Bugge, G., Zur Kenntniss des Excretionsgefäss- Systems der Cestoden und Trematoden (Zool. Jahrb., Abth. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XVI, 1902, p. 177—234 m. 4 Tfln.). Die frischen Thiere wurden mit kalter 5 procentiger Sublimat- iösung, der 5 Procent Essigsäure zugesetzt war, fixirt. Nach sechs bis zwölf Stunden in gewöhnlicher Weise weiter behandelt. Die besten Färbungen wurden bei Schnitten erhalten , die kurz vor der Färbung, behufs Entfernung von zurückgebliebenem Sublimat, mit Jod- Jodkalilösung behandelt wurden. Gefärbt wurde fast ausschliesslich nach der Bordeaux-Eisenhämatoxylin-Methode. Zuweilen wurde jedoch anstatt mit Bordeaux mit Eosin oder Fuchsin vorgefärbt. E. Schoebel {Neapel). Joseph, H. , Untersuchungen über die Stützsubstauzen des Nervensystems, nebst Erörterungen über 4* 52 Referate. XX, 1, deren histogenetische und pliy löge netische Deutung (Arb. a. d. Zool. Inst. d. Univ. AVien Bd. XIII, 1902, p. 335—400 m. 2 Figg. u. 4 Ttln.). In vorliegender Arbeit werden hauptsächlich die Anneliden berücksichtigt. Die Behandlung des Materials geschah nach den verschiedensten Methoden. Die Eegenwürmer, überhaupt die Oligo- ehäten, gaben tadellose Resultate fast nur bei Fixirung in Sublimat- Kochsalzlösung. Als das verlässlichste Merkmal einer guten Er- haltung kann angesehen werden, wenn die Querschnitte der Achsen- cylinder , vor allem die der Neurochorde , möglichst ungeschrumpft, als kreisrunde oder elliptische homogene Felder erscheinen, in deren Innern man bei entsprechender Färbung die Neurofibrillen erkennen kann. Auch für Polychäten ist die Sublimat -Kochsalzlösung recht gut, daneben aber auch mit grossem Vortheil die von Erik Müller angegebene Fixirung in einem Gemisch von Kaliumbichromatlösung und Formol. Grefärbt wurde mit Delafield's Hämatoxylin , Häm- alaun, Hämateiu I A nach Apathy , zur Nachfärbung diente Fuchsin oder VAN GiESON'sches Gemisch. Sehr ausgedehnte Verwendung fand weiter auch die ÜEiDENHAiN'sche Eisenhämatoxylinfärbung combinirt mit Bordeaux R , Rubin S , Orange G , oder Säurefuchsin. — Die Regenwürmer wurden theils in frisch eingefangenem Zustande, theils erst nach längerer oder kürzerer Gefangenschaft getödtet. Im ersteren Fall enthielt natürlich der Darm viel Erde und Steine, und es wurde in Folge dessen bloss ein ventraler medianer Streif des Hautmuskel- schlauches sammt Bauchmark conservirt und weiter verarbeitet, im letzteren Falle , wo die Thiere mit Filtrirpapier gefüttert worden waren, konnten Querschnitte durch das ganze Thier gemacht werden. Bei grösseren Polychätenexemplaren wurde gleichfalls oft bloss der ventrale Streif sammt Bauchmark geschnitten , da die sehr starken Borsten dem Schneiden sehr hinderlich sind. E. Sehoebel {Neapel). Toltzeulogel , E. , U n t e r s u c h u n gen übe r d e n a u a t o m i - sehen und histologischen Bau des Hinterendes von Ascaris megalocephala und Ascaris lum- bricoides (Zool. Jahrb., Abth. f. Anat. u. Ontogeu. Bd. XVI, 1902, p. 481—510 m. 3 Ttln.). Verf. findet, dass die Gewebe der in Frage kommenden Thiere durch die meisten Fixiruugsflüssigkeiten gar zu stark verändert wer- den. Er hat gerade durch die von Vielen verworfene einprocentige XX, 1. Referate. 53 Chromsäurelösuiig, ferner durch die PERENYi'sche Flüssigkeit die besten Präparate erhalten. Frisches Material wurde in eine der genannten, frisch bereiteten Fixirungsfiüssigl^eiten gebracht. Nach Verlauf von 12 Stunden wurden mittels einer feinen Schere in Entfernungen von etwa 1 bis 1^/., cm ziemlich tiefe Einschnitte senkrecht zur Längs- achse in den Körper gemacht, um das Eindringen der Flüssigkeiten zu erleichtern. Nach weiterer Einwirkung von 48 Stunden wurde das Material 24 Stunden lang in tiiessendem Wasser ausgewaschen und dann gradatim mit 70-, 80-, 90-, 93procentigem und schliesslich mit absolutem Alkohol nachbehandelt. Eingebettet wurde mittels Chloroform-Paraffin. Behufs Färbung wurden die Schnittserien 5 Mi- nuten lang in eine öprocentige alkoholische Fuchsinlösung (Alkohol von 90 Procent) getaucht und sodann in einer 0'05procentigen alko- holischen Pikrinsäurelösung (ebenfalls Alkohol von 90 Procent) eine Minute lang hin- und herbewegt. Die Objectträger wurden dann rasch mit absolutem Alkohol abgespült und in Xylol gebracht, worauf Einschluss in Canadabalsam erfolgte. Die auf solche Weise her- gestellten Präparate zeigen die chitinisirten Bestandtheile dunkelroth bis dunkelbraunroth, die Musculatur rosa mit einem Stich ins Violette, die Ganglienzellen sowie Nerven peripher blassröthlich, central gelb- lich. E. Sdioebel {Neapel). Halpeni, B., Das Hüll- und Stützgewebe des Baucb- marks bei Astacus f lu via tili s (Arb. a. d. Zool. Inst. d. Univ. Wien Tom. XIV, 1903, p. 423—442 m. 12 Figg.). Die Untersuchungen wurden theils am überlebenden Gewebe in physiologischer Kochsalzlösung, theils an macerirtem Material unter Zusatz aufhellender Flüssigkeiten, ferner nach vitaler Methylenblau- färbung und an Schnittserien ausgeführt. Zur Maceration diente Drittelalkohol und Kaliumbichromatlösung (1 : ,500) und eine von Apathy empfohlene Macerationsflüssigkeit. Behufs der Methylenblau- färbung wurde das dem noch lebenden Thiere entnommene Bauch- mark für 30 Minuten in eine einprocentige Methyleublaulösung ein- gelegt, dann in einem Uhrschälchen der Einwirkung der Luft ausgesetzt. Fixirt wurde die Färbung in concentrirter Ammoniumpikratlösung. Das für Schnittserien bestimmte Material wurde in FLEMMixa'scher Lösung, in Sublimatalkohol oder in PERENvi'scher Flüssigkeit fixirt. Auch Kaliumbiehromatessigsäure bot gewisse Vortheile. Osmiumsäure gab aber bei Astacus keine befriedigenden Resultate. Von Farben 54 Referate. XX, 1. kamen Heidenhain's Eisenhämatoxylin und Delafield's Hämatoxylin zur Verwendung, letzteres in stark verdünnten Lösungen, bauptsäch- lich zu Stückfärbungen. Ausserdem wurden zuweilen verscbiedene Farbcombinationen angewandt. E. Schoebel {Neapel). Pappenheim , P. , Beiträge zur Kenntniss der Entwick- lungsgeschichte von Dolomedes fimbriatus Clerk, mit besonderer Berücksichtigung der Bildung des Gehirns und der Augen (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIV, 1903, p. 109 — 154 m. 2 Tfln.). Die zur Untersuchung dienenden Eier wurden dem Cocon ent- nommen , sofort während anderthalb bis 2 Minuten in concentrirter wässeriger Sublimatlösung von 80^ C. fixirt und dann in Wasser von Zimmertemperatur gebracht. Um ein schnelles Eindringen des Alko- hols bei der Nachbehandlung zu ermöglichen, wurden die noch nicht geplatzten Schalen der Eier mit der Nadel angebohrt. Die allmäh- lich in absoluten Alkohol überführten Objecto wurden schliesslich in 93procentigem Alkohol aufbewahrt. Für Schnittserien wurde in Pa- raffin eingebettet, zum Theil nach Färbung in Boraxcarmin. Beim Herstellen der Schnitte ist Ueberpinseln mit MastixcoUodium unbedingt nothwendig, um das Ausspringen des äusserst brüchigen Dotters zu verhindern. Die eventuelle Schnittfärbung erfolgte mit Alauncarmin. Zur Herstellung von Totalpräparaten wurden die mit Boraxcarmin gefärbten und mit Salzsäure-Alkohol gut ausgezogenen Eier in Wasser gebracht, nach 24 bis 48 Stunden vorsichtig mit Nadel und Pincette geschält und die Keimstreifen unter dem Präparirraikroskop abge- löst und auf dem Objectträger weiter behandelt. E. Schoebel {Neapel). Sclienk, 0., Die antennalen Hautsinnesorgane einiger Lepidopteren und Hymen opteren mit beson- derer Berücksichtigung der sexuellen Unter- schiede (Zool. Jahrb., Abth. f. Anat. u. (3ntogen. Bd. XVH, 1903, p. 573—618 m. 4 Figg. u. 2 Tfln.). Die Antennen wurden von den lebenden mit Aether betäubten Thieren abgeschnitten und sofort in die Fixirungsflüssigkeit gebracht. Als solche kam zur Verwendung die von vom Rath angegebenen Gemische : Pikrinosmiumessigsäure und Pikrinsublimatessigsäure, ferner 94procentiger Alkohol und schliesslich ein Gemisch aus 5 Th. Aether und 1 Th. absolutem Alkohol. Besonders zu empfehlen ist die Pikrin- XX, 1. Referate. 55 Sublimatessigsäure und das Aether- Alkoholgemisch. Die schwarz pigmentirteu Fühler für Totalpräparate wurden nach P. Mayer mit nascirendem Chlor gebleicht. Versuche, das Chitiu der zum Schneiden bestimmten Antennen mit Eau de Labarraque oder Eau de Javelle zu erweichen, blieben erfolglos. Die histologischen Untersuchungen konnten daher nur an Puppen ausgeführt werden, die kurz vor dem Ausschlüpfen standen. Da die Färbungsmittel in die ganzen Antennen nur sehr laugsam eindringen, wurde fast ausschliesslich Schuittfärbung angewandt. Boraxcarmin, Bleu de Lyon, Eisenhämatoxylin und be- sonders Ehrlich's Hämatoxylin mit Orange Gr gaben gute Färbungen. E. Sdioebel (Neapel). Ellderleill , 0., Eine einseitige Hemmungsbildung bei Telea polyphemus von ontogenetischem Stand- punkt. Ein Beitrag zur Kenntniss der Ent- wicklung der Schmetterlinge (Zool. Jahrb., Abth. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XVI, 1902, p. 571—614 m. 4 Figg. u. 3 Tfln.). Dem Studium der Topographie des respiratorischen Systems der Puppe wie der Imago stellen sich wesentliche Schwierigkeiten ent- gegen , da Präpariren unter Wasser oder physiologischer Kochsalz- lösung uuthunlich , weil durch Eindringen von Flüssigkeit in die Tracheen dieselben bald unsichtbar werden. Nach einer Reihe von Versuchen stellte sich folgende Präparationsmethode als geeignet heraus : Das lebende Object wird auf eine Wachsplatte befestigt und zwar die dorsale Seite nach oben. Dann öffnet man vorsichtig in der Mitte den Thorax und präparirt den Chitinpanzer theilweise hin- weg, ebenso etwas vom oberen Adiposum, ohne jedoch Tracheenäste zu verletzen. Durch einige kurze Nadeln wird das Thier lixirt, indem man vor und hinter den Flügeln den Thorax bis in die Wachsunter- 'O' läge durchsticht und zugleich denselben vorsichtig etwas seitlich aus einander zieht. Dabei dürfen aber weder Nerven noch Tracheen geschädigt werden. Das Hauptgewicht ist dann auf das Heraus- präpariren des gesammten Fettgewebes aus dem Thorax, oder wenig- stens aus einer Hälfte desselben zu legen. Wird kein wesentliches Organ verletzt , so verhält sich die Puppe dabei völlig ruhig. Die verdunstende Wassermenge des Blutes ergänzt man von Zeit zu Zeit mit einem Tröpfchen verdünnter physiologischer Kochsalzlösung, doch ist dabei mit grosser Vorsicht zu verfahren, da bei zu starkem Zu- satz sofort Flüssigkeit in die Tracheen eintritt und dadurch das Object 56 Referate. XX, 1. wenigstens tlieilweise unbrauchbar wird. Die durch das unverletzte Rückengefäss nicht unterbrochene Blutcirculation erhcält das Thier völlig am Leben. Leichter und weniger Zeit in Anspruch nehmend ist die Präparation der Tracheen in den Flügeln. Man umschneidet einfach die Räuder derselben mit einer feinen Schere, fixirt die Puppe durch einige Nadeln und bebt die Flügel vom Körper ab , ohne je- doch die Flügelbasis zu verletzen. Die Hinterflügel liegen dann auf den Vorderflügeln , und nachdem man sich über ihren Aderverlauf orientirt hat, präparirt man sie hinweg. Die nun frei auf der Flügel- scheide der Puppe liegenden Vorderflügelanlagen bieten ein günstiges Object zur Orientirung. Man kann auch die Adern durch Freilegen der Flügelbasis und schwaches, vorsichtiges Ziehen meistens bis zu ihrem Ursprung aus den gemeinsamen Stämmen verfolgen. Eine Conservirung der verhältnissmässig mühsam zu erhaltenden Präparate ist im allgemeinen nicht möglich. Den Verlauf der Adern im Vorder- flügel zu fixiren , gelang Verf. in einigen Fällen durch Eintrocknen auf der Flügelscheide der Puppe. Die Blutflüssigkeit wurde durch vorsichtiges Abtupfen mit Fliesspapier zwischen den Adern und an der Flügelbasis entfernt. Es trocknete so der Flügel gewissermaassen auf der Flügelscheide ein, während der Turgor der Adern durch die lebende Puppe erhalten wurde. Nacli völligem Eintrocknen Hess sich dann der Flügel vom Körper lostrennen , ohne dass noch ein Verschwinden der feinen Adern eintrat. Die Untersuchung des Ge- äders der Imago ist meist nur nach Entschuppung möglich. Zuweilen erreicht man aber auch durch Tränken des Flügels mit Xylol , das weniger schnell verdunstet als Benzol, eine genügend starke Aufhellung zum Studium der hauptsächlichsten Adern. E. Schoehel {Ncaj}el). Stitz , H. , Der Genitalapparat der Mikrolepidopteren (Zool. Jahrb., Abth. f. Morphol. Bd. XV, 1901, p. .385—434 m. 5 Tfln.). Zur Fixirung verwandte Verf. anfangs Sublimatalkohol (1 Th. concentrirte Sublimatlösung, 2 Th. absoluter Alkohol), später aber Alkohol allein imd zwar in steigender Concentration, wobei die gleichen Resultate wie mit Sublimatalkohol erreicht wurden. Die Schnitte wurden entweder mit Hämatoxylin allein gefärbt, oder nach starker Ueberfärlning damit mit Pikrofuchsin (nach van Gieson) behandelt. Die Chitinbildungen des Abdominaleudes sowie die der Bursa copu- latrix wurden ausserdem noch nach Behandlung mit Kalilauge unter- sucht. E. Schoebel {Neapel). XX, 1. Referate. 57 List, Th. , Die Mytiliden des Golfes von Neapel und der angrenzenden Meeres-Absclinitte (Fauna u. Flora des Golfes von Neapel Mongr. 27, 1902. — 312 pp. m. 17 Figg. u. 22 Tfln.). An technischen Erläuterungen giebt Verf. Folgendes : Jede Muschel , soll sie zu makroskopischen oder mikroskopischen Unter- suchungen dienen , muss , wenn sie ein richtiges Bild des inneren Baues des Thieres wiedergeben soll, narkotisirt werden. Am besten eignet sich hierzu Cocain in 2procentiger Lösung in Seewasser ; das Narkoticum muss nach und nach zugesetzt werden. Die voll- ständige Narkose ist erreicht, wenn bei leichter Berührung des Mantel- randes kein Zuklappen der Schale mehr erfolgt. Bei jungen Muscheln und kleineren Arten, wie z. B. Mediolaria, muss man sehr vorsichtig sein, um den richtigen Zeitpunkt zur Fixirung nicht zu versäumen, d. h. nicht zu lange zu narkotisiren. Andernfalls lösen sich leicht die Kiemenblätter von einander los, und ganze Verbände von Epithel- zellen am Mantelrande beginnen eigenthümliche Proliferationen zu bilden. Hat man das Thier zur Untersuchung eines bestimmten Organes nothwendig, so löst man vorsichtig unter Wasser die eine Schalenhälfte ab und präparirt das betreffende Organ heraus, um es dann zu fixiren. Ist der ganze Weichkörper erwünscht , so steckt man , bevor die Muschel in die Hxirungsflüssigkeit gebracht wird, der Vorsicht halber ein Stückchen Holz oder Kork zwischen die vollständig klaffenden Schalenränder. Sobald an dem W^ichkörper die halbe oder ganze Schale noch haftet, muss die Fixirungsflüssig- keit eine freie Säure enthalten. Für viele anatomische Untersuchungen genügt schon das Einlegen in 70procentigen Alkohol , dem 2 und mehr Procent Salpetersäure zugesetzt ist. Sehr gute Dienste leistet auch Chromessigsäure. Vor allem aber ist die starke FLEJiMiNG'sche Flüssigkeit und P. Mayer's Pikrinsalpetersäure zu empfehlen. Diese beiden Fixirungsflüssigkeiten leisten bei histologischen Untersuchungen ausgezeichnete Dienste. Bei allen genannten Gemischen ist die Säure in 12 bis höchstens 24 Stunden verbraucht. Von ganzen Muscheln lassen sich nur kleine Exemplare einigermaassen gut fixiren. Zum Studium des feineren histologischen Baues sind kleinere Stücke von den betreffenden Organen zu fixiren und zwar zur Controle immer von Thieren, die narkotisirt wurden und von solchen, die es nicht waren. Für solche kleinere Stücke leistet Sublimat mit und ohne Zusatz von Eisessig recht gute Dienste. Die Cilien werden sehr gut erhalten , wenn der Weiclikörper oder einzelne Organe wenige Mi- 58 Referate. XX, 1. nuten in eine lOprocentige Formollösung in Seewasser und dann in die betreffende definitive Fixirungsflüssigkeit gebracht werden. Was das Färben betrifi't, so ist Scbnittfärbung vorzuziehen. Als Kernfarbe leistet Mayer's Hämalaun, das allerdings auch die Schleimdrüsen mit ungeformtem Inhalte färbt, bei weitem die besten Dienste, und als Plasmafarbe genügt Eosin vollständig , wenn man sowohl das wasserlösliche wie das in Alkohol lösliche in schwächerer oder stär- kerer Lösung mit oder ohne Zusatz von einer Spur Essigsäure an- wendet. Bei den Färbeversuchen mit Eosin in Verbindung mit Essigsäure gelangte Verf. zu einem Verfahren , auf Schnitten die feinsten Vertheilungen der Nervenfasern und die Priraitivfibrillen dar- zustellen. Eine exacte Vorschrift dieser Methode kann Verf. zur Zeit noch nicht geben. Der Weg, der meist zu Resultaten führt, ist aber folgender. Nachdem die Schnitte auf dem Objectträger mit Hämalaun gefärbt sind, werden sie mit einer Schicht von destillirtem Wasser bedeckt , dem 2 Tropfen Essigsäure zugesetzt wird. Nach einigen Minuten wird diese sehr verdünnte Essigsäure abgegossen und auf den Objectträger tropfenweise in Wasser gelöstes Eosin zu- gesetzt 5 es entsteht ein Niederschlag , der nach wenigen Minuten abgegossen wird. Das Präparat wird alsdann mit destillirtem Wasser abgespült und kommt direct in 90procentigen oder besser gleich in absoluten Alkohol , um dann möglichst rasch in Canadabalsam ein- geschlossen zu werden. Die Methode beruht also im Princip darauf, dass durch die Essigsäure die Gewebe etwas quellen und hierdurch gewisse Elenientarbestandtheile deutlicher hervortreten, sodann werden die Gewebe gleichsam mit der Säure gebeizt , und das Eosin wird in dem Augenblicke, in dem es mit Essigsäure in Berührung kommt, zersetzt. — Verf.'s Methode zur Darstellung des Nervensystems, im speciellen des peripheren Nervensystems an Totalpräparaten, beruht auf dem Umstände , dass bei stark abgemagerten Thieren in den Nervenstämmen Granula auftreten, die sich leicht mit Osmiumsäure schwärzen. Die narkotisirten Muscheln werden am besten in starkem FLEMMiNG'schen Gemisch fixirt , dann nach einem Tage aus dieser Flüssigkeit herausgenommen, die Schalen abgelöst, der Weichkörper ausgewaschen und in Alkohol gebracht. Eine intensivere Schwärzung der Nerven lässt sich noch nachträglich dadurch bewirken, dass man die in Alkohol liegenden Objecte dem directen Sonnenlichte aussetzt. Das gesamrate periphere Nervensystem mit seinen feinsten Ver- zweigungen kommt so in der in Xylol oder Benzol aufgehellten Muschel zur Anschauung. Auch der Verlauf der übrigen Nerven XX, 1. Referate. 59 lässt sich leicht mittels Präparntion in der Aufhellungsflüssigkeit dar- stellen. Zum Studium des Verlaufes des Darmkanales verfährt man am besten so, dass man zur Zeit, wenn die Geschlechtsdrüsen nicht entwickelt sind , den in besonderen Behältern gehaltenen Muscheln angeriebene Tusche als Nahrung giebt. Sehr bald ist der Darm und auch die Leber damit angefüllt. Die Fütterung wird unter- brochen , wenn die Tuscheaufnahme in der Leber noch nicht weit vorgeschritten ist. Die narkotisirte Muschel wird dann in 70pro- centigem Alkohol -f- 3 Procent Salpetersäure oder Pikrinsalpetersäure tixirt und der bald aus der Schale sich ablösende Weichkörper nach und nach in absoluten Alkohol und von da in eine Aufhellungsflüssig- keit übergeführt. — Zur Technik der Herstellung von Schalenschliften macht Verf. folgende [allerdings wenig genaue] Angaben. Beim Schleifen bedient man sich 1) einer Eisenplatte, auf der mit Wasser und feinem Schmirgel die Hauptmasse des Objectes abgeschliifen wird, 2) eines Steines mit gröberem Korn, auf dem mit Schmirgel und Wasser oder auch mit Wasser allein das Object bis nahezu zur gewünschten Dicke geschliffen wird, 3) eines feinen Steines (sogenannten Abziehsteines), auf dem polirt wird. Zur Herstellung von Flächenschliffen wählt man sich ein Stückchen Schale aus, das eine möglichst plane Fläche besitzt. Die Schicht der Schale, die man studiren will, schleift man zunächst auf dem Steine mit Schmirgel und Wasser an , worauf sie polirt wird. Auf einem Objectträger von möglichst kleinem Format erwärmt man etwas festen ungelösten Canadabalsam bis zur Dünu- flüssigkeit und legt das Object mit der angeschliffenen Fläche nach unten darauf. Dabei darf kein Druck ausgeübt werden. Dann er- hitzt man vorsichtig weiter, bis alle Blasen unter dem Präparat ver- schwunden sind, und drückt es 'nun fest auf die Objectträger an. Der Canadabalsam erstarrt sehr rasch, und schon nach kurzer Zeit kann mit dem Schleifen begonnen werden. Der Schleifstein muss oft mit kaltem Wasser benetzt werden, um eine Erweichung des Canadabalsams zu vermeiden. Etwaige Luftblasen lassen sich leicht durch Zusatz von in Chloroform gelöstem Canadabalsam entfernen, der aber immer erst ganz hart werden muss, ehe man wieder weiter schleifen kann. Hat der Schliff die gewünschte Dicke, so wird er polirt und in Canadabalsam eingeschlossen. Bei der Herstellung von Querschlitfen durch die Schale ist es nothwendig, wegen der Zart- heit des Objectes mehrere Schalenstückchen erst in Canadabalsam einzubetten. Man wählt die Schalenfragmente so aus , dass sie gut an einander passen. In einem kleinen Behälter erwärmt man festen, 60 Referate. XX, 1. mit zähflüssigem gemischten Cauadabalsam und dem Object so lange, bis der Balsam, zu einem feinen Faden ausgezogen, nach dem Er- kalten leicht bricht. Ist der richtige Zeitpunkt erreicht, so nimmt man die Schalenstückchen möglichst rasch heraus , drückt sie zwi- schen den Fingern, die man vorher mit Wasser benetzt hat, fest an einander und legt sie in Wasser. Das abgekühlte Stückchen zerlegt man mit einer feinen Säge in dünne Lamellen. Beim Sägen ist fortwährend tropfenweise Seifenwasser in die Sägespalte zu giessen. Die abgesägten Querschnitte schleift man dann wie die Flächen- schliffe. E. Schoebel (Neapel). Bäcker, E-. , Die Augen einiger Gastropoden (Arb. a. d. Zool. Inst. d. Univ. Wien Tom. XIV, 190.3, p. 259—290 m. 2 Tfln.). Die Untersuchungen wurden an Schnitt- und Macerationspräpa- raten ausgeführt. Das zum Schneiden bestimmte Material wurde nach den verschiedensten Methoden fixirt. Für die Darstellung der Stützsubstanzen leisteten PERENYi'sche Flüssigkeit und das von E. MtJLLER angegebene Gemisch von Formol und Kaliumbichromat- lösung (käufliches Formol 4 Th., Sprocentige Kaliumbichromatlösung 1 Th.) gute Dienste. Für das Studium der nervösen Elemente des Auges ist indess die PERENYi'sche Flüssigkeit nicht zu empfehlen. Hierfür eignen sich neben dem Formol -Kaliumbichromat- Gemisch, Sublimat - Kochsalzlösung , Sublimatalkohol nach Apathy und andere Sublimatgemische. Zur Färbung wurde mit bestem Erfolge Heiden- hain's Eisenhämatoxylin, combinirt mit Eosin oder Orange G, ver- wendet; weiter ist zu empfehlen Apäthy's Hämatein lA, wobei man mit Vortheil die Abspülung in destillirtem Wasser nur ganz kurze Zeit dauern lässt, und Delafield's Hämatoxylin. Die ApATHv'sche Nachvergoldung und die GoLoi'sche Methode blieben trotz sorgfältig- ster Beachtung aller Cautelen erfolglos. Die Depigraentirung , die zum Studium des feineren Baues der Pigmentzellen unbedingt noth- wendig ist, wurde mit Jander's Chromsalpetersäure ^ vorgenommen und zwar sowohl im Stück als an den Schnitten, Im letzteren Falle war es, um Ablösung der Schnitte zu vermeiden, nothwendig, statt der gewöhnlich zum Aufkleben der Schnitte gebrauchten ein- procentigen Lösung von Eiweiss-Glycerin in destillirtem Wasser eine stärkere Lösung zu verwenden. Beim Studium der Augen von 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XV, 1898, p. 163. XX, 1. Referate. 61 Haliotis leisteten Macerationspräparate gute Dienste. Vor allem er- wies sich die von Hilger empfohlene 2- bis 3procentige Lösung von Kaliumchromat in Wasser sehr brauchbar. E. Schoebel (Neapel). B, Wirhelthieve, Boiinet, Beiträge zur Embryologie des Hundes. Zweite Fortsetzung (Anat. Hefte, H. 64, 65, 1902, p. 327 —499 ra. 6 Tfin.). Verf. hebt hervor, dass die Anfertigung guter Präparate von Hundeplacenten nicht ganz leicht ist, die Schwierigkeiten wachsen mit der Dauer der Trächtigkeit Avegen der steigenden Durchsaftung und des bedeutenden Blutgehaltes des Organes und wegen der Zu- nahme des Detritus. Nach mehrfachen Versuchen bewährten sich am besten ZENKER'sche Flüssigkeit und die FLEMMiNG'schen Gemische. Brauchbar war auch 4procentige Formollösung. Sublimat ist nament- lich für spätere Stadien wegen der unvermeidlichen Schrumpfung weniger empfehlenswerth, auch verwischt es leicht mehr oder weniger die Zellgrenzen. Die KLEiNENBERG'sche Lösung kann wegen der störenden langen Nachbehandlung mit Alkohol nicht empfohlen werden. Ganz unbrauchbar war MtJLLER'sche Flüssigkeit und absoluter Alkohol zur Darstellung feinerer Details. Selbstverständlich darf man nur lebenswarmes Material verwenden. Neben den histologischen Ver- hältnissen wünschte Verf. auch das Verhalten der Blutgefässe zu Studiren. Er unterband deshalb bei dem durch Chloroform getödteten Thiere zur Erhaltung der natürlichen Blutfüllung die Blutgefässe des Uterus, befestigte einen Theil der so vorbereiteten Fruchtkammern schnell auf Korkplatten und brachte sie so in die Fixirungsflüssigkeit. Etwa 2 Stunden später wurde die Fruchtkammer unter möglichster Vermeidung jedes Druckes mit einem scharfen Rasirmesser durch einen Tangentialschnitt gefenstert und weiter fixirt. So kann man die Blutgefässe in ihrer natürlichen Füllung erhalten wie gute In- jectionspräparate. Zu histologischen Studien sind solche Präparate aber nicht brauchbar. (Das Placentargewebe meist etwas gequollen durch die Allantoisflüssigkeit.) Verf. hat deshalb die Fruchtkammern mit möglichst scharfen Instrumenten, um den Inhalt der Drüseu- kammern nicht herauszudrücken, vorsichtig in kleine Stückchen zer- 62 Referate. XX, 1. legt und sie, auf Kork aufgespannt (ohne Dehnung!), fixirt. Um naturgetreue Bilder zu erhalten, müssen die eröffneten und zum Theil entleerten Drüsenkammern nachträglich nach der Paraffiueinbettung entfernt werden. Die Serie wird erst brauchbar, wenn noch nicht eröffnete Drüsenkammern in den Schnitt fallen. Ganz besondere Vorsicht erfordert das Auswässern. Der unvorsichtig angewandte Wasserstrahl wäscht das Blut und den Inhalt der Drüsenkammern sehr leicht aus , und man findet dann statt gefüllter leere Drüsen- kammern und -knäuel. Aus demselben Grunde ist auch das mög- lichst rasche und schonende Durchführen der auf den Objectträger aufgeklebten Serien durch Färbungs- und Entwässerungsbäder zu empfehlen. Man kann nicht schonend genug verfahren, um den Drüsendetritus und die Blutergüsse und Oedeme in situ zu erhalten. Brauchbare Schnittdicke durchschnittlich 10 ^, zum Studium feinerer Structuren 5 ix und weniger. Einen guten Maassstab für den Er- haltungszustand der Schnitte giebt das Verhalten des sehr saftreichen und daher leicht schrumpfenden Zottenbindegewebes. Sehr gut be- währte sich die elective Färbung mit ganz dünnen wässerigen Lö- sungen von Rubin und Eosin sowie die Nachfärbung in Hämatein. Man erhält bei einiger Aufmerksamkeit dann nur die rothen Blut- körperchen und die mit gelöstem Hämoglobin imbibirten Elemente in wechselnd intensiver Tönung sehr scharf gefärbt auf blauem Grunde. Auch die Oedeme zeigen vielfach eine wechselnd intensive rothe oder mehr kupferfarbige Färbung und treten so mehr hervor. Zum sicheren Nachweise des Fehlens oder Vorhandenseins der Zellgrenzen ist die Hämatoxylin-Eisen-Beize (Heidenhain) nöthig. Sie ergiebt häufig da sehr schöne Zellgrenzen, wo einfache Färbungen „Syncytien" vor- täuschen können. Zum Nachweise der im mütterlichen Bindegewebe vor sich gehenden Veränderungen war die Färbung nach van Gieson sehr werthvoll. Zur Controle des Fettgehaltes der Placenta ver- wandte Verf. die FLEMJiiNa'sche Lösung mit oder ohne Nachfärbung in Safranin. Mittels des polychromen Methylenblaues und nach- folgender Differenzirung in Glycerinäther (Unna) wurde die Placenta auf Mastzellen untersucht. Eisenreaction wurde , aber nicht immer mit positivem P>folge , an den Farbstoffschollen und Melanocyten vorgenommen. Auf Glykogen wurde nicht untersucht. Scliiefferdeclier ( Bonn). XX, 1. Referate. 63 Lubosch, W. , Ueber die Xuclear Substanz des reifen- den Tritoneneies nebst ßetruclitungen über das Wesen der Eireifung (Jenaische Zeitsclir. f. Naturwiss. Bd. XXXVII, 1902, p. 217—296 m. 5 Tfln.). Da Verf. hauptsächlich zum Zweck einer Nachuntersuchung an seine Aufgabe ging , und dabei vor allem feststellen wollte , in wie weit die Structur des Keimbläschens eine Function der technischen Einflüsse ist, mussten ganz bestimmte Gesichtspunkte bei den ge- wählten Methoden maassgebeud sein. Es wurde von einem untl demselben Ovarium ein Präparat in heisser Chromsäure fixirt (Born), ein zweites in GiLsoN'schem Gemisch (Carnoy) und von diesem wiederum eine Portion jodirt, die andere nicht. Ferner wurde noch die schwache FLEMMixa'sche Flüssigkeit und die ZENKER'sche Lösung angewandt. Es zeigte sich, dass die Jodirung, wenngleich sie natür- lich auf das Aussehen des Keimbläschens nicht ohne Einfluss bleibt, dennoch zu den merkwürdigen Formen der Nucleolen in gar keiner Beziehung steht. Uebrigens konnten ähnliche Bilder, wenn auch viel seltner, nach Chromsäurefixirung erhalten werden. Von wesentlichem Einfluss ist die Färbung: Regressive Färbungen allein angewandt sind gefährlich. Verf. wandte von progressiven F'ärbungen Dela- field's und Hansen's Hämatoxylin, von regressiven Böhmer's Hämat- oxyliu mit Safranin, Boraxcarmin und Heidenhain's Eisenhämatoxylin an. Nach Ansicht des Verf. liefert die Chromsäure für das un- reife Tritonenei die beste Conserviruug und die schlechteste Färb- barkeit, das FLEMMiNG'sche Gemisch die am wenigsten zuverlässige Conserviruug und die beste Färbbarkeit. Die GiLsoN'sche Flüssigkeit steht in der Mitte und giebt, vorsichtig angewendet, bei guter Färb- barkeit auch die Formen der Eier gut wieder. Die heiss (80 '^j an- gewendete Chromsäure — ob halb- oder drittelprocentig ist belanglos — erhält die äusseren Formen der Eier auf allen Stadien sehr gut. Es pressen sich höchstens durch die Schnelligkeit der Fixirung die Eier gegen einander. Beim GiLsoN'schen Sublimatgemisch entstehen, namentlich bei dotterreichen Eiern, Spalträume zwischen Zellleib und Kern ; ausnahmslos gut werden eigentlich nur junge und mittlere Stadien erhalten. Gute Resultate lieferte auch die ZsNKER'sche Flüssigkeit und das auf 40*' C. erwärmte GiLsoN'sche Gemisch. Bei Anwendung des FLEMjiiNG'schen Gemisches ist das Keimbläschen ringsum vom Ei gelöst; die „Höfe", die sich häufig auch bei an- derer Fixation um die Nucleolen herum finden , sind ausserordent- lich gross. Oft ziehen sich Fädchen von dem geschrumpften Nu- (34 Referate. XX, 1. cleolus durch den Hof radieuförmig zum Karyoplasma hin. Auch Verunstaltungen des Kernes sind nicht selten. E. Schoebel {Neapel). Schaper, A., Ueber die Fähigkeit des fertigen Dotter- sackepithels geformte Dotter demente in sich aufzunehmen (Anat. Anz. Bd. XXII, 1902, No. 7 u. 8, p. 129—142, m. 2 Tfln.). Verf. hat versucht festzustellen, in welcher Weise und in wel- cher Form die Dottermassen des Vogeleies, nachdem sie völlig von dem Dottersackepithel umwachsen worden sind, von den Zellen dieses aufgenommen werden. Es musste hierzu zunächst festgestellt werden, ob diese Zellen überhaupt die Fähigkeit besitzen, körperliche Elemente in sich aufzunehmen. Verf. versuchte, das auf dem Wege des Ex- perimentes festzustellen , indem er eine Farbstoffsuspension in den Dottersack eines Hühnereies während der Bebrütung einführte. Er verwandte zur Injection eine Suspension von feinstem Carminpulver in physiologischer Kochsalzlösung, welche vor dem Gebrauche auf 39 ^ C. erwärmt wurde. Zunächst dienten zwei Tage lang bebrütete Hühnereier zu den Versuchen. Injicirt wurde auf folgende Weise. An dem horizontal liegenden Ei wurde mit einem spitzen Instru- mente etwa 2 cm seitlich von dem höchsten Punkte des Eies ein möglichst kleines Loch in die Schale gebohrt, durch dieses in an- nähernd horizontaler Richtung die Nadel einer PRAVAz'schen Spritze mit schnellem Stosse so weit eingeführt, dass ihre Spitze schätzungs- weise etwa in den oberen Theil der Dotterkugel ziemlich dicht unter der Keimscheibe zu liegen kam, und nun wurde zunächst etwa ^/^ cc des Dotters vermittels der Spritze angesogen. Darauf wurde die Spritze aus der von einem Assistenten inzwischen üxirten Nadel herausgezogen, mit der frisch aufgeschüttelten, erwärmten Carmin- suspension gefüllt und dann ^/^ cc des Inhaltes durch die Nadel in den Dottersack injicirt. Die so behandelten Eier (10 Stück) wurden auf 3 weitere Tage in den Brütofen zurückgebracht und dann er- öffnet. Die ersten Resultate waren schlecht, die Embryonen waren sämmtlich abgestorben. Weitere Versuche ergaben , dass gewisse aseptische Cautelen nöthig waren (sowohl bei der Herstellung der Injectionsflüssigkeit wie bei der vorherigen Reinigung der zu ver- wendenden Instrumente) , um zum gewünschten Ziele zu gelangen. Nachdem es geglückt war , einige Eier zu erhalten , die beim Er- ()ffnen (3 Tage nach der Injection) sich in völlig normalem Zustande XX, 1. Referate. 65 befanden, wurde unter erwärmter physiologischer Kochsalzlösung der grösste Theil des Dottersackes vorsichtig vom Dotter abgehoben, in der Salzlösung durch leichtes Schwenken von dem oberflächlich an- haftenden Carrainbelag befreit und dann in absolutem Alkohol lixirt. Die Untersuchung erwies zunächst, dass keine nachweisbare Lösung des Farbstoffes im Ei eingetreten war. Zum Zwecke der mikro- skopischen Untersuchung wurden kleine Stücke aus verschiedenen Theilen der Dottersackwand herausgeschnitten, leicht mit Hämat- oxylin gefärbt, in Paraffin eingebettet, und auf dem Mikrotom in Querschnitte von 10 [x Dicke zerlegt. — Später wurden die Injec- tionen erst bei Eiern vom sechsten Bebrütungstage ausgeführt. Die Eier wurden auf vier weitere Tage in den Brütofen zurückgebracht, dann wie oben eröffnet, der Dottersack wurde in toto vom Dotter abgehoben, in Kochsalzlösung oberflächlich abgespült und in Alkohol fixirt. — Bei der Untersuchung zeigte sich, dass die in radiärer Richtung vom Ductus omphalomesentericus nach der Peripherie ver- laufenden Dottersackwülste , die die grösseren Dottergefässe um- schliessen , sich dadurch auszeichneten , dass die Carminmasse mit besonderer Vorliebe an ihnen anhaftete. Es wurde deshalb aus dem Dottersacke ein Sector herausgeschnitten , dessen Basis durch den Rand des Gefässbezirkes oder durch den Keimwall gebildet war und dessen Spitze au die Abgangsstelle des Ductus omphalomesen- tericus stiess. Dieses Stück wurde durch zwei Querschnitte wieder in drei kleinere Stücke zerlegt, von denen also das central gelegene (neben dem Dotterstiele) den ältesten Abschnitt, das periphere hin- gegen (Randtheil des Gefässbezirkes) den jüngsten Abschnitt des Dottersackepithels enthielt. Diese drei Stücke wurden , wie früher, leicht mit Hämatoxylin gefärbt , in Paraffin eingebettet , und jedes für sich in 10 fj, dicke Schnitte (quer zu den Dotterwülsten) zerlegt. Schiefferdecker {Bonn). Courant , Ueber die Präputialdrüsen des Kaninchens und über die Veränderungen derselben in der Brunstzeit (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXII , 1903, p. 175—193 m. 2 Tfln.). Die dem lebenden narkotisirten Thiere entnommenen Drüsen wurden in angewärmter concentrirter, wässeriger Sublimat-Kochsalz- lösung oder in FLEMMma'scher Flüssigkeit fixirt, und die in gewöhn- licher Weise hergestellten Schnittserien in verschiedener Weise tingirt. Vorzugsweise kam hierbei van GiESON'sches Gemisch, Heidenhain's Zeitsehr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 1. 5 QQ Referate. XX, 1. Eisenhämatoxylin und nach Fixirung in FLEMMiNo'schem Gemisch Safranin zur Verwendung. E. Schoebel {Neapel). Zietzschmann , E. H. , Beiträge zur Morphologie und Histologie einiger Hautorgane der Cerviden (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIV, 1903, p. 1 — 63 m. 3 Tfln.). Zur Fixirung wurden kleine Hautstücke 8 bis 10 Tage in MüLLER'sche Flüssigkeit, die jeden 2. Tag gewechselt wurde, bei einer Temperatur von 37^ C. fixirt. Nach gründlicher Auswässeruug wurden die Objecto mit Alkohol steigenderer Concentration während 5 Tagen nachbehaudelt, dann einen Tag in ein Gemisch von gleichen Theilen Schwefeläther und absoluten Alkohol gebracht und schliess- lich in Celloidin eingebettet. Gefärbt wurde meist mit Hämatoxylin und Eosin. Zum Fettnachweis wurde ausserdem noch das in ge- wöhnlicher Weise mit MüLLER'scher Flüssigkeit fixirte Material 6 bis 8 Tage in ein Gemisch von 2 Th. MüLLEu'scher Flüssigkeit und 1 Th. einprocentiger Osmiumsäurelösung gebracht, gründlich in fliessen- dem Wasser ausgewaschen und dann wie oben augegeben weiter behandelt. Zum Nachweis der elastischen Fasern und der Muscu- latur in der Haut kamen die Schnitte zunächst für eine Stunde in eine Fuchsinresorcinlösung (nach Weigert) ; nach dem Ausziehen mit Alkohol und Wasser wurden sie mit Hämatoxylin überfärbt, wieder mit Wasser ausgewaschen und dann in eine Mischung von gesättigter wässeriger Lösung von Pikrinsäure und Säurefuchsin (nach van Gie- son) tingirt. Die Schnitte dürfen nur 2 bis 3 Minuten in dem letz- teren Farbgemisch verbleiben, und sind nach flüchtigem Abspülen mit destillirtem Wasser mit Alkohol steigender Concentration zu behan- deln, dann in gewöhnlicher Weise einzuschliessen. E. Schoebel {Neapel). Myers, B. D., Beitrag zur Kenntniss des Chiasmas und der Commissuren am Boden des dritten Ven- trikels (Arch. f. Anat. u. Physiol. 1902, Anat. Abth., p. 347—376 m. 15 Figg.). Zur Herstellung der Celloidinlösungen bedienta sich Verf. auf Anrathen von Prof. Spalteholz des folgenden Verfahrens, und nimmt er an, dass es ihm nur durch diese Methode gelungen sei, ununter- brochene Serien von je 3'33 /< dicken Schnitten herzustellen. Die käuflichen Celloidintafeln wurden in möglichst dünne Scheiben zer- XX, 1. Referate. 67 schnitten, einen bis 2 Tage laug bei Zimmertemperatur getrocknet und in einem Exsiccator über Schwefelsäure vollständig entwässert. Die trockenen Celloidinspäne wurden dann in gleichen Gewichts- theilen von Aether und absolutem Alkohol zu einer 16"66procentigen Lösung aufgelöst. Der absolute Alkohol wurde bereitet durch Zusatz von schwefelsaurem Kupfer zu 99'5procentigem Alkohol (öfteres Um- schütteln innerhalb zweier Tage , Filtriren durch doppeltes Filtrir- papier). Das Durchtränken , Einbetten , Härten , Aufhellen geschah dann nach der Methode von Gage in folgender Weise. Gut fixirtes, gehärtetes und entwässertes Gewebe wird für 2 bis 24 Stunden in Aether-Alkohol gelegt, dann je nach der Grösse einige Stunden des Tages in l'öprocentige Celloidinlösung, dann 5 Stunden bis 5 Tage oder mehr in Gprocentige Celloidinlösung übertragen. Das Glas- schälchen, in welchem die Durchtränkung vor sich geht, muss einen lose aufsitzenden Deckel haben, damit das Celloidin allmählich durch Verdunstung eindickt. Eingebettet wird entweder direct auf einem Holzklötzchen oder in einem Papierkästchen, Verf. zieht das letztere vor, wenn es auf genaue Orientirung und Feinheit der Schnitte an- kommt. Zur Einbettung wurde die 16'66proceutige Lösung benutzt; die Wände des Papierkästchens wurden mit einer möglichst dünnen Schicht von Vaseline überzogen. Das Kästchen muss tief genug sein, dass später die oberste Schicht des Celloidins weggeschnitten werden kann, da sie das Messer angreift. Man giesst zuerst einige Tropfen der Celloidinlösung in das Kästchen, bis der Boden ganz bedeckt ist, dann wird das Gewebsstück in die gewünschte Lage gebracht, das Kästchen mit Celloidin gefüllt und für 24 bis 48 Stunden in eine kleine Glasschale von 60 bis 70 cc Inhalt gebracht. In dieser findet .nun eine allmähliche Verdunstung des Aether-Alkohols statt. Die dünne Schicht von Gprocentigem Celloidin , welche das Gewebe umgab , als es in die Einbettungsmasse kam , erhält dabei dieselbe Consistenz wie diese. Die Luftbläschen steigen an die Oberfläche und verschwinden , und die Eiubettungsmasse legt sich vollständig an das Gewebe. Nach etwa 36 Stunden wird die Schale soweit mit Chloroform gefüllt, dass das Kästchen bedeckt ist. Verf. lässt das Gewebe mindestens 12 Stunden in Chloroform, obgleich bei einem kleinen Blocke die Härtung schon nach wenigen Stunden genügend ist zur Anfertigung von 10 ^ dicken Schnitten. Dann wird das Kästchen herausgenommen , der Block zurecht geschnitten und in Ricinusöl-Xylol gelegt (Ricinusöl 1 Th., Xylol 3 Th.). Die Aufhellung erfolgt in 2 bis 12 Stunden. Der Block kann in diesem Gemisch 68 Referate. XX, 1. unbegrenzt lauge liegen bleiben. Ist er vollständig aufgehellt, so wird er mit einigen Tropfen dicken Celloidins auf ein Holzklötzchen geklebt. Beim Aufdrücken vermeide man sorgfältig, direct von oben auf das Gewebe zu wirken, sondern drücke den Block nur von den Seiten leicht aber fest an. Nach wenigen Minuten klebt er fest und kann in die Mikrotomklammer eingespannt werden. Beim Schneiden muss er und das Messer beständig mit Ricinusöl - Xylol benetzt wer- den , am besten mittels einer Tropfflasche. Die Schnitte kommen nun in Xylol, dann in 95procentigen Alkohol. Um sie später in der richtigen Reihenfolge zu haben, ordnet Verf. die Schnitte beim Schnei- den folgendermaassen auf dem Messer an : 21. 20. 19. 18. 17. 16. 15 14. 13. 12. 11. 10. 9. 8 7. 6. 5. 4. 3. 2. 1 dann wird ein Stück nicht satinirtes Seidenpapier darüber gelegt und mittels eines Kameelhaarpinsels mit Ricinusöl-Xylol befeuchtet. Die Schnitte , die nun am Seidenpapier fest anhaften , werden vorsichtig über die Schneide des Messers hinaus abgezogen und auf einen Objectträger übertragen, der mit einer dünnen Schicht Eiweisslösung überzogen ist. Ehe man das Seidenpapier abzieht, entfernt man das Oel durch Fliesspapier. Dann hebt man das Seidenpapier an einer Ecke auf und rollt es vorsichtig nach rückwärts ab. Jetzt liegen die Schnitte in der richtigen Ordnung auf dem Objectträger. Sie werden durch Aether- Alkohol auf dem Glase fixirt , indem man ent- weder einen Tropfen vorsichtig darauf giesst oder indem mau von dem einen Ende her einige cc darüber hinwegfliessen lässt. Dadurch wird das Celloidin erweicht, der Aether -Alkohol verdunstet schnell, und die Schnitte müssen nun so fest an einander haften und auf dem Objectträger kleben , dass sie durch den Strahl der Wasser- leitung nicht entfernt werden. Um das Oel vollständig zu entfernen, wird der Objectträger in Xylol gebracht, am besten im Brütofen. Es ist meist zweckmässig, ihn noch durch eine zweite Schale Xylol passiren zu lassen , dann kommt er in Alkohol und schliesslich in Wasser, worauf man nach Weigert oder mit irgend einer anderen wässerigen Farblösung färben kann. Natürlich dürfen die Schnitte niemals eintrocknen. Einschluss in neutralen oder alkalischen Balsam, welch letzterer durch Zusatz von reinem kohlensaurem Natrium zu dünnem Xylolbalsam hergestellt wird. Man schüttele die Lösung mehrere Tage laug wiederholt, wende aber keine Hitze an, da sonst XX, 1. Referate. 69 das kohlensaure Natrium sein Krystallisationswasser abgiebt. Nach einigen Tagen lässt man das Natriumcarbonat sedimentiren , giesst die Flüssigkeit darüber vorsichtig ab und dampft über einer Gas- flamme in einem Petrischälchen zur gewünschten Consistenz ein. Findet die Verdampfung langsam statt wie im Brütofen, so wird der Balsam dunkel. In diesem neutralen oder alkalischen Balsam halten sich nach Weigert gefärbte Präparate Jahre lang ohne ihre Farbe zu verlieren. Schiefferdecker (Bonn). Kromayer, E., Neue biologische Beziehungen zwischen Epithel und Bindegewebe. Desmoblasie (Arch. f. Dermatol. u. Syphilis Bd. LXII, H. 2, 3, 1902, p. 1—30 m. 8 Tfln.). Wenn man dünne (3 f.i dicke) Hautschnitte, in welchen die Zell- kerne gut gefärbt sind, untersucht, so wird man an der Grenze von Epidermis und Bindegewebe hier und da gelegentlich Kerne finden, deren Lage und Beschaffenheit es ungewiss erscheinen lassen, ob die dazu gehörigen Zellen der Epidermis oder dem Bindegewebe ange- hören. Um sich über diese Zellen Klarheit zu verschaffen, ist es besser, anstatt der Kernfärbungen Protoplasmafärbuugen anzuwenden, oder beide zu combiniren. Das von dem Verf. angewendete Ver- fahren ist das Folgende. Fixinmg der Haut in öprocentiger Formol- lösung, Paraffineinbettung. Die mindestens 3 fi dünnen, durch Xylol und absoluten Alkohol in oOprocentigen Alkohol übergeführten Schnitte werden auf dem Objectträger ausgebreitet und, nachdem die über- schüssige Flüssigkeit vorsichtig durch Fliesspapier abgesaugt worden ist, durch leichtes Erwärmen des Objectträgers über einer Flamme auf dem Glase fixirt. Dünne Schnitte haften dann so fest, dass alle Färbemanipulationen mit ihnen vorgenommen werden können. Kern- färbung durch Hämalaun, Carmin oder Anilinfarben. Protoplasma- färbung durch secundenlanges Uebergiessen mit einer dünnen, zur Kernfärbung im Contraste stehenden Anilinfarblösung (Methylenblau, Methylviolett , Safranin) , Abspülen in Wasser , das am besten nach leichtem Erwärmen des Objectträgers über einer Flamme weggepustet wird. Auf den derart eben angetrockneten Schnitt kommt alsdann, ebenso wie bei Abstrichpräparaten, direct ein Tropfen Canadabalsam unter das Deckgläschen. Die so gefärbten Präparate zeigen neben der Kernfärbung eine mehr oder weniger starke Färbung des Proto- plasmas der Epithelzellen und der Bindegewebszellen, der Binde- gewebsfasern, der Wandungen der Capillaren, der Grenzmembran 70 Referate. XX, 1. zwischen Epidermis und Bindegewebe und der rothen Blutzellen in den Capillaren. Die Färbung der einzelnen Bestandtheile dilferirt je nach der Kernfärbung und der angewandten Anilinfarbe , der Stärke dieser Farblösung und der Dauer der Färbung, so dass man durch Modification dieser Umstände die differentesten und für den jeweiligen Zweck entsprechendsten Farbbilder erhalten kann, Schiefferdecker {Bonn) . Arnold , J. , Ueber Plasmosomen und Granula der Niere nepit hellen (Virchow's Arch. Bd. CLXIX, H. 1, 1902, p. 1—17 m. 1 Tfl.). Ausser der Beobachtung des überlebenden Objectes wurden vitale und supravitale Granula -Färbungen , Isolirungen der einzelnen Bestandtheile und die Untersuchung nach verschiedenen Methoden fixirter und gefärbter Präparate vorgenommen. Verf. ist durch seine Erfahrungen immer mehr zu der Erkenntuiss gekommen, dass nur auf diesem mühevollen Wege des Vergleiches von Ergebnissen, welche nach verschiedenen Methoden gewonnen wurden , eine Förderung in seinen Untersuchungen zu erwarten ist. 1. Neutralroth, a) Supra- vitale Färbung. Von den Nieren frischgetödteter Thiere (Maus, Ratte, Meerschweinchen, Kaninchen, Katze, Hund und Ziege) wurden mit dem Doppelmesser feine Schnitte angefertigt und möglichst rasch in eine dünne Neutralrothlösung (1 bis 2 Tropfen einer bei 36^ C. gesättigten Lösung zu 10 cc einprocentiger Kochsalzlösung) gebracht. Auch an feinen Schabsein von Nieren eben getödteter Thiere tritt die Granulafärbung ein. Nach 10 bis 15 Minuten kommen in dem gegen das Lumen hin gelegenen Abschnitt der Zellen grosse gefärbte Granula zum Vorschein. Die zuerst schwache Färbung nimmt rasch an Intensität zu. War die Lösung hinreichend dünn, so bleibt eine Färbung der Kerne längere Zeit (24 Stunden und mehr) aus. An feinen Schabsein gelingt bei einiger Ausdauer eine Isolirung der Bestandtheile gefärbter Zellen, namentlich auch von Stäbchen mit gefärbten Granula. Die Färbung nimmt innerhalb der ersten 24 Stun- den an Intensität und Ausdehnung zu. Sie gelingt auch noch an Objecten, welche 2- bis omal 24 Stunden nach dem Tode entnommen wurden. Doch ergeben sich in dieser Hinsicht unter anscheinend gleichen Verhältnissen merkwürdige , noch unerklärte Verschieden- heiten. Die Färbung gelang auch bei der Niere des Menschen , in manchen Fällen noch 6 Stunden nach dem Tode , während sie in anderen schon nach 2 Stunden ausblieb. Bei längerer Einwirkung XX, 1. Referate. 71 der Farbflüssigkeit kommt es zu einer Qnellung der Granula , wie es schien, bei menschlichen Niereu früher als bei Thieren. b) Vi- tale Injection. Warm gesättigte (36" C.) Lösungen wurden Mäusen in das Unterhautzellgewebe injicirt; alle 20 Minuten 1 cc bis zum Tode; durchschnittlich 4 bis 5 Injectionen. Es fanden sich bald spärlichere, bald zahlreichere Granula, namentlich in den Zellen der gewundenen Kanälchen ; doch waren die gefärbten Granula viel spärlicher als bei der vorigen Methode. — 2. Methylenblau. a) Supravitale Färbung. Feine Doppelmesserschnitte oder Schabsei werden in ganz schwache Lösungen von Methylenblau (1 : 20 000 bis 40 000) in einprocentiger Kochsalzlösung eingelegt. Die Färbung der Granula tritt weit später ein als bei Neutralroth ; auch färben sich die Granula in anderer Lage. Beim Menschen wurden nur vereinzelte Granula beobachtet, b) Vitale Injection. Es wurde Mäusen 2- bis 3mal alle 15 Minuten eine gesättigte Lösung von Methylenblau in das Unterhautzellgewebe eingespritzt. 10 Minuten nach der letzten Injection wurden die Thiere getödtet, wenn sie nicht vorher schon gestorben waren. Es fanden sich ziemlich zahlreiche Granula in den gewundenen Harnkanälchen , namentlich nächst dem lunensaume, später aber mehr nach aussen hin. Nach einiger Zeit dieselben diffusen Färbungen des Zellleibes wie bei der supravitalen Färbung. — 3. Indigcarmin, vitale Injection. Es wurde alle 10 Minuten den Mäusen 1 cc einer gesättigten Lösung von indigschwefelsaurem Natrium (von Maschke in Breslau) in das Unter- hautzellgewebe eingespritzt. Nach der fünften Injection wurden die Thiere getödtet, wenn sie vorher nicht gestorben waren. Die Nieren wurden theils frisch, theils nach Härtung in absolutem Alkohol unter- sucht. Im Lumen der gewundenen Harnkanälchen fanden sich massenhaft Abscheidungen , ferner gebläute Körner , nicht nur im Bürstensaume , sondern auch in den angrenzenden Abschnitten des Protoplasmas und zwar auch in solchen Kanälen, deren Lumen Farb- stoffabscheidungen nicht enthielt. Die übrigen Theile der Zelle und die Kerne waren niemals und in keinem Abschnitte der Harnkanäl- chen gefärbt. — 4. Lithioncarmin, vitale Injection. Verf. verwandte eine klare aber gesättigte Lösung von Lithioncarmin, von der er Mäusen alle 20 Minuten 1 cc in das Unterhautzellgewebe injicirte 5 nach der dritten Injection wurden die Thiere getödtet : Mehr oder weniger deutliche Färbung des Bürstensaumes, Körnchen im äusseren oder inneren Abschnitte desselben, bald an beiden Stellen, sowie Farbstoffkörnchen im Protoplasma, namentlich zwischen Innen- 72 . Referate. XX, 1, säum und Kern. In vielen Kanälchen eine eigenthümliclie Felderung. Helle Felder mit central gelegenen Kernen wurden von theils schmä- leren , theils breiteren rothen Säumen eingefasst , welche aus rothen Körnchen bestanden. — Zur Isolirung leistete die früher schon angegebene Jod -Jodkalium -Eosin -Mischung sehr gute Dienste. Sie löst die Zwischensubstanzen und ermöglicht so eine isolirte Darstel- lung der einzelnen Zellbestandtheile. Durch Zusatz von Jod kann die quellende Wirkung beschränkt werden. Man stellt die Lösung in der Weise her, dass mau zu 10 cc einer lOprocentigen Jod- kaliumlösung einen bis 2 Tropfen LuGOL'scher Lösung und Eosin in Substanz zusetzt. Sehr vortheilhaft ist es , dass die mit den ge- wöhnlichen Fixatiousmittelu verbundenen Fällungen bei der Anwendung dieser Mischung vermieden werden. Die Anwendung dieser Methode ist unentbehrlich , wenn man sich über die Existenz der Granula, deren gegenseitige Lagerung und ihre Beziehung zu anderen Zell- bestandtheilen unterrichten will. Das die auf diesem Wege isolirten Plasmosomen und Granula nicht Producte einer Macerationsquellung von Fäden sind, lehrt ein Vergleich mit den oben geschilderten, mit Chlornatriumlösungen behandelten Objecten, sowie mit Osmiumpräpa- raten. — Fixirtes Object. Von den vielen versuchten Fixirungs- methoden ist am meisten zu empfehlen Härtung in Formol-Chromsäure, Beizung der Schnitte durch 24 Stunden in etwa 0'5- bis einprocen- tiger Chromsäure oder gesättigter Chromalaunlösung , Färbung mit dem Dreifarbengemisch von Pianese und Differenzirung mit schwach saurem Alkohol. Ferner wurden verwendet FLEMMiNGSche und Alt- MANx'sche Flüssigkeit mit und ohne vorausgegangene Formoleinwirkung sowie Sublimatlösungeu, gesättigt in 0'75procentiger Kochsalzlösung. Wie alle anderen Beobachter machte auch Verf. die wenig erfreu- liche Erfahrung, dass keine dieser Methoden unbedingt empfohlen werden kann, und dass bei jeder derselben unter anscheinend gleichen Verhältnissen sehr verschiedene Resultate sich ergeben , und zwar nicht nur bei menschlichem , sondern auch bei ganz frischem thieri- schen Materiale. Ausser der schon oben erwähnten Färbung mit dem Dreifarbengemische von Pianese (Malachitgrün 0'5 ; Säurefuchsin 0"1 ; Martiusgelb 0*01 ; destillirtes Wasser 150; Alkohol, 96procentig, 50) kamen Hämatoxylin-Eosin und die HsiDENHAiN'sche Hämatoxylin- eisenmethode sowie die ALTMANN'sche Granulafärbung zur Verwendung, Bei der letzten Methode erhält man die bekannten Bilder im Epithel der gewundenen Harnkanälchen : Scharf begrenzte, reihenförmig auf- gestellte, seltener mehr gleichmässig vertheilte, scharf umschriebene. XX, 1. Referate. 73 rothe Granula eingebettet in eine gelblich gefärbte, scheinbar homogene Gnmdsubstanz. An den Formol-Chromsäure-Präparaten bei der Fär- bung nach PiANESE ergaben sich dieselben Resultate, doch waren sie weniger constant ; dagegen kam an gelungeneu Präparaten die sonstige Structur der Zellen und die der Kerne besser zum Ausdrucke. Bei stärkerer Difterenzirung mit Säurealkohol nehmen die Plasmosomen eine mehr hellrothe Farbe an 5 neben ihnen kommen dann intensiv roth gefärbte Granula zum Vorschein, manchmal vereinzelt, manchmal in grösserer Zahl und gruppenweiser Anordnung oder aber in mehr gleichmässiger Vertheilung über die Zelle. Beim Menschen erhält man an Formol-Chromsäure-PiANESE-Präparaten in den Epithelien der gewundenen Harnkanälchen reihenförmig , seltener netzförmig ange- ordnete blassrothe Plasmosomen, sowie intensiver gefärbte rothe Granulagruppen und -häufen. Gerade an menschlichen Nieren konnte Verf. sich wiederholt davon überzeugen, dass das Structurbild nicht nur je nach der angewandten Conservirungs- und Färbemethode, sondern auch nach Function und pathologischem Zustande ein sehr wechselvolles ist. Schiefferdeclier (Bonn). Pappenheim , A. , Weitere kritische Ausführungen zum gegenwärtigen Stande der Plasmazellenfrage. Dazu ein Anhang: die Histogenese des Tuber- kels betreffend (Virchow's Arch. Bd. CLXIX, H. 3, 1902, p. 372—428). Verf. bemerkt hinsichtlich der Technik der electiven Grün- Roth-Methode das Folgende. Er hatte seiner Zeit für Deckglasprä- parate das Gemisch von Methylgrün-Pyronin beziehungsweise Methyl- grün-Acridinroth besonders geeignet gefunden. Dasselbe scheint bis heute auch noch nicht übertroffen zu sein. Um die Analogie zwischen hämatogenen und histiogenen Lymphocyten ganz durchzuführen, hatte Verf. zur Benutzung dieser Färbung bei Schnittpräparaten die Re- sorcinbeize empfohlen. Rosin und Bibergeil haben dieses Gemisch neuerdings sogar für die postvitale (prämortale) Färbung unfixirter nekrobiotischer Zellen verwendet. Nach den Erfahrungen des Verf. erhält man nun für die vitale Färbung bessere Resultate, wenn man Methylgrün mit Neutralroth combinirt; sind doch die verschiedenen rothen basischen Farbstoffe hinsichtlich der Lymphocytenfärbungen im Principe gleichwerthig und nur graduell verschieden. Auch für Schnittpräparate dürfte es sich vielleicht empfehlen , das alkohol- uuechte Pyronin und Acridinroth durch die echteren Farbstoffe Fuchsin 74 Referate. XX, 1. oder Safranin zu ersetzen und vor der Färbung das eventuelle Cel- loidin durch Alkohol - Aether zu entfernen. Verf. bemerkt hierzu, dass es Unna inzwischen gelungen sei, die Methylgrün - Pyronin- Schuittmethode allen Anforderungen gerecht zu machen. Dort, wo es sich bei der Untersuchung blutbildender Organe, etwa des Knochen- markes, um eine Unterscheidung von Lymphocyten und Erythroblasten handelt, empfiehlt es sich, das xantophile Hämoglobin vielleicht noch durch einen besonderen gelben, basischen oder sauren Farbstoff kennt- lich zu machen , sowohl im Deckglas- als auch im Schuittpräparat. Ein triacides Gemisch von Methylgrün mit Pyronin und mit Orange Gr fand Verf. allerdings, wie er schon früher mitgetheilt hat, sehr w^enig geeignet. Besser war es , mit dem sauren Orange G vorzufärben und dann in üblicher Weise mit dem basischen Farbgeraisch nach- zufärben. Zur Zeit erscheint Verf. am vortheilhaftesten für diesen Zweck ein Gemisch dreier basischer Farbstoffe : Methylgrün, Pyronin, Vesuvin (beziehungsweise Chrysoidiu) oder Methylgrün , Fuchsin, Phosphin. Schiefferdecker (Bonn). Schlesinger, A., Ueber Plasmazellen und Lymphocyten (ViRCHOw's Arch. Bd. CLXIX, IT. 3, 1902, p. 428—44.3). Meistens wurde an Gefrierschnitten untersucht, nach ein- oder mehrtägiger Härtung in löprocentiger Formalinlösung und etwa halb- stündiger Auswässerung, zur Controle auch an Material, dass in Alkohol gehärtet war. Es Hessen sich die Zellen an Gefrierschnitteu genau so gut studiren wie bei der von Unna als specifisch ange- gebenen Alkoholhärtung. Die Alkoholpräparate wurden theils in Paraffin eingebettet, theils nach etwa einstündigem Einlegen in ein- procentige Formalinlösung ebenfalls mit dem Gefriermikrotom ge- schnitten. Auch hier war kein Unterschied zwischen beiden Methoden vorhanden. Gefärbt wurde nach der UNNA'schen Vorschrift: poly- chromes Methylenblau (GntiBLER) 10 Minuten , kurzes Abspülen in Wasser, Differenziren in Glycerin-Aethermischung, Auswässern, Alkohol, Xylol, Balsam. Zur Controlfärbung wurde eine 2*5procentige Carbol- Toluidinblaulösung angewendet. Färbung eine bis 24 Stunden je nach der Stärke der Lösung, Differenziren in TOprocentigem Alkohol, eventuell auch in Kreosot. Es entfärben sich die Präparate in Kreosot sehr schnell, so dass diese Ditferenzirung nur für starkgefärbte Prä- parate passt. Dann weiter Alkohol, Xylol, Balsam. Auch hier konnte ein Unterschied in keiner Hinsicht festgestellt werden , auch nicht bezüglich der Zellen vom UNNA'schen Typus (heller Kern, XX, 1. Referate. 75 dunkeles , feinkörniges Protoplasma). Die ÜNNA'sche Methode ist also, weder was Härtung noch was Färbung anlangt, eine specifische. Für den MARSCHALKo'schen Zelltypus ist das schon häufig betont worden. Verf. bemerkt hierbei, dass im März 1902 noch wieder von Unna angegeben worden sei, dass die geringsten Spuren eines gerbenden Mittels (wie z. B. Formalin) die Färbung illusorisch machen. Als Bedingung für eine gute Färbung fordert Unna weiter, dass die Mastzellen vollständig rotli gefärbt sind. Verf. hat indessen einen wesentlichen Unterschied in dem Aussehen der Plasraazellen zwischen den Präparaten mit mehr roth und den mit mehr violett gefärbten Mastzellen nicht erkennen können. Er ist der Meinung, dass es gar nicht immer möglich ist, alle Mastzellen intensiv metachromatisch roth zu färben, denn er findet in manchen Präparaten dicht neben einander roth und mehr violett gefärbte Mastzellen. Dass ein er- heblicher Einfluss des Formalins auf die Färbbarkeit der Zellen nicht vorhanden ist , geht aus den Untersuchungen des Verf. ebenfalls hervor. Sehr gute Bilder ergiebt eine Nachfärbung der Toluidin- blaupräparate mit Eosin. Man muss in diesem Falle ziemlich stark vorfärben, fast vollständig differenziren und dann die Präparate auf einige Secunden in eosinhaltigen Alkohol legen. Das schwach baso- phile Protoplasma der MARSCHALKo'schen Zellen ist dann schön roth gefärbt; je dichter aber das Protoplasma ist, je mehr sich die Zelle der feinkörnigen Form nähert, desto mehr überwiegt die Blaufärbung. Leider ist diese Färbung sehr wenig haltbar. Verf. hat auch mit der PAPPENHEiM'schen Pyronin-Methylgrün-Resorcin-Methode Versuche gemacht, aber keine guten Resultate erhalten. Vielleicht hat es daran gelegen , dass er hauptsächlich an Formalin - Gefrierschnitten arbeitete. Da für seine Zwecke die Unterscheidung des leukocytären und lylnphocytären Protoplasma , die wohl der Hauptvortheil dieser Methode sein soll , nicht besonders in Betracht kam , und da ferner die Kernstructur gerade mit der Toluidinblaufärbung ausserordentlich deutlich hervortritt, so nahm er von weiteren Versuchen Abstand. Die MARSCHALKo'schen Zellen sind auch mit gewöiinlicher Hämatoxylin- Eosinfärbung oft sehr deutlich zu erkennen , besouders wenn sie nicht zu dicht gedrängt beisammen liegen. In einem Präparate (Gumma des Gehirnes) ergab sogar die Hämatoxylin-Eosinfärbung ein besseres Resultat als die ÜNNA'sche Methode. Schiefferdecker {Bonn). 76 Referate. XX, 1. Schreiber, L., üeber ein bequemes Object zum Studium der Mastzellen [Klasmatocyten] (Münch. med. Wochenschr. Bd. XLIX, 1902, No. 50, p. 2075—2077). Verf. hatte zum Studium der Gestalt und des feineren Baues des Kernes die lebenswarmen Objecte (Mesenterium und Nervus ischiadicus des Frosches , Omentum verschiedener Säugethiere) mit den üblichen Kern-Fixirungsflüssigkeiten behandelt , von denen man hoffen durfte, dass sie ein klares Bild der Kernform und des Kern- baues geben würden , ohne die specifischen Mastzellengranula zu schädigen. Es zeigte sich nun, dass bei Präparaten, die mit dem Flemming' sehen Chrom-Osmium-Essigsäure-Gemisch behandelt waren, nach Färbung mit basischen Anilinfarben (polychromes Methylenblau, Methylviolett 5 B, Dahlia, Vesuvin, Safranin) die Mastzellen gar nicht oder nur mit Mühe zu erkennen waren, da die für sie charakteri- stischen basophilen Granulationen entweder ganz verschwunden oder nur vereinzelt und sehr unvollkommen gefärbt waren. Verf. ver- suchte nun herauszubekommen , welcher Bestandtheil des Gemisches diese Veränderung hervorruft und fand , dass es die Osmiumsäure war. Schon ein Tropfen einer 0"25procentigen Osmiumsäure bringt in wenigen Minuten fast ausnahmslos die Granula zur Quellung und Auflösung. Je stärker die Osmiumsäure , desto schneller geht die Lösung von statten. Die specifische Färbbarkeit, die Metachromasie, der gelösten Granula erleidet bei diesem Processe nur wenig Ein- busse. Die Zellen werden dann von einem gefärbten Hofe umgeben. ScMefferdecker {Bomi). Jost, J., Beitrag zur Lehre von der Blutentwicklung des embryonalen Rindes und Schafes (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXI, 1903, p. 667—696 m. 1 Tfl.). Um die Anordnung der Blutkörperchen in situ zu studiren, wurden Paraffinschnitte durch möglichst junge Schafembryonen an- gefertigt. Ferner wurden aus dem Herzen, der Leber, der Milz und dem Knochenmark (wenn die beiden letzteren schon gebildet waren) einer grossen Anzahl verschieden alter Embryonen Saug-, Ausstrich- oder Quetschpräparate gemacht und nach verschiedenen Methoden fixirt und gefärbt. Fixirt wurde auf der Ehrlich 'sehen Kupferplatte bei 135^ (etwa eine halbe Stunde) in absolutem Alkohol, in Alkohol- äther und in Formalindämpfen. Zur Färbung der in der Hitze fixirten Präparate diente das EHRLicn'sche Triacidgemisch , für die auf andere Weise fixirten Präparate Eosin - Methylenblau , Eosin- XX, 1. Referate. 77 Hämatoxyliu und Rubeosin-Methylenblaii. Die Fixirung in Formalin- dämpfen wurde einfach in der Weise ausgeführt, dass die Deck- gläschen etwa 10 Minuten lang in ein zugedecktes Petrischälchen gelegt wurden , in welchem sich ein mit Formol getränkter Watte- bausch befand. E. Schoebel (Neapel). VoornTeld, H. J. A. van, Das Blut im Hochgebirge (Pflü- ger's Arch. Bd. XCII, H. 1 u. 2, 1902, p. 1—60). Für die erythrocytometrischen Bestimmungen wurde ausschliess- lich die von Zeiss angefertigte Schlitzkammer nach Meissen ver- wendet; als Deckglas diente dabei das 0'18 mm dicke Gläschen mit aufgekittetem Glasringe gleichfalls von Zeiss und speciell für diese Untersuchungen angefertigt. Dieses Deckgläschen lässt auch vorzüglich die NEWxoN'schen Farbenringe hervorrufen und erlaubt die Untersuchung mit Zeiss Obj. E und Ocul. 2. Die Benutzung des grossen beweglichen Kreuztisches , welcher zu Stativ I a gehört , er- laubt, die Zählung mit grösserer Sicherheit auszuführen. Das Blut wurde mit (1 : 100) HAYEM'scher Lösung verdünnt. Es wurden wenig- stens immer 80 Quadrate ausgezählt. Die Zählung von 80 Quadraten hat den praktischen Werth, dass man die Summe der Erythrocyten nur durch 2 zu dividiren und die nöthige Zahl Nullen dahinter zu stellen hat, um die Schlussberechnung auszuführen. Der Hämoglobin- gehalt wurde nach Gowers-Sahli bestimmt; das specifische Gewicht nach Hamimerschlag mit Chloroform-Benzol, wofür Verf. ziemlich viel Flüssigkeit (200 bis 250 cc in Gefässen von 15 bis 18 cm Höhe und 4 cm inneren Durchmessers) verwendete. Das Aräometer war auf 15^ C. geaicht. Schiefferdecker [Bonn). Braddon, W. L., Handy method of preparing slides and slips for taking blood films (Journ. Tropical Med. vol. HI, 1900, p. 110; vgl. Journ. R. Mikrosc. Soc. 1902, pt. 1, p. 108—109). 1) Ein Deckgläschen wird so auf den Objectträger gelegt, dass eine seiner Kanten genau mit der des Objectträgers zusammenfällt, dann umrändert man das Deckglas mit Vaseline (für kurze Zeit) oder mit weissem Cement (zur Aufbewahrung) mit Ausnahme jenes Randes , der mit dem Objectträgerrande zusammenfällt und eines kleinen Theiles des gegenüber liegenden Randes. 2) Man legt 2 Deck- gläschen , am besten von quadratischer Form , genau auf einander und verstreicht die Rinne an ihren Rändern in derselben Weise wie 78 Referate. XX, 1. oben mit Vaseline oder Cement. Bei der Benutzung bringt man den freigebliebenen Rand in Berührung mit dem Blutstropfen und ver- schmiert, nachdem der vorhandene Raum ausgefüllt worden ist , die noch offen gebliebenen Randtheile. Mau färbt dabei am besten so, dass man einen Tropfen der Farbflüssigkeit auf die Haut bringt und dann durch den Tropfen hindurch ansticht. Man erhält auf diese Weise eine äusserst dünne und gleichmässige Schicht; die Methode erfordert keine besondere Uebung oder Geschicklichkeit ; endlich kann man eine grosse Menge solcher Objectträger oder Deckgläser vor- bereiten. ScMefferdecker {Bomi). Breuer , R. , Zur Technik der Leukocytenzählung (Berl. klin. Wocheuschr. 1902, No. 41). Verf. hat von Zeiss eine Zählkammer herstellen lassen, die eine Fläche von 9 qmm umfasst. Die einzelnen Quadrate werden wieder durch horizontale Linien in je 4 Rechtecke zerlegt. Diese Rechtecke dienen bei der Zählung als Einheit. Unter normalen Verhältnissen findet man in einem Rechteck 15 bis 25 Leukocyten. Wenn nöthig, kann man aber auch 40 bei unverdünntem Blute noch gut zählen. Soll die Kammer auch zur Zählung von rothen Blutkörperchen ver- wendet werden, so lässt man das mittelste Quadrat in üblicher Weise eintheilen. Schiefferdecker (Bo?in). Lewis , T. , The structure and functious of the hsemo- lymph glands and spieen (Internat. Mouatsschr. f. Anat. u. Physiol. Bd. XX, H. 1 — 3, 1902, p. 1—56 w. 2 pltes,). Verf. hat untersucht frische Präparate (auch Deckglaspräparate), Frostschnitte , Zerzupfungspräparate aus verschiedenen Theilen der Drüsen, nach Färbung mit verschiedenen Farbstoffen. Fixirt wurde in Sublimat, Alkohol von verschiedener Stärke, MüLLER'scher Flüssig- keit, ZENKER'scher Flüssigkeit, Bichromat- Essigsäure -Lösung, Flem- MiNG'scher Flüssigkeit. Eingebettet wurde in Paraffin nach Xylol oder Cedernholzöl. Sublimatlösung und Bichromat -Essigsäurelösung ergaben recht gute Resultate , zum Studium der Zellstructur erwies sich aber die FLEMMiNo'sche Lösung als die beste. Gefärbt wurde mit Hämalaun, Carmalaun, Eosin, Pikrinsäure, Boraxcarmin, Methyl- blau, Methylenblau, Toluidinblau, Säurefuchsin, Methylorange, Safranin, Magdalaroth und anderen Farbstoffen. Unter Umständen wurde auch Silberimprägnation angewendet, und das HEiDENHAiN'sche Eisen-Alaun- XX, 1. Referate. 79 Hämatoxylin mit Safranin in Verbindung mit Licbtgrün und Gentiana- violett wurde zur Deutlicbraachung von Mitosen und anderen Zell- details verwandt. Hämalaun und Eosin wurden fast bei allen Drüsen benutzt, da sie das adenoide Gewebe und die Blutsinusse sebr deut- lich hervortreten lassen. Auch zum Studium der Phagocytose ist diese Färbung besonders günstig. Safranin in Verbindung mit einem passenden PlasmafarbstotFe ergiebt schöne Bilder bei Flemming- Prä- paraten. Die Anilinblaufärbung war zur Darstellung des Reticulums günstig. Sckiefferdecker {Bonn). Ciaccio, C, Comunicazione sopra i canaliculi di secre- zione nelle capsule soprarenali [Mittheilung über die See retionskanäl eben der Nebennieren] (Anat. Auz. Bd. XXII, 1903, No. 23, p. 493—497 m. 3 Figg.). Verf. hat hauptsächlich die Methode von Golgi benutzt, welche darin besteht, dass die ganz frischen Stücke 15 bis 20 Tage in MtJLLER'scher Flüssigkeit fixirt und dann nach Abtrocknen mit Fliess- papier für 24 Stunden in eine einprocentige Lösung von Silbernitrat übertragen werden. Die MtJLLER'sche Flüssigkeit fixirt nun die Stücke nicht vollkommen und lässt die intracellulären Secretionskanälchen nicht hervortreten. Der schnellen Methode konnte sich Verf. aber wegen der grossen Fettmenge in den Zellen der Nebenniere nicht bedienen, da diese die Kauälchen verdeckt haben würde. Verf. hat daher mit Vortheil die folgende Mischung benutzt: Formol 15 cc, doppeltchromsaures Kalium 5 g , destillirtes Wasser 100 cc. Um gute Präparate zu bekommen , muss man mit einem guten Rasir- messer die Objecte gleich nach ihrer Herausnahme aus dem Silber- nitrat schneiden. Um feinere Schnitte zu erhalten , hat Verf. auch Paraffineinbettung benutzt, indem er die Stücke nach kurzem Aufent- halt in Alkohol bei 40^ in Paraffin einbettete. Die mit Säure- fuchsin gefärbten Schnitte wurden mit Nelkenöl aufgehellt ; einige Schnitte wurden auch nach Zimmermann mit Chlorsilber behandelt. Die Resultate wurden controlirt durch Präparate, die in gewöhnlicher Weise gehärtet und gefärbt waren. Schiefferdecker {Bonn). Beguin, F., Contribution ä l'etude histologique du tube digestif des Reptile s. (Rev. Suisse de Zool. t. X, 1902, p. 251—397 av. 6 plches.). Von Ophidiern kam Tropidonotus natrix, Tropidonotus tesselatus 80 Referate. XX, 1. und Vipera aspis zur Untersuchung, von Sauriern: Anguis fragilis, Chamaeleon vulgaris, Lacerta viridis , Lacerta muralis und Lacerta ocellata , und von Cheloniern Testudo graeca und Emys europaea. Da die Darmscbleimbaut mit dem Tode sehr schnell Veränderungen eingeht, muss man mit dem Fixiren des Materials nach Möglichkeit schnell verfahren. Die am meisten verwandten Fixirungsflüssigkeiten waren Sublimat-Eisessig (concentrirte wässerige Lösung von Subli- mat -f~ 10 Procent Eisessig) mit einer Einwirkungszeit von ungefähr einer halben Stunde, dann Pikriusalpetersäure (etwa zwei Stunden). Einige Male wurde auch die ZENKER'scbe Flüssigkeit, bei einer Ein- wirkung von mehreren Stunden benutzt. Für Zupfpräparate wurde das Schleimhautepithel mit Osmiumsäure fixirt. Zur Stückfärbung diente das P. MAVER'sche Hämalaun und alkoholisches Boraxcarmin, für Schuittfärbung Hämatoxylin, und für die für verschiedene Zwecke äusserst werthvoUe Nachfärbung Eosin, Safranin, Bismarckbraun. Das Eosin ist vor allem zur Darstellung der Zellgrenzen zu em- pfehlen, da es dem Plasma eine ausgesprochene röthliche Farbe giebt. Safranin und Bismarckbraun haben den Vortheil die gering- sten Spuren von Schleim deutlich zu färben. Ausser den Schnitt- präparaten wurden noch Isolationspräparate angefertigt und zwar nach Fixation der Gewebsstückchen in Osmiumsäure und Maceration in Drittelalkohol. E. Schoebel {Neapel). Schaefer, F., Ueber die Schenkeldrüsen der Eidechsen (Arch. f. Naturgesch. Jahrg. 48, Bd. I, p. 27 — 64 m. 2 Tfln.). Den durch Chloroform getödteten Eidechsen wurde ein zu- sammenhängendes Hautstück an der medialen Fläche des Oberschen- kels von der Kloake bis zum Kniegelenk abgetragen und in einem Schälchen, in dem es mit der FixirungsÜüssigkeit übergössen werden sollte , aufgespannt. Zur Fixirung kamen folgende Flüssigkeiten in Anwendung: concentrirte Sublimatlösung, Sublimatpikrinsäure (Subli- mat, gesättigte wässerige Lösung 1 Th. , destillirtes Wasser 2 Th., Pikrinsäure, gesättigte wässerige Lösung 1 Th.), Chromosmiumessig- säure (nach Fol) und MüLLEß'sche Flüssigkeit. Nach gewöhnlicher Alkohol -Nachbehandlung wurde durch Terpentinöl oder Xylol in Paraffin eingebettet. Concentrirte Sublimatlösung ist am wenigsten zu empfehlen, da sie zum Theil Schrumpfungen hervorbringt, oder doch zum wenigsten das histologische Detail nicht so deutlich hervor- hebt wie die übrigen Fixirungsflüssigkeiten. Die Färbung wurde XX, 1. Referate. 81 fast durchweg an Schnitten vorgenommen. Zur blossen Kernfärbung diente Boraxcarmin, für weiteres Detailstudium Boraxcarmin combi- nirt mit der van GiESON'schen Färbung (modificirt von Blochmann) und Tetrabromfluorescein. Hierbei ersclieinen die Zellkerne röthlich, Bindegewebe blau, Hornsubstanz citronengelb. Zum Nachweis der Eleidinkörner diente Methyleosin in einprocentiger wässeriger Lösung. Die charakteristische leuchtende Purpurfarbe nehmen die Körnchen aber nur an , wenn das Material in MüLLEß'scher Flüssigkeit fixirt ist. In anders fixirten Präparaten erscheinen sie entweder gar nicht oder nur ganz blass rosa tingirt. Zum Studium des Verhornungs- processes wurde auch noch die GRAM'sche Methode benutzt. E. Schoebel {Neapel). Zürn, J., Vergleichend histologische Untersuchungen über die Retina und die Area centralis retinae der Haussäugethi er e (Arch. f. Anat. u. Physiol., Anat. Abth. 1902, Suppl.-Bd., p. 99 — 146 m. 1 Tfl.). Die zur Untersuchung gelangenden Augen wurden spätestens eine halbe bis eine Stunde nach dem Tode des Thieres unter Ver- meidung jedes erheblichen Druckes auf den Bulbus entnommen. Nach Entfernung der Augenmuskeln und des intraorbitalen Gewebes wurde bei kleineren Thieren der Augapfel durch einen Sklera und Chorioidea trennenden Meridionalschnitt im Aequator eröffnet, bei den übrigen wurde vorsichtig die vordere Augenhälfte abgeschnitten, der Glaskörper durch leichten gleichmässigen Druck von der Mitte aus entfernt , die zurückbleibende Halbkugel rasch mit der Fixirungs- flüssigkeit angefüllt und vorsichtig in das die gleiche Fixirungsflüssig- keit enthaltende Gefäss getaucht. Beim Pferde , dessen Glaskörper viel flüssiger ist als der der Wiederkäuer, löst sich beim Ausgiessen des Glaskörpers die Netzhaut fast stets an einer Stelle vom Unter- grunde los. Um dieses zu vermeiden, setzt Verf. einen kleinen Trichter auf die Papille und verdrängt den Glaskörper durch gleich- massig rasches Zugiessen der Fixirungsflüssigkeit. Zur Fixirung wurden verwendet: 1) MtJLLER'sche Flüssigkeit in steigender Con- centration von 2*5 bis 4 Procent Kaliumbichromat (Fixirungsdauer einige Wochen). Nur für specielle Zwecke noch für die Retina zu empfehlen : völlig faltenlose Netzhäute wurden nie erhalten. 2) For- malin (4 : 100 bis 10 : 40 physiologischer Kochsalzlösung: Fixirung innerhalb 24 Stunden). Verdünntere Mischungen verhindern die oft erhebliche Quelhmg der Netzhautschichten nicht. Stärkere erhalten Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 1. 6 82 Referate. XX, 1. zwar die Form im ganzen gut, schädigen aber die feinere Striictur, speciell die der Zellschichten. 3) Formalin mit MüLLER'scher Flüssig- keit. Im Verhältniss von 1 : 10 (Orth) für die Retina nicht brauch- bar , aber aucli im V^erhältniss von 1 : 4 (Kopsch) nicht günstig. 4) Salpetersäure (3"5procentig; 5 bis 10 Stunden). Bei Hund und Katze bisweilen gute Resultate, bei grösseren Hausthieren Trennung der Netzhaut zwischen Neuroepithel- und Cerebralschicht. Auch bei noch so sorgfältiger Nachhärtung in Alkohol leicht Faltenbildung. 5) Sublimat (2 bis 5 Stunden), a. Sublimat-Pikrinsäure (vom Rath) lieferte bei Hund und Katze meist eine der Aderhaut glatt anliegende, völlig faltenlose Netzhaut, verhinderte aber eine gute Eisenhämat- oxylinfärbung (Heidenhain) , an der dem Verf. wegen der scharfen Darstellung der Zapfen viel lag. b. Mit Sublimat heiss gesättigte, O'Gprocentige Kochsalzlösung mit ein bis 1*5 Procent Eisessig. Durch diese am häufigsten verwandte Lösung wurden meist falteulose Netz- häute erhalten. Man muss, da Sublimat nicht rasch tief eindringt, bei allen Thiereu die vordere Augenhälfte und den Glaskörper ent- fernen. 6) Osmiumsäure (24 Stunden). Glatte Netzhäute wurden nur mit der starken, 2procentigen FLEMMiNG'schen Lösung erhalten. Da diese aber einmal zu kostbar für die Augen grösserer Thiere ist und die Zellstructuren angreift und da endlich die Präparate mit dem ebenso gut fixirenden Sublimat sich viel besser färbten , so wurde die Osmiumsäure nur bei kleinen Hausthieren und nur für besondere Zwecke (zum Studium der amakrinen Zellen , der Radiär- faserkegel etc.) verwandt. — Nachhärtung. Nach Osmium- oder Chromsäure kamen die Bulbi auf 24 Stunden in messendes Wasser, die übrigen in 35procentigen Alkohol, der täglich durch einen um 5 Procent höheren ersetzt wurde. Bei dieser Alkoholbehandlung ist Zusatz von .Jodtinctur nach Sublimatfixirung vollkommen überflüssig. In Alkohol von 45 bis 50 Procent trennte Verf. den unteren äusseren Quadranten einschliesslich Papille vom übrigen Augenhintergrunde ab , durchschnitt mit einem schmalen Messer den Sehnerv zwischen Ader- und Netzhaut und schnitt aus der Netzhaut einen horizontalen Streifen bis nahe an die Ora serrata aus, wobei er sich bei Pferd, Rind und Schwein als Richtungslinie der schon makroskopisch sicht- baren, streifenförmigen Area von Chievitz bediente. — Einbettung. Die präparirten Netzhautsegmente kamen allmählich in absoluten Alkohol, dann in Alkohol-Xylol oder besser in Alkohol-Cedernholzöl. Einbettung in Paraffin von 52 bis 55". — Färbung. Die Schnitte von 3, 5, 7 und 10 f.i wurden gefärbt mit Alauncarmin, Hämatoxylin- XX, 1. Referate. 83 Eosin, Thionin - Erythrosln und hauptsächlich mit Eisenhämatoxylin nach Heidenhain. Dieses letztere ergiebt gute Uebersichtsbilder, lässt die Structur der Zell- und Faserschichten wenigstens ebenso gut erkennen wie die anderen Färbemethoden, hat aber den Vorzug, dass sich die Stäbchen und Zapfen und deren Innen- und Aussen- glieder gut von einander abheben. VjS gelang dem Verf. nicht, brauchbare Serien durch die Area nach Golgi oder Cajal imprägnirter oder nach der Methylenblaumethode von Ehrlich- Bethe, gefärbter Netzhäute anzufertigen. Schiefferdecker [Bonn). Grönberg, G., Die Ontogenese eines niederen Sau ger- geh irns nach Untersuchungen an Erinaceus europaeus (Zool. Jahrb., Abth. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XV, 1901, p. 261—384 m. 58 Figg. u. 6 Tfln.). Die Embryonen wurden rasch aus dem Uterus des getödteten Weibchens herausgenommen und im allgemeinen in ZENKER'scher Flüssigkeit fixirt; für das jüngste Stadium wurde auch Sublimat be- nutzt. Nach der üblichen Weiterbehandlung wurde der abgeschnit- tene Kopf in toto in Alauncochenille gefärbt, in Paraffin eingebettet und in Schnittserien zerlegt , die auf dem Objectträger noch mit Bleu de Lyon nachgefärbt wurden. Auf diese Weise erhält man eine instructive Doppelfärbung: die gangliösen kernreichen Parthien werden roth, die Nervenfaserbahnen dagegen blau, Blutkörperchen enthaltende Gefässe grün. Die Wachsreconstructionen wurden nach der BoRN'schen Plattenmodellirmethode ausgeführt. E. Schoehel (Neapel). Rubaschkin, W., Zur Morphologie des Gehirns der Am- " phibien (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXII, 1903, p. 207 —243 m. 2 Tfln.). Als Untersuchsmethode diente die Imprägnation mit Silber- chromat. Nach Injection des Thieres mit einer öprocentigen Lösung von doppeltchromsaurem Kali, oder besser einer gesättigten Lösung vom Chromkalium oder Chromrubidium wurde , nachdem ungefähr 15 Minuten verflossen waren, das centrale Nervensystem heraus- genommen und in kleinen Stücken in eine frisch bereitete Mischung von 100 Th. öprocentiger Lösung von doppeltchromsaurem Kali, 15 Th. einprocentiger Osmiumsäure und 5 Th. des käuflichen For- raols für 12 bis 18 Stunden eingelegt. Ein Zusatz von ein Procent Eisessig zu diesem Gemisch wurde häufiger mit Vortheil angewandt, 6* 84 Referate. XX, 1. indem die Präparate dann meist vollständig frei von Niederschlägen sind. Die Silberlösung wurde bis zu 2 Procent stark verwandt. Solch starke Lösungen verdienen nach Ansicht des Verf. den Vorzug gegenüber schwächeren, da bei den letzteren die aus den Gewebe- stücken dilfundirende Chromsalzlösung fast alles Silber niederschlägt, und der Rest zu einer genügenden Imprägnation nicht ausreicht. Zum Einschluss der in gewöhnlicher Weise hergestellten Schnitte ist am meisten an der Luft bis zur Syrupconsistenz eingedicktes Ter- pentinöl zu empfehlen. E. Schoebel (Neapel). Dexter , F. , The development of the paraphysis in the common fowl (Amer. Journ. of Anat. vol. II, 1902, no. 1, p. 13—24 w. 9 figg.). Es wurden stets Serienschnitte angefertigt mit einer Doppel- färbung von Cochenille und Orange Gr. Ein Theil der Embryonen war in der Flüssigkeit von Tellyesnicky gehärtet, welche bessere Resultate als ZENKER'sche Flüssigkeit ergab und den grossen Vor- theil besitzt, dass sie kein Sublimat enthält. Gehirne von erwach- senen Hühnern verblieben etwa .36 Stunden in der Flüssigkeit und etwa ebenso lauge in fliessendem Wasser, darauf steigender Alkohol. Schieff erdecke r (Bonn). Kohn, A., Die Paraganglien (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXII, 1903, p. 263—365 m. 9 Figg. u. 4 Tfln.). Verf. hatte schon bei früheren Untersuchungen Gelegenheit zu constatiren , dass Kaliumbichromatgemische am geeignetsten für die Fixirung des chromaftinen Gewebes sind. Bei Behandlung embryo- nalen Materials wurde dieser Erfahrung nach Möglichkeit Rechnung getragen. Am deutlichsten treten , und zwar von ihrer ersten Ent- stehung an, die chromaffinen Zellen nach Fixirung in Kaliumbichromat- Formolgemischen hervor (90 Th. einer 3*5procentigen wässerigen Kaliumbichromatlösung und 10 Th. des käuflichen Formols). Um bei kostbarem Material (z. B. menschlichen Embryonen) eine bessere Gesammtfixirung neben hinreichender Unterscheidbarkeit der chrom- affinen Zellen zu erzielen , wurde mit Vortheil eine Mischung aus 3"5 g Kaliurabichromat , 1 g Sublimat, 100 cc Wasser und 5 cc Eisessig angewandt. Auch die ZENKER'sche Flüssigkeit oder noch besser eine Mischung aus gleichen Theilen ZENKER'scher Flüssigkeit (ohne Glaubersalz) und einer 3*5procentigen Kaliumbichromatlösung gaben recht brauchbare Resultate. Wo es sich nur um die Auf- XX, 1. Referate. 85 findimg von chromaffinen Zellen bandelt, ist die reine 3"5procentige Kaliumbichromatlösung am Platze. Um über die Verbreitung des chromaffinen Gewebes in vorgerückten Entwickhingsstadien und nach der Geburt leicht und rasch einen üeberblick zu gewinnen, empfiehlt es sich, den Retroperitonealraum des eben getödteten und möglichst ausgebluteten Thieres durch Entfernung des Darmkanales sammt Anhangsorganen frei zu legen, wobei man aber die Urogenitalorgane an Ort und Stelle belässt, und dann den ganzen Retroperitonealraum mit einem Wattebausch , der mit 3"5procentiger Kaliumbichromat- lösung getränkt ist, zu bedecken. Schon vor Ablauf einer Stunde tritt die Reaction ein; am besten wartet man aber 6 bis 12 Stunden, wobei nur dafür zu sorgen ist, dass der Bausch feucht bleibt. Wäh- rend man bei Thieren (Kaninchen, Katze) den Wattebausch zwar ohne Nutzen, aber auch ohne Schaden mehrere Tage liegen lassen kann, erhält man bei neugeborenen Kindern die besten Resultate nach 10- bis ISstündiger Einwirkung; dauert sie über 24 Stunden, so geht die dunkle Färbung der Paraganglien wieder zurück. Nach Entfernung des Wattebausches übersieht man — namentlich bei fett- armen Thieren — die Anordnung der chromaffinen Körper vermöge ihrer Braunfärbung in genügender Klarheit. Deutlicher wird aber das Bild, wenn man mit Wasser abspült und durch ein Paar Tropfen Glycerin aufhellt. So gewonnene Präparate kann man im ganzen in Glycerin oder Glyceringemischen aufbewahren, in denen sie sich lange unverändert erhalten, oder man kann sie sehr gut zu Detail- untersuchungen gebrauchen, zupfen, schneiden, nachfärben etc. Zu erwähnen bleibt noch, dass man sich vor Verwechselungen mit blut- reichen Lymphknoten, die durch Chromatlösungen auch braun gefärbt werden,, hüten muss. E. Schoebel {Neapel). Suchanoff, S. , Das endocelluläre Netz Golgi's in den Nerven dementen der spinalen Ganglien (Ges. d. Neuropathol. u. Irrenärzte zu Moskau, Sitz. v. 12. Oct. 1901; vgl. Neurol. Centralbl. Bd. XXI, 1902, No. 15, p. 729—730). Das von Golgi mit seiner Chromsilbermethode in den Nerven- elementen von Säugethieren entdeckte intracelluläre Netz kann nach einer verbesserten Methode des Verf. in folgender Weise dargestellt werden. Man behandelt frische Präparate nach einander mit drei Flüssigkeiten. Die erste enthält 30 Tb. O'lprocentige wässerige Lösung von Kaliumchlorplatinat , 30 Th. öprocentige Lösung von 86 Referate. XX, 1. doppeltehromsaiirem Kalium und 15 bis 20 Tb. einprocentige Osmium- säurelösung. Die zweite Lösung bestebt aus 3 Tb. öprocentige Lösung von doppeltcbromsaurem Kalium und 1 Tb. öprocentige Lö- sung von scbwefelsaurem Kupfer oder 1 Tb. öprocentige Lösung von essigsaurem Kupfer (im 2. Falle wird die 2. Lösung filtrirt). Die dritte Flüssigkeit ist eine einprocentige Lösung von salpeter- saurem Silber. Die erste ist aueb als VEUATTi'scbe Flüssigkeit be- kannt. Um die endocellulären Netze in den spinalen Ganglienzellen bei dem Kanineben darzustellen , wird dem durcb Cbloroform ge- tödteten Tbiere der Rückenmarkskanal eröflfnet ; es werden die spi- nalen Ganglien mögliebst scbnell berausgenommen und in die erste Flüssigkeit gebracbt. Die von jungen Kanineben für wenigstens 5, gewöbnlicb aber 8 bis 10 bis 12 Tage , die von alten Kauincben weit länger, bis zu 35 Tagen. In der zweiten Flüssigkeit bleiben die Präparate nur den 5. bis 10. Tbeil der Zeit, die sie in der ersten verweilt haben. (So bei 5 bis 8 Tagen in der ersten, 15 bis 20 Stunden, einen Tag oder etwas mebr in der zweiten; bei 30 bis 35 Tagen in der ersten, 2 bis 3 bis 3^/2 Tage in der zweiten.) In die dritte Flüssigkeit kommen die Ganglien für 20 bis 24 Stun- den oder etwas länger. Man muss darauf acbten, dass die Ganglien von alten Tbieren au den Enden angescbnitten, und dass die Präpa- rate nicbt zu lange der Wirkung der Luft ausgesetzt werden. Schiefferdecker {Bonn). Hardesty, J. , Tbe neuroglia of tbe spinal cord oftbe elephant, witb some preliminary observations upon tbe development of neuroglia fibers (Amer. Journ. of Anat. vol. II, 1902, uo. 1, p. 81 — 103 w. 4 figg.). Das Centralnervensystem des Elefanten war in Formol gebartet. So konnten bequem die beiden besten Färbungsmetboden für Neu- roglia, die von Weigert und Benda, angewendet werden. Paraffin- scbnitte waren besser als Celloidinscbnitte. Das Celloi'din wird etwas mitgefärbt und das Bild dadurcb weniger klar. Die WEiGERT'scbe Metbode ist allerdings ursprünglich eine Celloidinmetbode, aucb passt sie mebr für den Menseben, für den sie zunächst bestimmt war. Es wurde daher die Modification von Aguerre^ angewendet und die ^) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVIII, 1901, p. 355—356. XX, 1. Referate. 87 BENDA'sche Methode iu der Art, wie sie Huber ^ verwendet hat. Die letztere Methode ergab die besseren Resultate sowohl für den Elefanten wie auch für andere Thiere , die zum Vergleiche unter- sucht wurden. Mit dieser letzteren ist es auch möglich , dünnere Schnitte zu erhalten (am besten von 5 bis 8 ^a Dicke). Die Methode von Benda-Huber ergab sehr scharfe Bilder; die Neurogliafasern er- schienen tiefblau auf einem grünlich - gelblichen Untergrund. Das faserige Bindegewebe , die Pia mater , ihre Fortsetzungen in das Rückenmark und die Wandungen der Blutgefässe waren hell braun- roth. Das Endoplasma der Neurogliazellen (wenn vorhanden) er- scheint braunroth mit scharfer Körnung, die Körper der Nervenzellen und das Chromatiu ihrer Kerne sind stumpf graublau, die Achsencylin- der hell braunroth, mitunter mit einer Nuance von blau, die Contur der Kerne der Neurogliazellen und ihr Chromatin schwarzblau. Die rothen Blutkörperchen werden gi-ünblau , in Schnitten , welche lange differenzirt worden sind , hell grünlich roth oder farblos. Von den weissen Blutkörperchen färben sich die eosinophilen und polynucleären nur undeutlich oder gar nicht, während die kleinen Lymphocyten einen tiefblauen Kern in einem körnigen, gelbgrünlichen Cytoplasma zeigen. Das eigentliche Myelin der Markscheiden färbt sich nicht, aber das allgemeine Stützgerüst der Scheiden zeigt eine hellgelb- grünliche Farbe wie die Bindegewebsfibrillen. Zur Controle wurden mit der BENDA'schen Methode auch Formolpräparate von Lunge, Speicheldrüse , Milz und Haut (von Mensch und Hund) untersucht, doch fanden sich nirgends blaue Fasern, dagegen färbte sich das Bindegewebe und das elastische Gewebe ebenso wie die Blutgefäss- wandungen und die Pia mater des Rückenmarkes. Schiefferdecker {Bonn). Chilesotti, E. , Eine Carminfärbung der Achsencylin- der, welche bei jeder Behandlungsmethode gelingt [Uran carminfärbung nach Schmaus mo- dificirt] (Centralbl. f. allgem, Pathol. u. pathol. Anat. 1902, p. 193). '^ Man verreibt 1 g carminsaures Natrium (GrIibler) mit 0'5 g ürannitrat, kocht das Gemisch mit 100 cc Wasser eine halbe Stunde lang, filtrirt und setzt der Lösung vor dem Gebrauche ein wenig 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XLX, 1902, p. 378. 2) Vgl. auch diese Zeitschr. Bd. XIX, 1902, p. 161. 88 Referate. XX, 1. von einprocentigem salzsaiirem Alkohol zu (2 Tropfen auf ein cc). Hierin färben sich Schnitte aus MüLLER'scher Flüssigkeit in 5 bis 10 Minuten, aus Formol (Gefrier-, Paraffin- und Celloidinschnitte) in 15 bis 20 Minuten, aus der Neurogliabeize von Weigert in 30 bis 60 Minuten , nach Marchi behandelte Schnitte in 2 bis 4 Stunden. Dann Ausspülen in Wasser, Alkohol, Carbolxylol. Sind die Schnitte überfärbt, oder hat sich ausnahmsweise das Celloi'din mitgefärbt, so taucht man die Schnitte in 0'5- bis einprocentigen salzsauren Alkohol. Schiefferdecker (Bonn). C Mikroorganisinen» Hesse , Zur quantitativen Bestimmung der Wasser- keime (Centralbl. f. Bacteriol. Abth. 1, Orig. Bd. XXXII, 1902, No. 7, p. 553). Im Anschluss au das gemeinschaftlich mit Niedner vom Verf. 1898 verötFentlichte Verfahren zur bacteriologischen Untersuchung des Wassers. — Nähr st off-HEv den -Agar, ^ dessen Vorzüge noch nicht allgemein anerkannt sind, bringt Verf. zwei Tabellen aus einer erst vor kurzem auch in deutscher Sprache erschienenen Arbeit der Bacteriologen der Experiment Station in Lawrence Mass., Gage und seines Mitarbeiters Phelps." Aus diesen Tabellen — procen- tuelle Keimzahlen auf verschiedenen Nährböden darstellend — gelit die bedeutende üeberlegenheit des Hesse - NiEONER'schen Nährstoff- HEYDEN-Agars einer grösseren Anzahl anderer Nährböden gegenüber hervor. [Ueber die eigentliche Originalarbeit wird im nächsten Heft dieser Zeitschrift referirt werden. Ref.] W. Hoffmann {Berliti). Smith, W. H., A method of staining Sputum for bacte- riological examination (Boston Med. a. Surg. Journ. 1902, no. 25, p. 659—669). 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XV, 1898, p. 503. -) Gage a. Phleps , Studies of media for the quantitative estimation of bacteria in water and sewage. (Verhandlungen der 29. im September 1901 zu Buffalo abgehaltenen Jahresversammlung der American PubUc Health Association.) XX, 1. Referate. 89 Verf. hat während des Zeitraums von drei Jahren eine sehr grosse Anzahl von Auswurf bei Bronchialkatarrhen und Lungen- entzündungen nach seiner gleich zu beschreibenden Methode unter- sucht und besonders auf die im Auswurf vorhandenen Bacterien Rücksicht genommen. Die Sputa durften vor der Untersuchung weder mit Karbolsäure noch mit Sublimat versetzt gewesen sein. Die Färbung der auf die übliche Weise fixirten Deckglaspräparate nahm er folgenderraaassen vor : Als Lösungen benutzte er Anilinöl- gentianaviolett, Jodjodkaliumlösuug (Jod 1 ; Jodkali 2 ; Wasser, destil- lirt, 300), gesättigte wässerige Eosinlösung, Löffler's alkalisches Methylenblau, ein Gemisch von Alkohol (95procentig) , Aether 4 : 6, 95procentigen Alkohol, Xylol. — Das fixirte Präparat wurde mit Anilinölgentianaviolett Übergossen und vorsichtig bis zur Dampf bildung über der Flamme erwärmt; den Ueberschuss von Anilinölgentiana- violett abwaschen mit Jodkaliumlösung und letzteres erneuern und wiederum vorsichtig erwärmen; stärkste Entfärbung mit 95procen- tigem Alkohol; für wenige Secunden in Alkohol- Aether , dann in Wasser; einige Secunden färben mit der gesättigten wässerigen Eosinlösung , den Ueberschuss abwaschen mit Löffler's Blau , letz- teres erneuern und vorsichtig erwärmen. Kurze Entfärbung mit 95procentigem Alkohol, dann absoluter Alkohol, Xylol, Cauadabalsam. Bei dieser Färbung entstehen hübsche Bilder, indem das Proto- plasma der Leukocyten, Lymphocyten und anderer Zellen die Eosin- färbung zeigt — wie auch die rothen Blutkörperchen im blutigen Auswurf bei der Lungenentzündung — , während die Zellkerne das LÖFFLER-Blau angenommen haben, und die sich nach Gram färbenden Bacterien mit einer schwarzen , beziehungsweise tiefvioletten Farbe contrastiren; die sich nicht nach Gram färbenden Bacterien haben Blaufärbung angenommen. Eventuell um die Bacterien vorhandene Kapseln sind mit Eosin leicht tingirt. Verf. bespricht sodann sowohl das qualitative wie quantitive Vorkommen der einzelnen Bacte- rienarten in den verschiedenartigen Auswürfen und glaubt, durch seine Sputumfärbemethode zur Erleichterung der klinischen Diagnose beizutragen. W. Hoffmcmn {Berlin). Nebel , A. , Ueber den Nachweis der Tuberkelbacillen im Sputum (Arch. f. Hygiene Bd. XLVII, H. 1, 1903, p. 57). Verf. kritisirt zunächst die verschiedenartigen , bisher üblichen Methoden, um im Auswurf mit nur ganz vereinzelten Tuberkelbacillen 90 Referate. XX, 1. den Nachweis derselben zu erleichtern. Auch das JocHMANN'sche Anreicherungsverfahren von anerkannter Brauchbarkeit lässt im Stich oder giebt weniger befriedigende Resultate, wenn der Tuberkelbacillen enthaltende Auswurf längere Zeit transportirt oder aufbewahrt oder durch Zusatz von Desinfectionsraitteiu stark verändert wurde. Um zunächst das zähschleimige, die Tuberkelbacillen in ungleichmässiger Vertheihmg enthaltende Sputum in einfacher Weise in eine dünne, vollständig homogene Flüssigkeit zu verwandeln , benutzte Verf. au Stelle der sonst vielfach verwandten Alkalien die alkalischen Erden, welche ebenso wie jene das Eiweiss und den Schleim des Auswurfs in lösliche Verbindungen überführen, ohne dabei schädlich auf die Tuberkelbacillen einzuwirken. Verf. fand als am brauch- barsten den Kalk in der Form des Kalkwassers. Versuche über- zeugten Verf., dass bei dem Centrifugiren der homogenisirten Sputum- flüssigkeit noch eine grosse Anzahl von Tuberkelbacillen in der Flüssigkeit selbst suspendirt bleiben, bei der Untersuchung des Boden- satzes mithin verloren gehen. Er filtrirte deshalb noch die ganze Sputumflüssigkeit durch Berkefeld -Filter, indem er den Filter in pulverisirten Gips einsetzte , wodurch die Flüssigkeit bald durch- gesaugt wurde. Das ganze Verfahren verläuft im einzelnen folgender- maassen: 1) In einem weithalsigen , mit Gummistopfen sicher ver- schliessbaren Gefässe wird das Sputum mit der 8- bis lOfachen Menge klaren Kalkwassers versetzt und kurze Zeit kräftig umge- schüttelt. 2) Nach vollständiger Homogenisirung wird das Sputum etwa 2 Minuten lang centrifugirt. Wenn genügend Kalkwasser zu- gesetzt ist, erhält man einen compacten, scharf begrenzten und fest- sitzenden Bodensatz. 3) Die über dem Sedimente stehende Flüssigkeit wird in einem keimdichten Berkefeld -Filterbecher von etwa 15 cc Inhalt gegeben , welcher seinerseits in ein mit trockenem, lockerem Gipse gefülltes Becherglas eingesetzt ist. 4) Die Zeit der Filtration schwankt je nach der Verdünnung des Sputums ; im allgemeinen sind 15 cc in etwa 2 bis 3 Stunden abgesaugt. 5) Der durch Filtration erhaltene Rückstand wird durch Platinpinsel oder Gummiwischer, eventuell unter Zusatz eines Tröpfchens Wasser aufs Deckglas über- tragen und in der üblichen Weise untersucht. 6) Die mit Kalkwasser behandelten Tuberkelbacillen erscheinen nach der gewöhnlichen Färbung im mikroskopischen Bilde als vollkommen gleichmässig tingirte, scharf begrenzte, relativ kräftige Stäbchen ; ebenso bleiben die weniger resi- stenten, für die prognostische wie therapeutische Beurtheiluug des tuber- culösen Processes nicht unwesentlichen Keime, wie Streptokokken, XX, 1. Referate. 91 Pneumokokken , Staphylokokken , T e t r a g e n ii s etc. vorzüglich er- halten , wie es an den nach Gram gefärbten Präparaten ersiclitlich ist, 7) Die Einfachheit und Billigkeit des Verfahrens lässt es ohne weiteres zu , eine ganze Reihe von Sputen neben einander in den mit Gips gefüllten Bechergläsern zum Zwecke der Anreicherung auf- zustellen. W. HoffiJtann (Be?'lin). Anleitung für die bacteriologische Feststellung der Cholerafälle [Erlass des Ministers der geist- lichen, Unterrichts- und Medicinalangelegen- heiten vom 6. November 1902] (Ministerialbl. f. Medicinal- u. med. Unterrichtsangelegenh. Bd. II, 1902, p. 347). Die grössere Choleraepidemie in Alexandrien im vergangenen Jahre, bacteriologisch untersucht und beobachtet von E. Gottschlich, gab Gelegenheit, an frisch aus dem Menschen gezüchteten Cholera- vibrionen die bisher bekannten Methoden zur bacteriologischen Cholera- diagnose auf ihren Werth zu prüfen, eventuell zu modificiren. Eine eingehende, sehr umfangreiche Veröffentlichung wird in kurzem von Gottschlich und Kolle , unter der Mitarbeiterschaft von Ketsch, Otto, Lenz in der Zeitschrift für Hygiene und Infectiouskrankheiten erscheinen und seiner Zeit in dieser Zeitschrift referirt werden. — Dem Ministerium erschien es von der grössten Bedeutung, die Assi- stenten der hygienischen Institute , denen auf deutschem Boden in erster Linie die Choleradiagnose anvertraut sein dürfte , über die Neuerungen auf diesem Gebiete in einwöchigen Cursen im Institut für Infectionskrankheiten zu informiren [an denen Ref. auch theil- nahm],. und eine neue „Anleitung für die bacteriologische Feststellung der Cholerafälle" zu erlassen, aus der das Wichtigste hier angeführt werden soll. 1) Was die mikroskopische Untersuchung betrifft, so sollen mög- lichst Schleimflocken aus dem Stuhl Cholerakranker oder Cholera- verdächtiger zu Ausstrichpräparaten verarbeitet werden. Färbung mit verdünnter Carbolfuchsinlösung 1:9; ferner Untersuchung im hängenden Tropfen mit Peptonlösung sofort und nach halbstündigem Verweilen bei 37^ — frisch und gefärbt. 2) Ueber das Giessen der Gelatineplatteu, wozu auch möglichst wieder eine Schleimflocke gewählt werden soll, ist nichts Neues zu berichten. Besonderer Werth wird auf die genau nach Vorschrift — im Anhang — vorzunehmende Herstellung der Gelatine gelegt, be- 92 Referate. XX, 1, sonders auf die richtige Alkalescenz, welche erreicht wird, wenn nach Herstenuug des Lakmnsneutralpimktes pro 100 cc Gelatine 3 cc einer lOprocentigen Lösung von krystallisirtem kohlensaurem Natron zu- gesetzt werden. 3) Drei Agarplatten , welche vor ihrer Impfung — mit einem Glasspatel oder Platinpinsel — eine halbe Stunde bei 37 "^ im Brut- schrank mit der Fläche nach unten offen gehalten werden müssen, werden mit einer Oese Ausgangsmaterial angelegt. Die Aussaat kann doppelt angelegt werden, oder es kann eine Oese in 5 cc Bouillon vertheilt und je eine Oese dieser Mischung auf je eine Platte übertragen werden, lieber die Herstellung des Agar giebt der Anhang näheren Aufschluss ; die Herstellung der richtigen Alkalescenz ist dieselbe wie bei der Gelatine (2.). 4) Von grösstem praktischem Werth ist die specifische An- reicherung nur vereinzelter Choleravibrionen mit Peptonwasser sowohl in Röhrchen von 10 cc Inhalt als in Kölbchen von ,50 cc; Menge der Aussaat im ersten Fall eine Oese , Zahl der Röhrchen 6 , im letzten Fall 1 cc Koth als Aussaat in ein Kölbchen ; nach 6- und 12stündigem Verweilen im Brutschrank bei 37^ mikroskopisch auf Vibrionen zu untersuchen ; bei Entnahme der Probe darf das Röhr- chen nicht geschüttelt werden [es bildet sich eine zarte Haut an der Oberfläche, die meist aus einer Reincultur von Cholerakeimen besteht und beim Schütteln zu Boden sinkt, Ref.]. Von einem Röhr- chen oder Kölbchen , welches am meisten verdächtig ist , Cholera- bacterien zu enthalten , werden für die weitere Untersuchung mit je einer Oese 3 Peptonröhrchen geimpft und je eine Serie Gelatine- und Agarplatten angelegt. Die Peptonröhrchen sind vor der Impfung im Brutschrank bei 37^ vorzuwärmen. Wegen Zubereitung der Peptonlösung giebt der Anhang Aufschluss. 5) Das Anlegen von Reinculturen erfolgt in der bekannten Weise am besten von der Agarplatte aus durch Gelatinestichculturen [Ver- flüssigung ! Ref.] und Züchtung auf schräg erstarrtem Agar [zur späteren Identificirung mittels der specifischen Agglutination. Ref.]. 6) Die Prüfung der Reinculturen erfolgt durch die Agglutina- tionsmethode, sowohl makroskopisch wie mikroskopisch, sowie durch Anstellung des PrEiFFER'scheu Versuchs im Meerschweinchenkörper. Die Methode der Agglutinations versuche, welche mit einem vom In- stitut für Infectionskrankheiten zu beziehenden Testserum anzustellen sind, ist nach jeder Seite hin eingehend geschildert und wird be- sonders Werth darauf gelegt , dass die zu prüfenden Culturen mit XX, 1. Referate. 93 dem Testserum austitrirt, die höchste noch deutlich auf die betreffen- den Culturen wirkende Verdünnung- des Serums festgestellt wird. Auch auf die Gefahren der Pseudoagglutination wird aufmerksam gemacht. Hier Eingehenderes zu bringen würde zu weit führen. Was die Anstellung des PrEiFFER'schen Versuchs im Thierkörper anbelangt, so ist das hierfür erforderliche bactericide Serum eben- falls aus dem Institut für lufectionskrankheiten zu beziehen ; es soll besonders hochwerthig sein, mindestens sollen 0'0002 g des Serums genügen, um bei Injection einer Mischung von einer Oese (= 2 mg) einer 18stündigen Choleraagarcultur von constanter Virulenz mit einem Cubikcentimeter Bouillon die Choleravibrionen innerhalb einer Stunde im Meerschweinchen-Bauchfellraum zur Auflösung unter Körn- chen-(Grannla-)Bildung zu bringen, d. h. das Serum muss mindestens einen Titer von 0'0002 g haben. Die Technik der Ausführung des PFEiFFER'schen Versuchs und die dabei zu berücksichtigenden Krite- rien finden eingehende Erwähnung. — Auch zur Feststellung einer abgelaufenen Choleraerkrankung beim Menschen kann derPFEiPFER'sche Versuch benutzt werden. Hierzu werden Verdünnungen des Blut- serums des verdächtigen Menschen mit 20, 100 und 500 Th. Bouillon hergestellt, mit je einer Oese einer ISstündigen Agarcultur viru- lenter Choleravibrionen vermischt, je einem Meerschweinchen von 200 g Gewicht in die Bauchhöhle eingespritzt. Ein Controlthier er- hält ^|^ Oese der gleichen Cultur ohne Serum in einem Cubikcenti- meter Bouillon aufgeschwemmt, in die Bauchhöhle eingespritzt. Bei positivem Ausfall der Reaction nach 20 beziehungsweise 60 Minuten kann man annehmen , dass der Mensch , von welchem das Serum stammte, Cholera überstanden hat. Ein besonderes Kapitel befasst sich mit der Beurtheilung der Befunde , welche besonders bei den ersten Choleraerkrankungen von grösster Bedeutung ist; hier darf erst die Diagnose gestellt werden, wenn sämmtliche angeführte Untersuchungsmethoden ein positives Ergebniss haben , bei den einzelnen Fällen einer ausgebrochenen, sicher diagnosticirten Epidemie ist au der mikroskopischen Unter- suchung, an dem charakteristischen Coloniebild auf Gelatine und auf Agar und an dem positiven Ausfall der mikroskopischen Agglu- tination festzuhalten. Noch einige Worte über die Untersuchung choleraverdächtigen Wassers; ein Liter desselben wird mit 100 cc der Peptonstamm- lösung (1 1 destillirtes Wasser, 100 g WiTTs'sches Pepton, 100 g Kochsalz, 1 g Kaliumnitrat, 2 g krystallisirtes kohlensaures Natron) 94 Referate. XX, 1, gemischt, iu Kölbcheu zu je 100 cc vertheilt und bei 37*^ gehalten. Nach 8 und 18 Stunden weitere Untersuchung, wie oben. Der „An- leitung" ist noch eine genaue Anweisung zur Entnahme und Ver- sendung choleraverdächtiger Untersuchungsobjecte (Fäces , Organe, Culturen etc.) beigegeben. W. Hoff'mann (Berlin). Altscllüler, E., Eine Typhusanreicherungsmethode (Cen- tralbl. f. Bacteriol. , Abth. 1, Orig. Bd. XXXIII, 1903, No. 9, p. 741). Die Veröffentlichung von Schepilewski „Ueber den Nachweis der Typhusbacterien im Wasser nach der Methode von Dr. A. W. Windelbandt" ^ veranlasste Altschüler, in Form einer vorläufigen Mittheilung von einer von ihm bearbeiteten Typhusanreicherungs- methode zu berichten , deren Princip mit den von Windelbandt an- gegebenen übereinstimmt , das sich aber in seiner technischen Aus- führung wesentlich von ihm unterscheidet. Das zu untersuchende Wasser wird zur Anreicherung seiner Bacterien mit Pepton und Chloruatrium im Verhältniss von ein und einem halben Procent ver- setzt. Hiernach kommt das Wasser 24 Stunden lang in einen Brut- schrank von 37^ C. Von den oberflächlichen Randparthien wird mit einer sterilen Pipette eine Menge von 10 cc in ein steriles Röhrchen gebracht, welches die Grösse eines Reagensglases hat und unten in eine conisch ausgezogene Oeffnung ausläuft, die mit einem Gummi- schlauch armirt ist , der durch eine Klemme verschlossen werden kann. Zu diesen 100 cc Wasser wird nun ein Typhusimmunserum hinzugegeben , iu einer solchen Menge , dass eine Agglutination im Verhältniss von 1 : 50 eintreten kann. Durch die Häufchenbildung und die Sedimentirung bei dem Phänomen der Agglutination bildet sich in dem conisch zulaufenden Ende des Röhrchens ein Bodensatz, der [zumal bei der geringen Serumverdünmmg von 1 : 50. Ref.] eine Anzahl anderer Bacterien, als die specifisch beeinflussten Typhus- bacillen, mit einschliesst. ALTSCHtJLER empfiehlt deshalb , das Röhr- chen 2- bis 3mal während der Agglutination umzuschüttein. Nach 7 Stunden kann man die Agglutination für beendet ansehen und lässt nun den Bodensatz in ein anderes Röhrchen abfliessen, das mit einer einprocentigen Pepton- und einer einhalbprocentigeu Chlornatrium- lösung augefüllt ist und einige feinste Körnchen Quarzsand von etwa 2 mm Korngrösse enthält. Durch tüchtiges ümschütteln mit den 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XIX, 1902, p. 519. XX, 1. Referate. 95 Sandkörnchen wird die Agglutination wieder aufgehoben , die ein- zelnen Bacterienhäufchen wieder aus einander geschleudert, und nun kommt das Röhrchen nochmals in den Brutschrank, damit sich die vorher agglutinirten Typhusbacillen noch weiter vermehren können. Nach 24 Stunden sind die Typhusbacillen in relativ viel grösserer Menge vorhanden als die bei der Agglutination mitgerissenen Be- gleitbacterien imd lassen sich nun durch Ausstreichen auf dem DRiGALSKi-CoNRADi'schem Lakmus -Nutrose -Agar leichter nachweisen. Verf. empfiehlt aber die übrig gebliebene Flüssigkeitsmenge in dem zweiten Röhrchen nochmals mit Typhusimmunserum und weiter, wie oben angegeben, zu behandeln, damit ja keine Typhusbacillen dem Nachweis entgehen. Verf. ist noch mit Verbesserungen seiner Methode beschäftigt, über die er seiner Zeit berichten wird. *oM W. Hoffmann (Berlin). Roth, E. , Versuche über die Einwirkung des Coffeins auf das Bacterium typhi und coli (Hygien. Rund- sch. Bd. XIII, 1903, No. 10). Im Laufe von Untersuchungen über die Einwirkung der Alka- loide auf die Bacterien machte Roth die eigenartige Beobachtung, dass das gewöhnliche, im Handel vorkommende Coflfein den Typhus- bacillus in anderer Weise beeiuflusst als den Colibacillus. Auf ge- wöhnlichen neutralen Agarplatten , die mit 70 bis 80 Procent einer einprocentigen sterilen Coffeinlösung versetzt und einerseits mit Typhus- anderseits mit Colibacillen beimpft waren, zeigten sich die letzteren vollständig im Wachsthum gehemmt, während die ersteren gut zur Entwicklung gekommen waren. Aehnliche Resultate erhielt Verf. auch auf der Gelatine, besonders günstig aber waren dieselben, wenn er Coffein in einem bestimmtem Procentsatz einer Fleischwasser- bouillon von ganz bestimmten Alkalescenzgrad — über genauere Einzelheiten wird Roth noch später berichten — zusetzte , sie mit Typhus, anderseits mit Coli impfte und sie 15 bis 20 Stunden im Brutschrank von 37^ stehen Hess. Goss er nun voii den betreffen- den Bouillonröhrchen Gelatineplatten, so wuchsen die Typhusbacillen reichlich in der charakteristischen Weise , während das Bacterium coli fast gar keine Colonien bildete, durch das Coffein also stark im Wachsthum und in seiner Entwicklungsfähigkeit gehemmt worden war. — Durch diese differente Beeinflussung dieser beiden sich sonst so nahe stehenden Bacterienarten, welche bisher bei den praktischen Typliusdiagnosen immer noch so grosse Schwierigkeiten bereiteten. 96 Referate. XX, 1, da das Bacterium coli als der üppigere und der schärfste Conciirrent des Typlmsbacilliis diesen meistens überwucherte und zurückdrängte, ist nun die Möglichkeit gegeben, den Typhusbacillus in seinem Me- dium , den Fäces oder dem Wasser, anzureichern , da auch die an- deren Bacterien, die als Saprophyten in Begleitung des Typhusbacillus vorkommen , sich zurückdrängen lassen. Versuche in diesem Sinne sind im hygienischen Institut - Berlin seit einiger Zeit im Gange und werden die Resultate derselben für die nächste Zukunft in Aussicht gestellt. TT". Ho ff mann (Be?im). Frothingham , Die Diagnose des Rotzes nach der SxRAUss'schen Methode (Zeitschr. f. Thiermedicin Bd. VI, 1903, p. 98). Verf. bespricht zunächst eingehend die Methode , die er bei einer grossen Anzahl von rotzverdächtigen Erkrankungen zur Sicher- stellung der Diagnose ausgeführt hat, indem er eine Aufschwemmung des rotzverdächtigen Materials männlichen Meerschweinchen intra- peritoueal injicirte. Am 2. oder .3. Tage trat deutliche Röthung und Schwellung des Hodensacks und Unbeweglichkeit eines oder beider Hoden auf; bei der Sectiou fanden sich Oedeme der Unterhaut des Hodensacks, zahlreiche isolirte Eiterherde an der Bauchfellauskleidung desselben , sowie am Bauchfellüberzug des Hodens. — Der Hoden selbst war nur bei länger dauernder Krankheit ergriffen. — Um die Wirkung eitererregender Begleitbacterien zu beseitigen , Hess Verf. das Material einige Tage im Eisschrank liegen , wodurch die Rotz- bacillen nicht litten , während andere Bacterien ihre Virulenz ent- weder ganz verloren, oder dieselbe sich wenigstens verringerte. Zur Cultur benutzte Frothingham hauptsächlich die Kartoffel, worauf sich der Rotzbacillus durch seine bernsteingelbe Farbe vom Kutscher- schen Bacillus , der bei Meerschweinchen dieselbe Hodenerkrankung hervorrufen kann , unterscheidet. Bacillus pyocyaneus , der in den ersten 48 Stunden auf der Kartoffel dem Rotz gleicht, nimmt am 3. Tage grüne Farbe an — ausserdem ist er beweglich. TT". Ho ff mann {Berlin). Ficker, 31., Zur Agglutinationstechnik (Hygien. Rundsch. Bd. XII, 1902, No. 22, p. 1129j. Bei mikroskopischen, über eine bis 2 Stunden dauernden Agglutinationsversuchen im hängenden Tropfen wird durch das Herabsinken und Zusammendrängen zumal unbeweglicher Bacterien XX, 1. Referate. 97 in den unteren Tlieil des sphärischen Tropfens die Diagnose einer specifischen Agglutination öfters erschwert. Um diesen Uebelstand zu vermeiden, empfielilt Ficker einen Objectträger, der in der Mitte eines kreisförmigen Ausschliffs ein rundes , 8 mm im Durchmesser haltendes Glasblöckchen enthält, das plan geschliffen und soweit niedriger als die übrige Objectträgeroberfläche ist , dass ein darauf gebrachter Tropfen beim Auflegen eines Deckgläschens sich gleich- massig zwischen den beiden Glasflächen ausspannt (Agglutina- tion im gespannten Tropfen). Sollte der Tropfen zu gross sein, so nimmt den Ueberschuss desselben eine 2 mm tiefe, um das Glasblöckchen verlaufende Rinne auf. — Ferner empfiehlt der Verf. für diejenigen Fälle , in denen zur Vornahme einer Reihe makro- skopischer Agglutinationen nur wenig Serum zur Verfügung steht , statt der gewöhnlichen Reagensgläser kleine Reagensgläschen von .3 bis 4 cm Länge und 0*5 bis 0*8 cm lichter Weite. Das untere Ende der Röhrchen läuft spitz zu, so dass sie noch besonders dazu geeignet sind , spontanes Sediraentiren im Gegensatz zu dem Agglutinationsphänomen leicht und schnell zu erkennen. W. Ho ff mann (Berlin). Hoffmaiin , W., lieber das Auftreten von Agglutininen nach c u t a n e r I n f e c t i n (Hygien. Rundsch. Bd. XIII, 1903, No. 3). Verf. hat den Beweis erbracht, dass das Serum vou Versuchs- thieren, denen der bacterielle Infectionsstoff durch Einreibung in die vorher abrasirte Bauchhaut beigebracht worden ist , in derselben Weise Aggiutinationskörper aufweist , wie bei der meist üblichen subcutanen , intraperitouealen und intravenösen Infectionsmethode. Durch angestellte Vergleichsversuche ergab sich, dass die Höhe des Agglutinationswerthes im Blutserum bei der cutanen Infection unge- fähr dem Titer bei intraperitonealer Infection entspricht, dass es dagegen nicht gelang, den Agglutinationstiter so hoch durch mehr- fache cutane Infectionen — mit lebenden und abgetödteten Culturen — zu treiben, wie man ihn bei intravenösen Injectionen erhält. W. Hoffmann (Berlin). Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 1. 98 Referate. XX, 1. D. Botanisches. Lundie , A., Notes on micro-methods (Trausact. a. Proceed. R.-Soc. of Edinburgh. Vol. XXI, 1900, p. 159). Beim Anfertigen der Dauerprä parate von Pilzen (Hyphen) mit Glyceriu empfiehlt es sich , erst die Luft mit Chloroform aus- zutreiben, dann Glycerin zuzusetzen und das Präparat zu erwärmen, wobei das Chloroform und die letzten Luftblasen entweichen. Photochemische Methoden benutzte Verf. zur Färbung- gelatinöser Objecte. Eine gesättigte Lösung von Kaliumbichromat wird mit einem Zwanzigstel des Volumens von gesättigter Kobalt- nitratlösung gemischt. In diese Mischung werden die Objecte — beispielsweise ein Stück von Batrachospermum — übertragen und 30 Minuten lang der Einwirkung diffusen Tageslichtes ausgesetzt. Dann werden die Objecte auf einen Objectträger verbracht, mit Silbernitratlösung behandelt und 5 Minuten lang belichtet. Das Nitrat wird darauf entfernt und Chlorammonium zugesetzt, unter dessen Ein- wirkung allmählich die rothe Chromatfärbung verschwindet. Der Ueberschuss von Flüssigkeit wird dann beseitigt , das überschüssige Silberchlorid mit Natriumthiosulfat entfernt. Hiernach können die Präparate in Glycerin oder (nach Entwässerung) in Canadabalsam verwahrt werden. Werden Schnitte durch Fucus erst in Wasser zur Quellung ge- bracht und dann mit Silbernitratlösung behandelt, so können sie nach vorheriger Reinigung des oberflächlich anhaftenden Niederschlages von Silbersalzen mit Hydrochinon entwickelt und später fixirt werden. Belichtung von 3 Minuten (Gaslicht) genügt bereits um gute Präpa- rate zu bekommen. Die CoUode des Algenthallus färbt sich gelblich braun , die Cellulosescliicht bleibt ungefärbt ; zwischen Cellulose und Gallertschicht wird ein dunkler Ring sichtbar. Küster {Halle a. 8.). Dangeard, P.-A., Recherches surlesEugleniens (Le Bota- niste 1902, ser. VII, p. 97). Zum Fixiren benutzte Verf. absoluten Alkohol und FLEMMiNG'sches Gemisch. Gute Färbungsresultate Hessen sich mit verschiedenen Methoden erzielen. Um Protoplasma und Chromatophoren deutlich unterscheiden zu können, empfiehlt sich Färbung mit Pikrocarmin XX, 1. Referate. 99 und Häraatoxylin ; zuweilen ist es sehr empfehlenswerth, beim Färben einige Tropfen WEiGERx'sches Pikrocarmin in die Flüssigkeit zu geben, in der die Flagellaten sich aufhalten, und einige Hämatoxylin- krystalle zuzufügen. Schöne Kernbilder erhielt Verf. bei Verwendung einer wässerigen Lösung von Säurefuchsin , der einige Krystalle Hämatoxylin zugesetzt worden waren ; statt Säurefuchsin kann man auch Orange B benutzen. Doppelfärbung von Protoplasma und Chromatophoren Hess sich erzielen mit LoEFFLER'schem Blau und Pikrocarmin. Um zu ermitteln , ob die Chromatophoren Pyrenoide enthalten oder nicht, färbe man stark mit Säurefuchsin 5 hiernach behandle man die Objecte ■ — auf dem Objectträger — mit ver- dünnter Pikrinsäurelösung und untersuche in verdünntem Glycerin ; wenn Pyrenoide vorhanden sind , so zeigen sie sich hiernach schön roth gefärbt. Auch Rubin S und Coccinin sind zur Färbung der Pyrenoide geeignet. — In der Mehrzahl der Fälle erhält man schon ganz befriedigende Präparate mit einfacher Hämatoxylinfärbung ; man gebe einige Farbstoffkrystalle in die Schale, in der sich die fixirten Objecte befinden. Küster {Halle a. S.). Davis, Br. M. , Oogenesis in Saprolegnia (Botan. Gaz. Bd. XXXV, 1903, p. 233). Als bestes Fixiruugsmittel nennt Verf. Chromessigsäure. Die übliche , einprocentige Lösung ist jedoch zu stark für die Oogonien der Saprolegnien , deren Protoplasma sich leicht contrahirt. Verf. empfiehlt eine Lösung von 0*25procentiger Chromsäure und O'lpro- centigem Eisessig, die bessere Resultate giebt als Flemming's und Merkel's Gemische, als Sublimat, Iridiumchlorid oder Pikrinsäure. Küster {Halle a. S.). ßosenberg, 0., Ueber die Befruchtung von Plasmopara alpina Johans. (Bih. til Sv. Vet.-Akad. Handlingar. 1903, Bd. XXVIII, Afd. III, No. 10). Von allen verwandten Fixirungsflüssigkeiten erwies sich Merkel's Gemisch als das geeignetste. Flemming's Chrom-Osmium-Essigsäure ist wegen der Schwärzung , die es im Plasma hervorruft , und die durch Wasserstoffsuperoxyd nur unzureichend sich entfernen lässt, weniger empfehlenswerth. Gute Bilder lieferte übrigens auch Chrom- Essigsäure. — Gefärbt wurde mit Flemming's Dreifarbengemisch und mit Heidenhain's Eisenhämatoxylin ; das erstere ist zur Färbung des Chromatins im ruhenden Kern gut geeignet, weniger aber zur Tinc- 100 Referate. XX, 1, tion der karyokinetischen Figuren und des Protoplasmas. Das Coeno- centrum wird in den meisten Fällen nur schwach und ditfus gefärbt. Mit Heidenhain's Methode lässt sich die Structur des Plasmas sehr deutlich machen. Küster {Halle a. S.). Timbeiiake, N. Gr., Development and structure ofthe swarm spores of Hydrodictyon (Transact. Wisconsin Acad. Sei., Arts a. Lett. Vol. XIII, 1902, p. 485). Die dünne Plasmahaut und der grosse Zellsaftraum in den Zellen von Hydrodictyon utriculatum erschweren eine gute Fixirung des Materials ausserordentlich. Fixirungsfiüssigkeiten, welche Mem- bran und Plasmahaut schnell durchdringen, fand Verf. in dem Merkel- schen Platinchlorid- Chrom- Essigsäuregemisch und in einer Mischung von Iridiumchlorid und Essigsäure. Für letztere werden 2 Recepte angegeben; entweder (nach Eisen) werden 100 Th. einer O'öpro- centigen (wässerigen) Lösung von Iridiumchlorid mit 1 Th. Eisessig gemischt, oder — für eine stärkere Modification — auf 100 Th. einprocentiger Iridiumchloridlösung .3 Th. Eisessig gegeben. In ihrer Wirkung unterscheiden sich die beiden Modificationen nicht erheblich; bei Anwendung des stärkeren Gemisches wurden gute Plasma- und Kernstructurbilder erhalten. Auch bei Untersuchung anderer Algen bewährten sich die MsRKEL'sche Flüssigkeit und die Iridiumchlorid- mischungen. Die letzteren sind jener vorzuziehen, wenn es sich um die Untersuchung sehr zarter Structuren handelt. — Flemming's Fixirungsmittel sowie die Sublimat enthaltenden Lösungen erwiesen sich als nicht empfehlenswerth. — Gute Färbungen lieferte Flemming's Dreifarbengemisch , Zimmermann's Jodgrünfuchsin und Eisenhämat- oxylin, Küster {Halle a. 8.). Moliscll , H. , Die sogenannten Gasvacuolen und das Schweben gewisser Phykochromaceen (Botan. Zeitg. 1903, p. 47). Auf Grund verschiedener mikrochemischer Reactionen und an- derer Indicien kommt Verf. (ebenso wie vor ihm Brand ^) zu dem Schluss, dass die von Klebahx u. a. als „Gasvacuolen" beschriebenen Inhaltskörper vieler Cyanophyceen zähflüssige oder feste Gebilde sind. Die Schwebkörperchen lösen sich sehr schnell in Alkohol, Chloroform, Aether, Schwefelkohlenstotf, Terpentin, Aceton, in den verschiedensten ') Ber. d. D. Bot. Ges. 1901, Bd. XIX, p. 152. XX, I. Referate. 101 organischen und anorganischen Säuren. In sehr verdünnten Alkalien bleiben sie wochen- und monatelang erhalten (einprocentiges wässe- riges Ammoniak, 3procentige Sodalösmig, Kalkwasser). In concen- trirter Kalilauge oder concentrirtem Ammoniak verschwinden sie aber nach einigen Stunden oder Tagen. Die Schwebkörperchen in den Endzellen von Gloiotrichia echinulata verschwinden bei Zusatz von 20procentiger Kalilauge ; lässt man hiernach Lösung von Methylen- blau in einprocentigem wässerigem Ammoniak zuüiessen , so färben sich die Stellen, welche vorher von Schwebkörpern in Anspruch ge- nommen waren, ziemlich intensiv blau, „es macht den Eindruck, als ob die Kalilauge eine Gerüstsubstanz der „Gasvacuole" zurück- gelassen hätte , die sich mit dem Methylenblau färbt und erst hier- durch in Erscheinung tritt." — Um die fraglichen Inhaltsgebilde zu isoliren, wurde frisches Material von Aphanizomenon flos aquae in lOprocentige Kalisalpeterlösung übertragen; schon nach 24 Stunden hat sich das Algenmaterial in eine macerirende Masse umgewandelt ; aus den einzelnen Zellen kann man durch leichten Druck viele Tau- sende isolirter Schwebekörper erhalten. Bei Herbstmaterial von der- selben Alge liess sich durch längere Behandlung mit 2- bis 4pro- centiger Kalisalpeterlösung spontaner Zerfall der Zellen erreichen; die isolirten Schwebekörper Hessen sich als Vacuolen, mit einzelnen grösseren oder einer Unzahl kleinster Inhaltskörperchen erkennen, die sich in lebhafter BROWN'scher Molecularbewegung befanden. Nach Ansicht des Verf. würden sich diese feinsten Kügelchen als Test- objeete für Mikroskope eignen , da sie nur bei Verwendung guter Systeme mit voller Deutlichkeit wahrgenommen werden können. Küster {Halle a. S.). Rem^C, B., Ueber die speci fische Doppelbrechung der Pflanzenfasern (Sitzber. d. k. k. Acad. Wiss. Wien. Math.-Naturwiss. Cl. Bd. CX, 1901, Abth. 1, p. 364). Zu einer Methode , die verschiedenartigen Pflanzenfasern zu unterscheiden, gelangte Verf. bei der Untersuchung ihres Verhaltens im polarisirteu Lichte. Fasern von verschiedenen Pflanzen geben — unabhängig von ihrem chemischen Charakter (Ligningehalt etc.) — ungleiche Polarisationsfarben. Von denjenigen Fasern, deren optische Hauptachse mit der Längsrichtung zusammenfällt, geben bis Weiss I Boehmeria nivea u. a., bis Gelb I Raphia vinifera, Musa textilis u. a., bis Roth I oder Indigo II Corchorus capsularis u. a. , die höchsten Farben bis Grün II Cannabis sativa, Linum usitatissimum u. a. Zu 102 Referate. XX, 1. den Fasern , deren optische Längsachse senkrecht zu ihrer Längs- richtung steht, gehören die von Cocos nucifera u. a. Küster [Halle a. S.). Pantaiielli, E., Studi suU'albiuismo uel regno vegetale [Studien über den Albinismus im Pflanzenreich] (Malpighia, Vol. XV, 1902, p. 363). Bei Untersuchung der Chromatophoren in panachirten Blättern benutzte Verf. zum Fixireu eine gesättigte Lösung von Sublimat und Pikrinsäure in absolutem Alkohol oder eine concentrirte Lösung der letzteren in 94proceutigem Alkohol. Bei Anwendung der zweiten Lösung lassen sich die tixirten Objecte leicht auswaschen , mit der Sublimat -Pikrinsäurelösung lassen sich aber klarer gefärbte Bilder erzielen. Zur Färbung wurden 0*2 procentige Lösung von Säure- fuchsin (24 Stunden) oder Lösung von Gentianaviolett (mindestens 24 Stunden) verwendet. Die mit Gentianaviolett behandelten Schnitte können noch mit Säurefuchsin nachbehandelt werden ; es bleiben dann die Zellkerne blau , die Chromatophoren färben sich violett. — Zur gelegentlichen Färbung von Handschnitten empfiehlt Verf. gesättigte wässerige Lösung von Sublimat ; die Schnitte werden mit Wasser ausgewaschen , in concentrirte wässerige Lösung von Jodgrün ge- bracht, mit Wasser, Wasser -\- Alkohol und mit Salzsäure schwach angesäuertem Wasser gewaschen und in Glycerin eingeschlossen. Küster [Halle a. S.). Gola , Gr. , Lo zolfo e i suoi composti nell'economia delle plante [Der Schwefel und seine Verbin- dungen im Haushalt der Pflanzen] (Malpighia vol. XVI, 1902, p. 368). Nitroprussidnatrium lässt sich zum Nachweis von Schwefel auch bei mikrochemischen Untersuchungen mit Vortheil verwenden. Seine Schnitte brachte Verf. zunächst in eine verdünnte Lösung von Aetzkali, in der sie einige Minuten verbleiben; beim Herausnehmen lässt man die überschüssige Lauge abtropfen und überträgt die Schnitte in einen Tropfen frischer Nitroprussidnatrium -Lösung. Der Ueber- schuss von Alkali bedingt dabei meist Gelbfärbung des Reagens, man bringe daher den Schnitt in einen neuen Tropfen und wieder- hole die Manipulation so oft, bis die Lösung des Nitroprussidnatriums sich nicht mehr bei Berührung mit den Objecten verfärbt. Vor allem ist zu beachten, dass nicht durch allzu starke Einwirkung der Kali- XX, 1. Referate. 103 lauge der Ausfall der Reaction beeinträchtigt wird. — A^erf. mncht die Objecte namhaft, an welchen sich durch die genannten Reagen- tien Rothfärbung erzielen Hess. Besonders drastisch erfolgt die Reaction bei jungen Trieben von Asparagns, die daher auch zu Vor- lesungsversuchen empfohlen werden. Küster {Halle a. S.). Fischer , N. , M i k r o p h o t o g r a m m e von I n u 1 i n s p h ä r i t e n und S t ä r k e k ö r n e r n (Ber. d. Deutschen Botan. Gesellsch. Bd. XXI, 1903, p. 107). An der Hand einiger ausgezeichnet gelungener Mikrophotogramme bespricht Verf. die structurelle üebereinstimmung der geschichteten Stärkekörner und der in Gummi gezüchteten Inulinsphärite. Um die radialen Spalten in den Körnern der Kartoffelstärke sichtbar zu machen, verfuhr Verf. folgendermaasseu : „Kartoffelstärke wurde mit wenig Wasser befeuchtet, so dass ein dicker, kaum fliessender Brei entstand, den ich sodann mit seiner vielfachen Menge eines Gemisches von Xylol und absolutem Alkohol (1:1) übergoss, und zum Zwecke rascher Einwirkung öfters kräftig umschwenkte ; nach mehrtägiger Pause übertrug ich etwas von der Stärke in reines Xylol, erwärmte kurze Zeit zum Siedepunkt und tropfte mittels Pipette die Stärke auf Objectträger ; diese wurden bis zum Abduusten des Xylols in massiger Wärme gehalten , dann schärfer erhitzt , die Stärke in ge- schmolzenem Canadabalsam einji-ebettet und noch einmal bis zum 'o*^ Blasenwerfen erhitzt." — „In dem geschilderten Verfahren liegt wohl eine der Fixage verwandte Erscheinung vor ; ich nehme an , dass die Körner durch rasche Entwässerung ihrer äussersten Schichten so in ihrer Gesammtform festgelegt werden, dass bei fernerer Wasser- entziehung keine weitere Schrumpfung des ganzen Kornes mehr er- folgen kann, es müssen also jene Spalten erhalten bleiben." Küster {Halle a. S.). Hartwich, C, u. Uhlmaim, W., Beobachtungen über den Nachweis des fetten Oeles und seine Bildung, besonders in der Olive (Arch. d. Pharm. Bd. CCXL, 1902, p. 471). Hartwich, C. , u. Uhlmaim, W. , Ueber den Nachweis fetter Oele durch mikrochemische V erseif ung (Ebd. Bd. CCXLI, 1903, p. 111). Uhlmann, W. , Ueber die Entstehung, das Vorkommen und den Nachweis des fetten Oeles mit beson- 104 Referate. XX, 1. derer Berücksichtigung des Olivenöles (Inaug.- Diss. Zürich 1902). In der zuerst genannten Arbeit bringen Hartwich und Uhlmann einige kritische Bemerkungen über die üblichen Methoden zum Nach- weis fetter Oele. Bei der Prüfung der ölhaltigen Schnitte mit alko- holischer (öOprocentiger) Cyaniulösung ist zu beachten, dass manche Oele erst ziemlich spät von dem Reagens gefärbt werden : Oel von Helianthus amuuis und Corylus avellana ist nach 48 Stunden schwach himmelblau ; das Oel von Schleichera trijuga wird überhaupt nicht gefärbt, in Schnitten durch das Perikarp von Olea europaea die Zell- kerne intensiver als die Oeltropfen. Zu Irrthümern kann auch die Anwendung von Osmiumsäure (einprocentige Lösung) geben, da durch sie auch andere Stotfe als fette Oele (ätherische Oele, Gerbstoffe, Vanillin -)- Salzsäure) geschwärzt, anderseits Palmitin- und Stearin- säure und deren Glykoside nicht gefärbt werden (Altmann). Am sichersten wirkt nach Verff. die Yer s eif ungs m etho d e. Die mikrochemische Verseifung der Oeltröpfchen giebt, wie die Verflf. zeigen, sogar über die Natur des unter dem Mikroskop vorliegenden fetten Oeles Aufschluss. Trocknende Oele bilden kugelige Sphärite, ihre krystallinische Structur wird erst unter dem Polarisationsmikro- skop deutlich ; nichttrocknende Oele bilden lange feine Krystallnadeln, die bei Oliven- und Haselnussöl radial zu sternförmigen Verbänden vereinigt sind , beim Mandelöl in tangentialer Lagerung ein unregel- mässiges Haufwerk zu Stande kommen lassen. Pfirsichkernöl liefert ein Gemenge von feinen Nadeln und Sphäriten. Arachisöl verhält sich ähnlich, liefert aber sehr feine, meist gebogene Nädelchen; im allgemeinen entstehen Sphärite schneller als die Nadeln. Rici.nusöl liefert ein Haufwerk kurzer, dicker Krystallnadeln , Cacaoöl in dem Innern des ursprünglichen Tropfens ein Bündel ganz kurzer Nadeln, an der Peripherie lange Nadeln , Muskatöl zeigt neben unverseif- baren Bestandtheilen grosse, sternförmige Conglomerate kurzer, dicker Krystallnadeln. In der zweiten Mittheilung stellen Verflf. die Unterschiede der verschiedenen Oele fest, die sich bei verschieden langer Einwirkungs- dauer des Verseifungsmittels und bei verschiedenen Concentrationen des letzteren ergeben. Uhlmann's Dissertation wiederholt im wesentlichen — soweit es sich um mikrochemische Angaben handelt — die Mittheilungen der ersten soeben besprochenen Publication. Küster {Halle a. S.). XX, 1. Referate. 105 Gram, B,, Ueber die Proteinkörner im Samen der Oel- gewächse (Landwirtlisch. Versuchsstationen Bd. LVIT, 1902, p. 257; vgl. auch Danske Vidensk. Selsk. Skr. Räkke VI, Afd. IX, 7). Die Häute der Proteinkörner sind verhältnissmässig resistent; sie vertragen gewöhnlich die Behandlung mit mittelstarker Kalilauge. Zuweilen wird durch die Kalilauge der innere Theil des Protein- kornes so stark zur Quellung gebracht , dass die Häute zerplatzen ; es empfiehlt sich alsdann Untersuchung von Schnitten, die in Spiritus gekocht sind. Die Proteinkörner nach Pfeffer's Härtungsmethode mit Sublimatalkohol zu behandeln , findet Verf. mit Johannsen und LüDTKE - nicht zweckmässig. In einigen Fällen wenigstens dürfte Vorbehandlung mit Formalin zweckmässig sein, da dieses die Kry- stalloide unlöslich oder doch schwer löslich in Kalilauge macht. Das von Pfeffer empfohlene Natriumphosphat ist in manchen Fällen brauchbar, da in ihm die Grundmasse gelöst wird und die Globoide und Krystalloide deutlich hervortreten ; LtJDTKE's Angaben über die Lösung der Globoide und Häute im Natriumphosphat kann Verf. nicht bestätigen. Ein empfehlenswerthes Untersuchungsmedium hat Verf. im Borax -Weinstein gefunden; in einer etwa 20procentigen Lösung lösen sich die Globoide und von der Grundsubstanz minde- stens ein grosser Theil; überdies lassen sich die Proteinkörner in der klebrigen Flüssigkeit leicht rollen und dabei von allen Seiten betrachten. Auch trocknet die Flüssigkeit unter dem Deckglas nur langsam ein ; Verf. giebt ihr unbedingt den Vorzug vor der Natrium- phosphatlösung. Bei Untersuchung der Krystalloide (Ricinus) mit Jodjodkalium verwende man eine Lösung, die nur wenig Jodkali enthält. — - Haltbare Dauerpräparate von Proteinkörnern herzustellen, ist ausserordentlich schwer, weil die verschiedenartigen Bestandtheile der Körner sich den Einbettungsmedien gegenüber verschieden ver- halten. Nach den Erfahrungen des Verf. ist die PouLSEN'sche Methode^ die beste. Um die einzelnen Bestandtheile etwa eines Ricinus-Protein- korns zu demonstriren, verwende man zwei Präparate : Vollständig entfettete Schnitte werden nach einer schnellen Abspülung mit Wasser entweder ungefärbt oder durch Zusatz von wenig Eosinlösung zu dem Einlegemedium schwach gefärbt in Borax -Weinstein eingelegt ; hier- ^) PouLSEN, V. A. , Botanische Mikrochemie; übers, v. C. Müller, Cassel 1881, p. 74. 106 Referate. XX, 1. durch erhält man ein Präparat, welches Haut und Krystalloid zeigt. Daneben verwende man in Spiritus gekochte Schnitte , in welchen die Krystalloide durch Zusatz von Kalilauge gelöst worden sind, spüle sie ab und lege sie entweder in Spiritusglycerin , in welchem Falle das Präparat sofort verschlossen wird — oder in Ricinusöl ; es erscheinen dann Haut, Grundmasse und Globoide. Küster [Halle a. S.). Kroenier, K., Wurzelhaut, Hypodermis und Endo dermis der angiospermen Wurzel fBibl. Bot. H. LIX, 1903, 151 pp.). In dem die „Korkstoffe" behandelnden Abschnitte recapitulirt Verf. die Angaben früherer Autoren (v. Höhnel , Fremy , Urbain, V. WissELiNGH, GiLsoN u. a.) Über die chemische Zusammensetzung Cutin- und Suberin-haltiger Pflanzenmembranen und behandelt darnach die mikrochemischen Eigenthümlichkeiten dieser Häute. — Gegen Eau de Javelle sind korkstoffhaltige Membranen ausserordentlich widerstandsfähig; selbst nach 14tägiger Maceration Hess bei manchen Objecten keine Aenderung in der Färbbarkeit sich nachweisen. Ver- holzte Membranen, die sich in unverändertem Zustand gegen Schwefel- säure , Chlorzinkjod , Osmiumsäure , Fettfarbstoöe u. s. w. und oft auch hinsichtlich der Gelbfärbung in Kalilauge ähnlich wie kork- stoffhaltige Häute verhalten, verlieren diese Eigenschaften schon nach kurzem Aufenthalt in Eau de Javelle und geben die Reaction reiner Cellulosehäute. Verf. empfiehlt, das macerirte Gewebematerial mit Sudan HI oder Chlorzinkjod zu färben. Die Maceration mit Eau de Javelle macht nicht nur die groben Structureigenthümlichkeiten (Tüpfelung), sondern auch die Lamellenstructur der Häute sehr deut- lich. „Die Suberinlamellen legen sich unter dem EinHuss von Eau de Javelle öfters in kleine Falten und heben sich dadurch von den anliegenden Lamellen ab. Lässt man auf derartig modificirte Wände kalte Kalilauge einwirken, so treten die geschilderten Erscheinungen in noch stärkerem Grade hervor. Die Celluloselamellen quellen da- bei sehr stark, die Suberinlamellen werden mehr zerknittert und stärker von den angrenzenden Lamellen abgehoben, vielleicht weil sie zum Theil in Kaliumphellonat oder in eine andere in kaltem Wasser quellbare Kaliumverbindung übergehen. Auch die Bildung von Korkstoffseifen ist an Präparaten, die in der eben besprochenen Weise vorbereitet wurden , nach meinen Erfahrungen leichter zu er- möglichen, als durch einfaches Erhitzen der Endodermen mit Kali- XX, 1. Referate. 107 lauge." Es erapfielilt sich somit, die Kaliprobe v. Höhnel's mit der Maceration in Eaii de Javelle zu verbinden; das von v. Höhnel zu gleichen Zwecken an Stelle der Eau de Javelle angewandte Schulze- sche Macerationsgemisch scheint minder empfehlenswerth. — Zum Färben der korkstoff haltigen Lamellen ist Sudan III am geeignetsten ; besonders bei höherer Temperatur geben Lösungen des Reagens leicht die Farbe an die Membranen ab. Verf. machte gute Erfahrungen mit Lösungen in Alkoholglycerin ; das „Sudan- glycerin" wurde in der Weise hergestellt, dass 0"01 g Sudan III in 5 g 96procentigem Alkohol gelöst und der Solution 5 cc Glycerin zugesetzt wurden. Die Schnitte wurden in einem Tropfen der Mi- schung bis zum Sieden des Alkohols erhitzt, in Wasser ausgewaschen und in Glycerin eingelegt. Scliarlach R (Fettponceau) wurde gelöst in TOprocentigem Alkohol zur P^ärbung verwendet ; Anwendung von Lösungen in Glycerin ist nicht rathsam. Küster {Halle a. S.). Bargagli Petriicci , G. , Concrezioni silicee intracellu- lari nel legno secondario di alcune Dicotile- d n i [ I n t r a c e 1 1 u 1 ä r e K i e s e 1 a u s s c h e i d u n g e n im s e c u n d ä r e n Holze einiger D i k o t y 1 e d o n e n ] (Mal- pighia vol. XVII, 1903, p. 23). Die intracellulären Kieselablagerungen konnte Verf. gut mit der vom Ref. empfohlenen Phenolprobe sichtbar machen. Auch der im Innern der Kieselkörper enthaltene „Kern" von abweichendem Licht- brechungsvermögen wird auf diese Weise deutlich. Küster {Halle a. S.). Miyake, K. , On the development of the sexual organs and fertilization in Picea excelsa (Ann. of Bot. vol. XVII, 1903, p. 351). Zum Fixiren des im Titel genannten Materials benutzte Verf. die concentrirte FLEMMma'sche Mischung. Zum Färben diente Flem- ming's Dreifarbengemisch — zuweilen wurde ohne Safranin gefärbt. Küster {Halle a. S.). Allen , eil. E., The early stages of spindle formation in the pollen-mother-cells of Larix (Ann. of Bot. vol. XVII, 1903, p. 281). Die männlichen Blüten von Larix wurden im Herbst , Winter und Frühling untersucht , das Material entweder sofort nach Ent- 108 Referate. XX, 1. nähme vom Baum tixirt oder erst 24 Stunden in einem warmen Raum belassen. Flemming's Fixirungsgemisch und Färbmethode gaben gute Resultate. Küster (Halle a. S.). Osterhout, W. J. V., Cell studies I. Spindle formation in Agave (Proceed. California Acad. of Sei. Ser. 3 Bot. vol. II, 1902, no. 8). Verf. arbeitete mit nicht weniger als 40 Fixirungsflüssigkeiten, von welchen er Flemming's concentrirteres Gemisch als das em- pfehlenswertheste erkannte. Gute Resultate Hessen sich ferner er- zielen mit einprocentiger Lösung von Iridiumchlorid , Platinchlorid und Palladiumchlorid und mit einer chromsäurereichen Modification des FLEMMiNo'schen Gemisches , das nach folgendem Recept ange- fertigt wurde: *o' Chromsäure, Tprocentig 8 cc Osmiumsiiure, 2prucentig 2 „ Eisessig 0-5 „ In mehreren Fällen erwies sich Keiser's Sublimat -Essigsäure als brauchbar. — In einigen Fällen , die mit den genannten Fixirungs- gemischen keine befriedigenden Resultate erzielen Hessen, wandte Verf. ein Gemisch nach Flemming ohne die übliche Essigsäure an oder behandelte die Objecte erst mit Jodjodkalium (Jodkali 0*5 g, Jod 1 g, destillirtes Wasser 1000 cc), bevor sie in Flemming's con- centrirtere Lösung übertragen wurden. — Verf. verglich die leben- den Objecte mit den fixirten, um die eventuelle Entstehung von Kunstproducten zu controliren. Bei manchen Fixirungsflüssigkeiten musste die Aufenthaltsdauer in den Fixirungsflüssigkeiten abgekürzt werden, um die Bildung von Kunstproducten zu verhindern. Uebrigens sind die Zellen nicht zu allen Zeiten und in allen Entwicklungs- stadien gegenüber den Fixirungsflüssigkeiten gleich „empfindlich", was Schrumpfen und Entstehung von Kunstproducten anbetrifft. Am empfindlichsten sind die Zellen zur Zeit der Spindelbildung; weniger empfindlich sind sie nach Fertigstellung der Spindeln, die Empfind- lichkeit nimmt während der Anaphase ab. Pollenmutterzellen sind sehr empfindlich unmittelbar nach der Tetradentheilung , ruhende Zellen sind am unempfindlichsten ; je grösser die Plasmaanhäufung in den Zellen, um so geringer im allgemeinen ihre Empfindlichkeit. Der Kern ist im allgemeinen widerstandsfähiger als das Cytoplasma. Hinsichtlich der verschiedenen Stadien der mikrotechnischen Vor- XX, 1. Referate. 109 bereitung verdienen bezüglich der Entstehimg von Kunstprodiicten das Auswaschen der Objeete und die Durchtränkung mit Oel die meiste Beachtung: bei allzu langer Dauer dieser Processe treten leicht St(")rungen ein. — Besondere Sorgfalt wandte Verf. dem Ent- wässern seiner Präparate zu. Aus Alkohol wurden die Objeete in Bergamottöl übertragen , in diesem vorsichtig gewärmt und dann in 43" Paraffin (auf 12 Stunden) verbracht, hiernach in Paraffin von 52°, 60° oder 72° Schmelzpunkt. Küster {Halle a. S.). Fraeiikel, C, üeber den Gefässbündelverlauf in den Blumenblättern der Amaryllidaceen (Beih. z. Botan. Centralbl. Bd. XIV, 1903, p. 63). Um die Gefässbündel der Blumenblätter deutlich zu machen, legte Verf. diese in .50procentigeu Alkohol. Wenn dieses Verfahren nicht genügte , wurden die Blätter aus dem Alkohol auf 2 Stunden in eine wässerige Fuchsinlösung verbracht, alsdann in ein Gemisch von 1 Th. gesättigter alkoholischer Pikrinsäurelösung und 2 Th. Wasser. Hierauf wurden sie durch absoluten Alkohol und ein Ge- misch Alkohol -f- Xylol in reines Xylol übertragen, dem Verf. ein Paar Körnchen geschmolzenes Chlorcalcium beigab. Nach 24stündigem Aufenthalt im Xylol waren die Blätter völlig durchsichtig und ihre Ge- fässbündel als rothe Linien zu erkennen. Küster (Halle a. S.). Irgang, G., Ueber saft ausscheidende Elemente und Idioblasten beiTropaeolummajus (Sitzber. d. k. k. Acad. d. Wiss. Wien. Math.-Naturwiss. Gl. Bd. CXI, 1902, Abth. I, p. 723). Die schleimführenden Idioblasten in der Epidermis von Tropaeo- lum majus färben sich mit Kali- oder Natronlauge gelb ; Alkohol bringt in ihnen ein feinkörniges, schwach violett gefärbtes Gerinnsel zum Niederschlag. Alkoholmaterial, das in 25 procentiger Kupfer- sulfatlösung etwa eine halbe Stunde gelegen hat und nach kurzem Auswaschen in Wasser mit Kalilauge behandelt wird , zeigt blau gefärbte Idioblasten (A. Meyer's Schleimreaction) ; das übrige Gewebe färbt sich violett. Auch mit Hämatoxylin, Anilinfarben u.a. lassen sich die Schleimzellen gut sichtbar machen. Käster (Halle a. S.). Murbeck, S., ParthenogenetischeEmbryobildung Inder Gattung Alchemilla (Lunds Univ. Arsskr. Bd. XXXVI, Afd. 2, No. 7, 1901). 110 Referate. XX, 1. Als Fixirimgsmittel wurcleu vorzugsweise ein stärkeres und schwächeres Gemisch nach Flemming benutzt (15 Voll, eiuprocentige Chromsäure, 4 Voll. 2procentige Osraiurasäure, 1 Vol. Eisessig, be- ziehungsweise 0*25 Procent Chromsäure, O'l Procent Osmiumsäure, O'l Procent Eisessig), — ausserdem Keiser's Sublimat-Eisessig-Gemisch und absoluter Alkohol. Bei Untersuchung früherer Entwicklungsstadien wurden die mit Chrom-Osmium-Essigsäure fixirten Objecte verwerthet. Bei Untersuchung des entwickelten Embryosackes waren wegen der verholzten inneren Schichten derFruchtknotenwaudung die mit Sublimat- Eisessig fixirten Materialien besonders werthvoll. Alkohol rief meist beträchtliche Schrumpfung des wasserreichen Nucellus hervor. — Beim Färben verfuhr Verf. nach Zimmermann's Safranin - Gentiana- violett- Methode, mit der Modification , dass die Schnitte nur für eine halbe Minute in die GRAM'sche JodjodkaliumliJsung getaucht wurden. Schnitte von dem nach Keiser tixirten Material wurden nach Zimmermann mit Fuchsin und Jodgrün gefärbt, welche bei einer Tinctionsdauer von nur 8 bis 10 Minuten durchgehends besonders gute Resultate ergab. Das Alkoholmaterial musste dagegen in der Farblösung eine halbe bis eine Stunde bleiben , wenn eine halb- wegs gute Farbendifferenzirung eintreten sollte. Küster {Halle a. S.). JE, 3fineralogisch- Geologisches. Referent: Professor Dr. B. Brauns in Oiessen. Becker, A., Krystalloptik. Eine ausführliche elemen- tare Darstellung aller wesentlichen Erschei- nungen, welche die K r y s t a 1 1 e in der Optik darbieten, nebst einer historischen Entwick- lung der Theorien des Lichtes. Stuttgart (Enke) 190;3; 362 pp. m. 106 Figg. Die Krystalloptik findet in fast allen Fällen — so führt Verf. im Vorwort aus — ihre ausschliessliche Erledigung in einigen Ab- schnitten grösserer Lehrbücher der physikalischen Krystallographie und der Experimentalphysik. Während im einen Fall nur die noth- wendigsten Bedürfnisse der Mineralogen befriedigt werden, ist es im anderen nur ein mehr oder weniger ausgewählter Ueberblick für XX, 1. Referate. 111 Naturwissenschaftler im allgemeinen. Eine umfassende Darlegung sämmtliclier Erscheinungen auf diesem Gebiet mit Berücksichtigung aller der mannigfaltigsten Erklärungsversuche , die im Laufe des vorigen Jahrhunderts ausgedacht wurden und theilweise durch ihren Eintluss auf viele Disciplinen der Physik eine grössere Bedeutung erlangten, lässt sich dabei vermissen. Das vorliegende Buch bezweckt diese gleichmässige Vereinigung von Erfahrung und Theorie , um sowohl dem Praktiker das Verständniss der theoretischen Arbeiten auf diesem weiten Gebiete als auch dem Theoretiker einen über- sichtlichen Einblick in alle die verschiedenartigsten Erscheinungen zu erläutern. Der Inhalt gliedert sich in folgende Kapitel : 1) Gerad- linige Polarisation (erläutert au Turmalin , wobei aber zu bemerken ist, dass nur die wenigsten Turmalinkrystalle zu diesen Versuchen brauchbar sind). 2) Wellenflächen. 3j Chromatische Polarisation. 4) Circulare und elliptische Polarisation, b) Drehung der Polarisa- tionsebene. 6) Lamellare Polarisation. 7) Absorption in Krystallen. 8) Reflexion des Lichtes. 9) Optische Krystallanalyse. 10) Pola- risationsapparate. 11) Theorien des Lichtes. Während die meisten Abschnitte dem jetzigen Standpunkte der Wissenschaft entsprechend behandelt werden — der Ausdruck dürfte auch hier manchmal präciser sein — ist Alles, was über optische Anomalien der Krystalle gesagt wird , ungenügend , der Verf. steht hier ungefähr auf dem Standpunkt des Jahres 1855. Die Anomalien werden auf dem zwei Seiten starken Kapitel VI, „Lamellare Polari- sation", behandelt und hier Beobachtungen von Biot, Reusch und Marbach kurz angeführt. Im Kapitel IX, „Optische Krystallanalyse", heisst es bei den einfach brechenden Krystallen : „Sind die Krystalle mit Lamellarpolarisation behaftet, so zeigen sie eigenthümliche Felder im Gesichtsfeld, die sofort Klarheit über die Erscheinung geben (!). Ein Schnitt in anderer Richtung durch den Krystall verändert das Bild, desgleichen convergentes Licht, gewisse Hyalithe (!), Alaune etc." „Die regulären Krystalle von Boracit und Senarmontit zeigen im convergenten Licht das Bild zweiachsiger Krystalle , was nach den verschiedenen Richtungen sich wesentlich ändert ; es rührt das- selbe her von eingelagerter doppeltbrechender Substanz , dem un- durchsichtigen (!) Parasit." Dass die Borazitsubstanz dimorph ist und die Doppelbrechung bei 265*^ verschwindet, dass in Alaun und Bleinitrat die Doppel- brechung durch isomorphe Beimischung hervorgerufen wird und vieles andere scheint dem Verf. unbekannt geblieben zu sein. — Aber 112 Referate. XX, 1, aiich andere Angaben sind nnrichtig oder zum mindestens unklar. Z. B. wird für rhombische Krystalle p. 248 angegeben, „es tritt nur horizontale Dispersion auf", während rhombische Krystalle doch nur Dispersion der optischen Achsen besitzen. Was über die Auslöschung bei monoklinen Krystallen gesagt wird, ist unklar, das Wort „schiefe Auslöschung" ist fett gedruckt, das Wort „gerade Auslöschung" kommt nicht vor. — Bei Benutzung in der zur optischen Bestimmung der Krystalle dienenden Tabelle würde man die Zwillingskrystalle, soweit sie im polarisirten Licht die Zwillingsbildung erkennen lassen, bei den regulären Krystallen mit Lamellarpolarisation unterbringen, das Verhalten der Zwillingskrystalle wird nicht besonders berück- sichtigt. — Im Kapitel X, „Polarisationsapparate", werden zunächst die verschiedenen Polarisatoren, darauf die Polarisationsapparate be- schrieben. Wenn hier von einem Polarisationsapparat für conver- gentes Licht gesagt wird, er unterscheide sich von einem Mikroskop im wesentlichen nur durch den Besitz von zwei Polarisationsprismen, so erhebt man unwillkürlich den Einwand, das Wesentliche für ein Mikroskop sei doch Objectiv und Ocular. Das für krystalloptische Untersuchungen eingerichtete Mikroskop wird überhaupt nicht er- wähnt, dagegen das selten zu benutzende Polarispektromikroskop, die Polarisationsphotometer und Saccharimeter. Unter den Refractometern vermisst man das mit Halbkugel versehene Krystallrefractometer. — Wenn Verf. in seinem Vorwort gegen die grösseren Lehrbücher der physikalischen Krystallographie den leisen, nach Ansicht des Ref. völlig ungerechtfertigten Vorwurf erhebt, dass sie nur die noth- wendigsten Bedürfnisse der Mineralogen befriedigten und von seinem l^uche rühmt, dass es eine gleichmässige Vereinigung von Erfahrung und Theorie bezwecke , so kann man wohl sagen , dass die noth- wendigsten Bedürfnisse der Mineralogen hier nicht so vollkommen befriedigt sind , und dass das Werk nur gewinnen und dem ange- deuteten Zweck voll entsprechen kann, wenn sich mit der Theorie noch mehr Erfahrung vereinigt. R. Brauns. XX, 1. Neue Literatur. 113 Neue Literatur. 1. Lehr- und Handbücher. Bagshaw, W., Elementary photomicrography. London 1902, 70 pp. w. 6 pltes. Grünberg, V., Zur Theorie der mikroskopischen Bilderzeugung. Leipzig (Barth) 1903. 90 pp. S». m. Figg. 3 M. Kaiserling, C, Lehrbuch der Mikrophotographie nebst Bemerkungen über Vergrösserung und Projection. Berlin (Schmidt) 1903. 179 pp. 8'*. m. 54 Figg. 4 M. Lindner, P., Atlas der mikroskopischen Grundlagen der Gährungskunde. Berlin (Parey) 1903. 111 Tfln. 8». 19 M. Möbius, M. , Botanisch-mikroskopisches Prakticum für Anfänger. Berlin (Bornträger) 1903. 8». m. 12 Figg. 2-80 M. Strelil, K., Grundzüge der optischen Abbildung. Erlangen (Junge) 1903. 34 pp. 8'\ m. 1 Tfl. 1-20 M. 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. a. Objectiv. Everett, J. D., Contributions to the theory of the resolving power of objectives (Proceed. Phys. Soc. London vol. XVIII, 1902, p, 225). Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 1. 114 Neue Literatur. XX, 1. b. Stativ. Swift's „Ariston" fine adjustment (Journ. R. Microsc. Soc. 1902, pt. 6, p. 698). c. 3Iikrometer. (Ives, F. E.,) Method of measuring objects in the microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1902, pt. 6, p. 704 ; vgl. Journ. Franklin Inst. vol. CLIV, 1902, p. 73). Shaw, P. E., Electrical method of taking microscope measurements (Journ. R. Microsc. Soc. 1902, pt. 6, p. 625). d. Spectralaijparate. Wadsworth, F. L. O., The theory of the ocular spectroscope (Mise. scient. pap. Alleghany Obs. n. s. no. 6. — S. A. 10 pp.). e. Polarisationsapparate. Leiss, C. , lieber eine Verbesserung an der Polarisationsvorrichtung von Mikroskopen (Tschermak's mineral. u. petrogr. Mittheil. Bd. XXI, 1902, p. 454). f. Verschiedenes. Bourguet, A., Nouveau dispositif permettant d'eviter l'ecrasement des preparations microscopicjues par le fait de leur mise au point prati- quee avec les forts grossissements (Bibliogr. Anat. t. XI, 1902, fasc. 1, p. 1). XX, 1. Neue Literatur. 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Daus le second cas, — Tarret agit au poiut d'application meme de la force , ce qui met ä Tabri tous les organes de transmissiou du mouvement. Le second Systeme eilt donc ete certaiuement preferable, s'il n'y avait qu'une seule vis de mise eu mouvement du tube. Mais comme tout microscope en possede deux: une pour descente rapide et l'autre pour un avancement tres faible, Tapplication simultanee de Tarret sur chacune d'elles compliquerait singulierement la Solution. Force donc est de nous eu tenir au premier Systeme. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 2. 9 130 Gelblum: Dispositif d'arret du tube a tirage. XX, 2. I xl J? ? Celui-ci dans ses parties essentielles coraprend un arret 1 porte par la piece en mouvemeut, — le tube 2 — , et le buttoir 5, fixe sur la platine 4] fig. 1. Pour que ce Systeme d'arret puisse etre utilement applicable aux microscopes, il faiit qu'il remplisse les trois coiiditions suivantes: 1*^ II doit etre independant de la Variation de la longuenr du tube. Celle-ci «'est pas rigoureusement constante, attendu que le tube se compose de plusieurs pieces ajustees eusemble. Or la distance frontale etant de quelques diziemes de mm a peiue, pour de forts grossissements , rien que le serrage a fond plus ou moins complet de la mon- ture , lors du rechange de Fobjectif 5 peut deja rendre illusoire Tefficacite de Farret. Pour eliminer cette cause d'erreur et reudre la distance d entre Tarret et l'extremite inferieure du microscope rigou- reusement constante , malgre Tentreraise des revolvers porte- objectifs, etc., il faut que V arret soit porte par l'ohjectif meme, dont il a ä sauvegarder ZZl la lentille. 1. 2^ L'arret doit etre, de plus, independant de Tepais- seur de la preparation et de celle des verres. Autremeut dit, il doit etre a course variable suivant Tepaisseur de preparation avec ou sans verre. Car si l'arret ne pouvait etre regle que pour une hauteur de course h — e (fig. 1) correspondant ä certaine epaisseur c de la preparation, une Variation dans la dite epaisseur — en modifiant cette hauteur — aurait pour consequence, ou bien l'arret premature (et par suite Tempecbement de la mise au poiut), si la nouvelle epaisseur e' < e , ou bien l'arret ne pro- tegerait plus contre le contact eventuel de l'objectif avec la pre- paration — pour toute epaisseur e" > e. La modification qu'il faut apporter dans la disposition de la TS -^- Z/ "^ "1 XX, 2. Gelblum: Dispositif (l'arrr't du tube ä tirage. 131 üg. 1., ponr tenir compte de la difference d'epaisseur des pre- paratious, c'est de faire un des buttoirs a kaideur variable, en les constituant par uue vis et ecroii, voir fig. 2 et 3. L'arrangemeut de la fig. 2 est preferable : il permet de mettre larret k la hauteur voulue, uiruie quand Fepaisseur des preparatious ou des verres est inconnue. Toiitefois le pas de la vis doit etre clioisi ä ce qu'on puisse regier facilemeut cette hauteur au ^/j^^ de mm pres. 3^ II faut encore que l'arret s'adapte facilemeut a tous les objectifs et k tous systemes ou genres de microscopes. — Ä Z7 ^ 3. Ce resultat sera atteint, en faisant les arrets superieurs Inter- cJmngeahles, c'est-a-dire de sorte qu'on puisse en enlever facilement un quelconque d'un objectif donne , et le fixer sur un autre. Dans ce but, la monture des objectifs serait munie d'une saillie de forme appropriee, et sur laquelle viendrait s'ajuster la bague correspon- dante 1 (fig. 3 et 4) portant l'arret. Maniere d'operer. Comme je Tai fait remarquer plus haut, un tel Systeme d'arret fixe „a buttoir" risque fort dabiraer les or- ganes de transmission du mouvement, surtout la vis niicrometrique de haute precision, — tout au moins lä, oü le microspope est depourvu de certains dispostifs complemeutaires de securite.^ Pour se mettre 1) Dans ces derniers, c'est l'avertisseur ä sonnette electrique qui se 132 Richter: Diapositivwechsler von Carl Zeiss in Jena. XX, 2, k l'abri du tout danger de deterioriatiou , il taut proceder de la maniere suivaute. Mettre le buttoir a la hauteur voulue, egale a Tepaisseur des preparations , plus celle du verre ; abaisser le tube ä tirage , en agissaut sur le mouvement ä cremaillere jusqu'ä ce que l'arret se heurte contre le buttoir; alors seulement appliquer l'ceil sur Toculaire et mettre l'appareil a point, en le relevant par la vis micrometrique h haute precision. [Eingegangen am 14. October 1903.] Diapositivwechsler der optischen Werkstätte von Carl Zeiss in Jena. Von Edwart Richter in Jena. Hierzu zwei Holzschnitte. Mancher Vortrag erleidet durch die begleitende Vorführung von Lichtbildern eine Beeinträchtigung anstatt einer Förderung. Die Störungen entstehen meistens bei dem Wechseln der Diapositive^ denn die dafür gebräuchlichen Janrichtimgen setzen gewöhnlich eine gewisse Geschicklichkeit und Uebimg des Vorführenden voraus. Bei der Construction des im folgenden beschriebenen Apparates ist ver- sucht worden, jene Mängel zu vermeiden, um ein bequemes, störungs- freies und schnelles Wechseln zu ermöglichen. In dem freien Kaum zwischen Beleuchtungssystem und Objectiv ist eine drehbare Trommel derartig horizontal gelagert , dass ihre Achse in gleicher Höhe wie die optische Achse des Projections- presente naturellement k l'esprit, comme le moyen le plus simple de pro- tection applicable au.x microscopes pourvus du Systeme d'arret fixe. En eö'et, il suffit d'isoler le buttoir de la platine, le relier ä Tun des pöles du circuit de l'avertisseur electrique, et mettre l'autre pole en communication avec l'appareil, pour qu'au moment oü le tube parvient au bout de sa course, le signal se fasse entendre. XX, 2. Richter: Diapositivwechsler von Carl Zeiss in Jena. 133 systemes, jedoch rechtwinklig- zu dieser, liegt. Der Mantel der Trommel ist von vier, mit geeigneten Rahmen versehenen Oeffnungen durchbrochen. In den jeweilig oben befindlichen Rahmen wird das Diapositiv eingelegt, die Trommel dann soweit in der Pfeilrichtung gedreht, bis das Glasbild die senkrechte Lage einnimmt. Sodann können die von dem Beleuchtungssystem kommenden Lichtstrahlen dieses Bild, den Hohlraum der Trommel und die freie OefFnung des gegenüber liegenden Fensters der Trommel durchsetzen und sich im Objectiv vereinigen, wodurch (bei geeignet gewählten Abständen) das Diapositiv auf dem Schirm abgebildet wird. Während der Pro- jection des ersten Bildes wird das nächste Diapositiv in den jetzt oben befindlichen zweiten Rahmen eingelegt und darauf die Trommel 1. abermals um 90 *' weiter gedreht, dadurch gelangt das erste Bild in die horizontale Lage unter der Trommel und fällt heraus, zu gleicher Zeit tritt das zweite Diapositiv an die bisher vom ersten eingenom- mene Stelle , später folgen die anderen Bilder in gleicher Ord- nung nach. p]s erwies sich als vortheilhaft, den Rahmen die Gestalt von runden Tellern zu geben, die mit niedrigem Rand über einen kurzen Cylinderansatz der Trommel greifen, so dass die Teller sowohl leicht von der Trommel abgehoben , wie auch darauf gedreht werden können. Je ein Paar Federn F schützen die Teller gegen das Ab- fallen und markiren gleichzeitig ihre normalen Stellungen. Wegen zweckmässiger Anbringung der vier Teller wurde der Hauptkörper nicht als Trommel gestaltet, sondern erhielt die Form zweier, sich 134 Richter: Diapositivwechsler von Carl Zeiss in Jena. XX, 2. rechtwinklig- durchdringender Cylinder. Eine auf der Abbildung nicht sichtbare Feder markirt die Gebrauchsstellungen beim Umdrehen dieses Hauptkörpers. Das Herausfallen der in verticale Lage gelangenden Diapositive wird durch Riegel R verhindert, die sich vor die Bilder schieben. Es sind je zwei , einander gegenüber stehende , hebelartig geformte Riegel derartig vor jedem Teller angebracht , dass sie sieh um am Hauptkörper befestigte Achsen A drehen können. Jeder Riegel wird folgendermaassen bethätigt: ein in den abgebogenen Riegelarm ge- schraubter Führungsstift greift in eine Nuth am Umfange des fest- stehenden , radähnlichen Körpers U. Die Nuthen bilden auf dem Cylinder auf- und absteigende , in sich zurückfüiirende Curven. Die den Riegeln durch das Eingreifen in diesen Führungsnuthen er- theilten Bewegungen sind so abgestimmt, dass die gegen die Bild- mitte gerichteten Riegelenden den Platz für das Diapositiv frei XX, 2. liichter: Diapositivwechsler von Carl Zeiss in Jena. 135 geben, wenn der zugehörige Teller die obere horizontale Lage ein- nimmt. Sowie der llaiiptkörper in der Richtung gedreht wird, die durch die Form der beiden Handhaben H geboten ist, beginnen die beiden Hebelenden sich über den Rand des eingelegten Diapositivs zu schieben. Bevor das Diapositiv in die verticale Lage kommt, ist es vollkommen gegen Herausfallen gesichert. Beim weiteren Drehen bleiben die Hebelenden zunächst in der eingenommenen Stel- lung, erst kurz vor Erreichen der unteren horizontalen Lage des Tellers veranlasst eine entsprechende Curve der Führungsnuth das Zurückziehen der Hebelenden, dadurch wird dem Diapositiv die Auf- lage entzogen, es fällt tlach auf den mit einem dicken Filzlager gepolsterten Tisch. Während den folgenden beiden Vierteldrehungen verharren die Riegel in ihren Stellungen. Erst nachdem der Teller, abermals mit einem Diapositiv beladen, die obere horizontale Lage verlässt, wiederholt sich dasselbe Spiel. Jedes andere Hebelpaar nimmt bei gleicher Lage des zugehörigen Tellers eine gleiche Stel- lung ein. Der abgebildete Diapositivwechsler ist zum Aufsetzen auf eine prismatische optische Bank eingerichtet, der Fuss kann jedoch selbst- verständlich auch anders geformt werden. Wenn nicht zu besonderen Anordnungen für das Objectiv ein Träger gebraucht wird, ist es zweckmässig, den Wechsler so zu gestalten, dass das Objectiv un- mittelbar damit verbunden werden kann. Gewöhnlich treten die Bildträger abwechselnd an der rechten oder linken Seite des Apparates hervor, wodurch die Einführung und Herausnahme jedes zweiten Bildes unbequem wird, wenn man nicht bei jedem Wechsel auf die andere Seite treten, oder abwechselnd mit einem dort stehenden Gehülfen bedienen will. Vollkommenere Wechsel Vorrichtungen ermöglichen zwar das Bedienen von einer Seite, doch ist man dabei oft an eine bestimmte Seite gebunden. Dagegen kann dieser Diapositivwechsler mit gleicher Bequemlichkeit von be- liebiger Seite bethätigt werden ; auch fällt das störende und grösseren Platz beanspruchende periodische Hervortreten einzelner Theile, Avie eines Schiebers, fort. Da die Diapositive bei fast sämmtlichen anderen Einrichtungen zwischen engen Nuthen oder Leisten eingeführt werden müssen , ist , bei einigermaassen schneller Reihenfolge , ein gewisser Grad von Hebung nöthig, um im Halbdunkel ein Vorbeistecken und Zerbrechen der Bilder zu vermeiden. Dieses lästige und mühsame Suchen ist bei der neuen Einrichtung nicht erforderlich , denn beim Einlegen orientiren sieh die Bilder auf dem horizontal liegenden 136 Richter: Diapositivwechsler von Carl Zeiss in Jena. XX, 2. Teller leicht zwischen den Anschlägen L. Durch diese Anordnung- wird gleichzeitig ein anderer Missstand vermieden : wenn die er- wähnten Nuthen oder Leisten nicht sehr sorgfältig hergestellt sind, zerstören sie die um die Bilder geklebten Papier- oder Leinwand- streifen (die Maske). Einmal beschädigte Umkleidungen werden unter allen Umständen losgelöst und hemmen dann beim Einführen und Herausnehmen, schliesslich w^erdeu die Streifen ganz abgetrennt, was man unter solchen Umständen als Wohlthat empfinden kann. Wäh- rend bei den Einrichtungen älterer Construction jede Periode aus drei Manipulationen besteht, brauchen bei dem neuen Modell nur zwei einfache Handgrift'e ausgeführt zu werden, denn durch das Drehen des Handgritfes legt der Apparat selbstthätig das ge- brauchte Bild auf die Filzplatte ab. Die Fortnahme des Bildes von dem Tischchen kann zu beliebiger Zeit geschehen, ist also keine Voraussetzung des Wechseins. Die Bauart des Apparates zwingt den Vorführenden, um unbequeme Handhabung zu vermeiden, die Bilder nur an den Kanten anzufassen , dadurch werden die oft auch auf dem Projectionsschirm sichtbaren Fingerspuren auf den Glasflächen vermieden. Zur Ermöglichung des abwechselnden Projicirens von Hoch- und Querformaten waren bisher entweder zwei verschiedene Schieber vorhanden, die nach Bedarf ausgetauscht wurden, oder jedes einzelne Bild wurde in einen aussen quadratisch geformten Rahmen gesteckt, den man dann, der Bildlage entsprechend, einführte. Beide Behelfe sind langwierig, der erstere stört ferner noch durch das in der Zwischenpause auf dem Schirm erscheinende grosse, helle Feld. Die Anpassung des Formates geschieht bei der neuen Einrichtung durch einfache Vierteldrehung des Tellers. Schliesslich kann man den neuen W^echsler aucli für Diapositive verschiedener Grössen (innerhalb gewisser Grenzen) verwenden. Der in der optischen W^erkstatt von Carl Zeiss für allgemeinen Gebrauch hergestellte Wechsler ist für die Formate 9 : 12 , 8^/o : 10 und 8^/ les points de rac- cordement k la eanalisatiou des fils allant a l'etuve, CC le fil de A B A A ^ r\ } A Je cbauffe. Uu des fils de platine F du regulateur est relie ä la canalisation ; lautre fil de platine E est relie k l'une des extremites du fil de cbauft'e ; l'autre extremite du fil de cliautfe, a la canalisa- tion, Le radiateur C C et la colonne de inercure du regulateur sout donc en serie ; le courant de cbaufte traverse le regulateur ; il passe dans le radiateur quand il y a contact entre le fil de platine E et le mercure, et cesse de passer quand le contact cesse. A cbaque Interruption , il se produit une etincelle entre la pointe du fil de platine E et le mercure. XX, 2. Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-therinique. 147 2^ Regulateur en derivation. — Les comiexious sont, dans ce cas, un peu plus compliquees (schema, fig. 5), ä. cause de l'adjonction au regulateur d'uu relais electro-magnetique R. Le fil enroule autour de la bobine de l'electro-aimant aboutit aux bornes e et f. üne des extremites du fil de chauffe CO' est reliee en b a la canalisation, et Fautre extremite abontit a une troisieme borne g du relais. La quatrieme borne h du relais est reliee directement a la canalisation, en a. Entre les bornes g et h se trouve une piece mobile m de fer doux reliee en permauence h la borne h, et qu'un ressort tend k appliquer contre la borne g. L'un des fils de platine du regulateur est reliee a la borne h, et l'autre k la borne /"; la borne e est reliee au point c?, place entre la canalisation et le radiateur. Le courant qui actionne l'electro-aimant est donc derive du courant principal en h et d, et ce courant derive traverse le regu- lateur. L'electro-aimant et le regulateur sont donc disposes en serie l'un par rapport a l'autre, et en derivation par rapport au radiateur. Lorsqu'il y a contact entre le fil de platine E et le mercure, l'electro- aimant attire la piece mobile w, et le courant de chauffe est inter- rompu en 9; l'etincelle de rupture eclate entre la piece mobile et la borne g. Lorsqne le contact cesse entre le fil de platine E et le mercure , la piece mobile m est appliquee par le ressort contre la borne g et le courant de chauffe passe de nouveau dans le radiateur. Le courant derive qui actionne l'electro-aimant est tres faible (moindre que ^-^ d'ampere) , parce que le fil enroule autour de la bobine possede une grande resistance, et que cette resistance est encore augmentee par une lampe a incandescence (non representee dans le Schema) intercalee entre le fil de platine E et la borne e. L'etincelle qui eclate entre le fil de platine E et le mercure est donc tres petite. L'un et l'autre de ces deux modes de connexion du regulateur s'emploient dans les conditions suivantes. Lorsque l'etuve marche sur courant alternatif, et qu'elle ne consomme pas plus d'un ampere, le constructeur dispose le regulateur en serie avec le radiateur, parce que l'etincelle de rupture , eclatant dans le regulateur, a une duree tres breve, et qu'elle u'a pas d'inconvenients pour la solidite de cet instrument. Au coutraire , lorsque l'etuve , fonctionnant sur courant alternatif, consomme plus d'un ampere, les etincelles de rupture useraient ä la longue de fil de platine E. Lorsque l'etuve fonc- 10* 148 Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. XX, 2. D A A li £^ -y tioune sur courant continu , meme lorsque rintensite du courant est faible, les etincelles, au lieu d'avoir une duree tres courte, ont une longue duree et forment de petits arcs voltaiques, qui fondent le fil de platine, volatiliseut le mercure et mettent rapidement le regulateur hors d'usage. Dans ces deux derniers eas, on utilise le relais et on ne fait passer dans le regulateur qu'un courant derive extremement faible , produisant des etincelles insigni- fiantes. Le relais^ dont la description detaillee Importe peu ici , est place en dehors de Tetuve. ronctiounement. — Que le regula- teur soit dispose eu Serie ou en derivation par rai)port au courant de chautFe , son fonctionnement est toujours le meme. Le courant ne peut passer dans le racliaieur que s'il y a contact entre le fil de platine E et le mercure. Or le niveau du mercure, dans la brauche B C du regu- lateur , niveau dont les variations comman- dent ce contact, depend seulement de trois facteurs, dans un regulateur definitivement coustruit et ferme. Ces trois facteurs sont: l" les variations de temperature de l'hydrogene; 2^ Vinclinaison du regula- teur par rapport a la verticale ; 3 ^ la re- partition du mercure entre la poche O et le tube BCD. Etudions separement l'ac- tion de ces trois facteurs. 1 ^ Variations de temperature 6. d e r li y d r g e n e. — Supposons que le regulateur, mis en etat de fonctionnement, soit en place au centre de Tetuve, et fixe dans une position quelconque, teile qu'a la temperature du laboratoire (15^ par exeraple) le niveau du mercure dans la branche BC soit au-dessus du fil de platine E (fig. 6). On fait passer le courant. Le radiateur echautte l'air de l'etuve et l'hydrogene du regulateur. La pression h de Thydrogene augmente peu ä peu , et le niveau du mercure s'abaisse dans la branche B C. A un certain raoment, lorsqu'nne temperature deter- minee est atteinte au voisinage du regulateur, 50^ par exemple, le XX, 2. Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. 149 contact cesse brusqueraent eutre le fil de platine E et le merciire (niveaii ^", fig. 6). Des lors, le courant ne passe plus daiis le radiateur et l'atmo- spbere de l'etuve se refroidit de la peripherie au centre ; le refroi- dissement gagne Tliydrogene du regulateur et le mercure remonte dans la branche B C, jusqu'au contact du fil de platine E (niveau Jl, %• 6). A ce moment le courant est retabli. Desormais, et jusqu'a ce qu'on arrete le fonctionnement de l'etuve, le cycle des memes pbeuo- meues recommeucera indefiniment ; l'interruption du courant aura lieu automatiquement et periodiquement par le jeu du regulateur, toujours a la meme temperature. Pour des raisons qui seront expliquees ulterieurement, la tempe- rature toujours la meme, ä laquelle a lieu l'interruption du courant, est un peu plus elevee que la temperature , egalement toujours la meme, ä laquelle a lieu le retablissement. II y a donc un eeart, d'ailleurs tres minime, entre la temperature d'interruption et la tem- perature de retablissement. Si on observe les temperatures maxima et minima donnees par le thermometre , on constate generalement que la temperature maxima est atteinte un peu apres l'interruption et que la temperature minima est atteinte un peu apres le retablisse- ment ; il y a donc entre les temperatures extremes donnees par le thermometre, un ecart sensiblement constant, et un peu plus grand que l'ecart existant entre les temperatures d'interruption et de retablissement. Le laps de temps qui separe deux interruptious consecutives , celui qui separe l'interruption du courant de son re- tablissement, etc. sont sensiblement constants. Si au lieu de prendre la temperature de l'air , on prend celle d'une petite quantite d'eau, contenue dans un tube a essai pres du regulateur, le thermometre reste invariable (ä j\y^ de degre pres); la temperature qu'il indique correspond a la moyenne des tempera- tures de Fair. Lorsqu'on interrompt le courant en dehors de letuve, et quapres une Interruption d'une duree quelconque on le retablit, le regulateur fonctionne de nouveau exactement a la meme temperature que la premiere fois , et il en est toujours de meme quels que soient le nombre et la duree des arrets. 2^ Degre d' inclinaison du regulateui-. — La pres- sion de l'hydrogene reuferme dans l'ampoule du regulateur depend aussi de la ditference verticale de niveaux, c'est-a-dire de la hauteur 150 Regaud et Fouilliand: Eegulateur electro-thermique. XX, 2. de la colonne de mercure qui liü fait equilibre. Si ou aiigmeute la baiiteiir de la colonne mercurielle , on augnientera par cela meme la pression de hydrog^ne en diminuant son volume, et inversement. Or on arrive a ce resiiltat eu modifiant lincHuaison du regulateur. Lorsque le regulateur est vertical, la hauteur de la colonne de mer- cure et la pression de l'hydrogene sont ä leur maximum, le volume D '' J: '' /' ' !j / // I ri / " I '',1 ' /' /' ' - ' ' '. ■ ' ' ' ,' / / , I / '/ / ,- /-7^ V II , i. I [ / / ' I :fr \ " / ' / ' ' / ' / ' ' / ' ' \ '-' 1 >-ti T I I •y /' r /-' ' b { I" / / / / I ^ A ' '; ' -t—H- II I -^y ''/. I / la ^ KJ \\ , ^ — ^^ , — l at' ii X' -X 7. de ce gaz est ä son minimum , la difference verticale de niveaux entre la pointe du fil E et la surface du mercure dans la branche B C est aussi grande que possible , et la temperature a laquelle le contact cessera entre le fil E et le mercure ne pourra etre depasse. Si on incline de plus en plus le regulateur (fig. 7), en partant de sa Position verticale, il est clair qu'on diminue de plus en plus la hauteur de la colonne mercurielle ; en meme temps, la pression de l'bydrogeue diminue et son volume augraente ; le niveau du mercure dans la XX, 2. Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. 151 branche B C s'abaisse , atteint la jjointe du fil E, se rapproclie du coude C, jusqu'au moment oü une bulle d'hydrog^ne passera dans la branche CD, ce qui obligera l'operateur 5i remettre le regulateur en etat de fonetionnement. Pendant ce mouvement d'inclinaison, taut que le Hl E toucbera le mercurc, on pourra faire passer le courant dans le radiateur, et chauffer Tetuve h une temperature d'autant plus basse qu'une incli- naison i)lus prononcee aura rapprocbe davantage la surface du mer- cure de la pointe du fil E. Lorsque la surface du mercure toucbera juste la pointe du fil i?, la temperature d'interruption du courant sera exactement celle du laboratoire, et des que le fil E et le mer- cure auront cesse de se toucber , le courant ne pourra passer que lorsque la temperature du laboratoire se sera elle-meme abaissee. II resulte de tout cela que, par Tinclinaison du regulateur, on possede le moyen de regier l'interruption automatique du courant h une temperature aussi basse qu'on veut, pourvu qu'elle soit superieure a Celle du laboratoire et que, en redressant le regulateur, on peut elever la temperature d'interruption jusqu'ä un maximum qui est atteint lorsque l'instrument est dans la position verticale. Pratiquement decoule de la la regle suivante pour le reglage d'une de ces etuves : le regulateur ctant vertical, faire passer le courant et surveüler la temperature; des que le thermometre, place ä cöte du regidateur , marque la temperature voulue, in- cHner le regulateur jusqu'ä ce que le courant ne jmsse plus. 3 " R e p a r t i t i n du mercure e n t r e 1 a poche et 1 e tube. — La poche (r .peut contenir quelques centimetres cubes de mercure. On comprend aisement (pie , si on la vide completement dans la branche E C\ on eleve le niveau du mercure, et par con- sequent la temperature maxima a laquellp le regulateur peut fonc- tionner, et inversement. Des trois facteurs dont depeud la temperature d'interruption du courant et que nous venons d'etudier, le premier (variations de la temperature de l'hydrogene) est automatique et on l'utilise pour maintenir constante la temperature ; les deux derniers agissent ä la volonte de l'operateur et sont utilises pour elever ou abaisser jusqu'au degre voulu la temperature de l'etuve. Tel que nous venons de le decrire , ce regulateur interrompt le chauffage brusquement et en totalite. 11 est facile cependant de lui faire interrompre le chauffage progressivement et incompletement, d'une maniere comparable a ce qui se passe dans une etuve 152 Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. XX, 2. chautfee par une flamme de gaz , que le regulateur diminue mais u'eteint pas. II suftit pour cela d'employer un regulateur possedaut, au lieu dun seul fil de platine E^ plusieurs fils de platiue plantes au-dessous Tun de lautre et tres rapproches , et de relier ces fils de platine ä autant de circuits distinets disposes en paralleles. Povir des etuves a cultures, nous n'avons pas trouve qu'il soit notablement avantageux d'employer ce dernier dispositif, qui a rinconvenieut de compliquer la construction, surtout lorsque le regulateur est monte en derivation par rapport au radiateur. Un seul circuit de chauffe , dans lequel le courant est periodiquement interrompu en totalite est süffisant pour maintenir les oscillations d'un tliermometre tres sensible dans les limites d'un degre, la temperature moyenne restant, bien entendu, tont a fait constante. Seiisil)ilite. -■ — La sensibilite de ce regulateur depend de divers facteurs intervenaut dans la construction de liustrument. II y a lieu de distinguer deux modes de sensibiUte d'un tel regulateur : la rapidite avec laquelle l'instrument rcagit aux varia- tions de temperature de l'atmosphere de l'etuve , et la valevr de la denivellation du ynercure pour une varfation de tempera- ture de 1^. 1^ Le regulateur reagit d'autant plus rapidement aux varia- tions de temperature, que les echanges de calories s'efl^'ectuent mieux entre l'atmospliere de l'etuve et l'hydrogene. Les echanges de ca- lories s'effectuent d'autant mieux que la paroi de l'ampoule a hydro- gene est plus mince, et que la surface de cet ampoule par rapport k son volume est plus grande. La minceur de l'ampoule a, comme contre-partie, la fragilite. Le rapport entre la surface et le volume de l'ampoule est minimum lorsque celle-ci est splierique ; il grandit lorsqu'on lui donne la forme d'un cylindre de faible section et de grande hauteur; il est encore plus grand lorsque la surface de l'ampoule est cannelee. Pour un regulateur donne, la rapidite de reaction depend encore de la Position de Tinstrument dans l'etuve et de la distance qui le separe du radiateur. II Importe de remarquer aussi que les indi- cations fournies par le tliermometre, abstraction faite des qualites et des defauts de cet Instrument, dependent de la position (ju'on lui donne par rapport au radiateur et au regulateur. XX, 2. Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-theimique. 153 2® La valeur (x) de la denivellation du mercure, pour 1*^, depend du volume (V) de l'ampoule, de la section (s) du tube contenant le mercure , de la pression (h) de bydrogene , et de la temperature absolue (T = 273 -j- t^). Elle est donnee par la formule T 7+1 ^^^ D'oü l'on peut tirer la valeur d'uue quelconque de ces grau- deurs, counaissant toutes les autres. On trouve ainsi : j^ ^ sxT {h-\- 2x) h — 2xT ^ ' 2xT{V+sx) I'— V-sxT ^^■> ^ V(h — 2xT) * xT{h-^2x) ^^^ L'equatiou (1) etaiit ordonnee par rapport ä ./' devieiit : ^" + I ^ + 2/ '^" 2.? 7" — ' sa racine positive, seule admissible, est -i(^+i)+fi(^+iy+ x= — ^1-4-^1+ 1/ — I-+-I -1-27T- En calculaut les derivees de x par rapport aux quatre varia- bles independautes F, .s, h et T, ou trouve que les derivees par rapport a F et ä Ä sout positives, tandis que les derivees par rap- port ä s et ä T sont negatives. II en resulte que la valeur de x^ c'est-ä-dire Ja sensibilite de l'appareü, augmente lorsqii'on fait croUre V ouh, tandis qu'elle diminue lorsqu'on fait croitre s ou T. Ces conclusions pouvaient d'ailleurs, au moins en partie, etre prevues a priori. Voiei quelques exeraples numeriques : ^'aleurs de x pour diverses valeurs de F, Ä, .s et T. 154 Regaucl et Foiülliand: Regulateur electro-thermique. XX, 2. 1^"^ Tableau, pour T= 273 + 12. V h = 75 cm Ii = 35 cm s = 0*5 qcm ^ = 1 qcm s = 0-5 qcm ^ = 1 qcm 50 cc 100 „ 150 „ 1 mm 1-15 „ 1-22 „ 0-75 mm 1 1-14 „ 0-52 mm 0-56 „ 0-58 „ , 0-50 mm 0-55 „ 0-57 „ 2« Tableau, pour T = 273 + 57. V h = ^ '5 cm ^ ^ 35 cm s = 0'5 qcm * = 1 qcm s = 0-5 qcm ^ = 1 qcm 50 cc 100 „ 150 „ 0-82 mm 1-01 „ 1-06 „ 0-65 mm 0-91 „ 0-99 „ 0'45 mm 0-50 „ 0-52 „ 0-39 mm 0-48 „ 0-50 „ On peut doiiner a ce regulateur diverses formes , en rapport avec l'usage particulier auquel il est destine. Nous (8, 10) l'avons dejä adapte k la regnlation d'un bain-marie electrique : dans ce cas, le reservoir ä hydrogene est horizontal et plonge completement daus le bain, tandis que le tube a mercure fait saillie hors du bain. III. Details divers de construction. Parois des ^tlives. — La chaleur produite par la transfor- mation de l'energie electrique est d'une utilisation extremement facile pour tous usages ; eile n'a qu'un inconvenient , c'est sou prix de revieut , qui est tres eleve relativement a celui des autres sources usuelles de chaleur, Le chauffage interieur des appareils , reudu possible par l'absence de tout produit de combustion ä elirainer, compense deja le coüt eleve de ce mode de chauffage. On peut XX, 2. Regautl et Fouilliaiul: Kegulateur electro-thermi(|ue. 155 (ce qiü est tres facile) rendre le cliniiffage electrique aussi economi- que qii'uu autre quelconque, en angmentant l'athermam'iU des parois. Ce resultat est trautant plus aise a obteiiir qu'on peut employer dans la constrnction dos appareils des materiaiix niaiivais conducteurs de la clialeur, sans avoir ä se preoccuper de leur combiistibilitö. Les parois de la graude etuve (fig. 1) soiit coustituees par deiix epaisseurs de bois leger, ime coiielie d'uuate (ou de plume) dans riutervalle, et nn revetement Interieur \ itre. Le meuble, peint en noir, est cire exterieurement. Dans ces conditious, lorsque Fatmo- spliere intrrieure est cliauftee a 31)'^, la clialeur est inappreciable sur la paroi exterieure et la deperdition de chaleur est tont n fait miniuie. Cette etuve possede un double Systeme de portes : des portes interieures, a coulisses, au nombre de six,' sur trois rangs, et vitrees 5 des portes exterieures, ä charniere, pleines ou vitrees. Les portes exterieures etant ouvertes, on peut n'ouvrir qu'une seule des six portes a coulisses, celle qui correspoud a l'objet que Ton veut in- troduire ou retirer. Les etuves plus i)etites (iig. 2) sont entierement vitrees sur les quatre faces laterales ; il y a sur cliaque face deux vitres separees par un Intervalle de deux centimetres. Ces etuves peuvent etre recouvertes d'un manteau en feutre, tixe ou mobile, qui augmente l'athermaneite et met, dans les cas oü c'est necessaire , l'iuterieur de l'etuve dans l'obscurite. La grande etuve (fig. 1) possede un dispositif de Ventilation consistant en une paire de grilles (J, /) et une paire de cheminees {D, D). Grilles et cheminees sont ouvertes ou termees h volonte. Anienaj^ement interieiir. — Dans les petites etuves (tig. 2) il n'y a pas de rayonnages. Le planclier est constitue par une plaque metallique percee de trous (pour le passage de l'air chaud proveuant de la partie du radiateur sous-jacente au plancher) ; le regulateur est supporte i)ar le plancher; la tige qui sert a Tincliner et k le redresser, se termine exterieurement par un bouton (C), qu'on tourne dans un sens ou dans l'autre, pour le reglage. Daus les grandes etuves, il y a six (ou huit) rayons metalliques perces de trous, mobiles sur des cremailleres metalli(iues. Ces rayons sont legerement evides sur leurs bords qui correspondent aux spires du radiateur. Le regulateur est »suspendu par son milieu au niuyen d"une fourche fixee au plafond. Le courant arrive en Ä- un commuta- 156 Regaud et Fouilliand: Regulateiu' electro-tlierinique. XX, 2. teur B permet de linterrompre , et d'eclairer ou uon la lampe rheoscopiqiie N. Lampe rheoscopi«xue. — Sous ce uom, uoiis designons uue petite lampe de faible voltage, suseeptible d'etre intercalee dans le circuit de cbautfe, soit au moyeu du commutateur B (fig. l), soit par pression sur un boutou exterieur B (fig. 2). Aiusi intercalee, cette lampe s'allume lorsque ie courant passe dans le radiateur et s'eteiut ä chaque Interruption automatique : on se sert de cette lampe non pour eclairer l'interieur de l'etuve, mais pour operer la regula- tion ; son extinction avertit que le contact a cesse entre le fil de platine E et le mercure (fig. 3). L'eclairage est assure par une lampe electrique ordinaire {M, ■^ W ^ w .^^ fig. 1). Coupe circuit automa- tique (J, fig. 1). — Ce petit instrument (fig. 8) est con- stitue par un bout de tube a essai, en verre mince, etrangle pres de son extro'mite close. Au-dessus de I'etranglement est un bouchon de paraffine (B) , fusible au degre auquel doit fonctionuer le coupe cir- cuit. Ce bouchon de paraf- fine Supporte une petite quan- ^- tite de mercure (A) dans lequel plougent deux fils de fer (jui traversent le boucbon de caoutchouc du tube. Les fils de fer sont intercales sur le circuit de cliaufte. Le mercure etablit le con- tact. Lorsqu'une cause accidentelle quelconque eleve la temperature de l'etuve au-dessus du degre de reglage, la paraffine fond, le mer- cure tombe dans la boule (C), et le courant ne passe plus. Ce petit instrument evite ainsi completement les accidents de surchaufi'age qui pourraient etre nuisibles aux cultures. IV. Resultats pratiques. Nous devons considerer les resultats obtenus : vue des qualites de la temperature Interieure : — vue de la depense d'electricite. I^ au point de 2° au point de XX, 2. Reg'aud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. 157 1*^ Qualite de la temperature interieure. — On doit demander :i iine etuve les qiialites suivantes : A. Co)istance de la temperature moyenne en im 'point donne ; B. Ecart periodique cmssi petit qice possihle de part et d'autre de kl moyenne; C. Homogerieite de la temperature dans les diverses regions. — A) La temperature moyenne en iiii point donne sera indi(iuee par un bon thermometre gradue en dixiemes de degre , dont la cuvette plonge dans une masse deau suftisante (25 cc par exemple) pour que sa capacite calorique rende insensible au thermometre les faibles variations de temperature de l'air ambiant. La fixite de la temperature moyenne, e'est-a-dire son maintien au meme degre indefiniment , est evidemment une fonction du regu- lateur. Cette fixite est realisee lorsque le mercure et l'hydrogene employes dans la construction de cet instrument sont parfaite- ment purs. ^ > Avec un regulateur bien construit, la temperature moyenne reste iudefiniment fixe, a la condition , bien entendu, qu'on n'ait pas modifie la position du regulateur soit directemeut (en le redres- sant ou en rinclinant) soit indirectement en changeant de place l'etuve , si eile repose sur une surface (table, plancher) imparfaite- ment horizontale. B) Tandis que la temperature moyenne precedemment definie reste fixe, la temperature de Vair, donnee par un thermometre egalement gradue en dixiemes de degre, suspendu dans l'air, subit des variations periodiques. Elle oscille de part et d'autre d'une temperature moyenne, et ces oscillations ont une amplitude egale. La cause de ce ijhenomene reside avant tout dans la discon- timnte'du cliauffage. Lorsqu'il n'y a qu'un seul circuit de chautfe, lui-meme sous la dependauce du regulateur , le courant est alter- nativement interrompu et retabli, d'oü variations notables de tempe- ') Lorsqu'il reste dans le regulateur, apres sa fermeture, un peu d'oxygene, ce gaz se corabine peu ä peu ä l'hydrogene, avec formation de vapeur d'eau , d'oü resulte une diuiinution lente du volume du gaz de Tauipoule, et une ascension progressive de la temperature ä laquelle le courant est interrompu. L'elevatiun de la temperature tinit d'ailleurs par s'arreter. En refroidissant alors fortement ipar un jet de chlorure de methyle ou d'acide carbonique liquide, par exemple) l'ampoule du regula- teur sorti de Tetuve, on voit la vapeur d'eau furmee se condenser sous forme de buee dans l'ampoule ä hydrogene. 158 Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. XX, 2. ratiire au voisinage du radiateur. variations qui se trausmetteut au regulateur et au tliermometre. Comme d'autre part la surface de chaufte (peripberie de l'etuve), le regulateur (centre de Tetuve) et le tbermometre occupent dans l'atmosphere de l'etuve des emplaeements differents separes par des distances plus ou moins grandes , les variations de te?npe?'ature entre le radiateur , le thermometrc et le regulateur ne sont pas transmises instantanemeiit. Negligeons Templacement du tliermometre et ne considerons que les emplaeements du radiateur (peripberie) et du regulateur (centre de Fetuve). Lorsque le regulateur vient d'interrompre le courant, le ül metallique du radiateur commeuce imraediatement a se refroidir : le refroidissement progresse de la peripberie vers le centre de l'etuve, et n'atteint l'bydrogene du regulateur qu'un certain temps apres la cessation du contact. Lorsque l'bydrogene du regulateur s'est re- froidi suftlsamment, le contact est retabli dans le regulateur, et le courant passe de nouveau dans radiateur. Celui-ci s'ecbauffe, et le recbautfement progresse de la ixTipberie au ceutre de l'etuve, atteint au bout dun certain temps l'bydrogene du regulateur, et ensuite le courant est de nouveau interrompu. Bref, il y a dans l'etuve uue succession d'ondes de refroidissement et de recbautfement qui cbe- minent alternativement entre le radiateur et le regulateur. II ne peut donc pas y avoir coincidence constante entre les temperatures de Fair au voisinage du radiateur et au voisinage du regulateur, et il est absolument impossible de supprimer l'ecart des temperatures indiquees par le tbermometre , quelle que soit la position qu'on donne a ce dernier. Mais il Importe de reduire cet ecart au, miuimum. L'amplitude de Fecart depend elle-meme de plusieurs conditious. La sensibilite du 1'egidateur, la. sensibilite du thermometre, la distance separant le radiateur, le regidateur et le thermometre, Vabsence ou la jjresence de corps (par exemple des ballous pleins de liquide) possedant uue grande capacite calorique, la tempera- ture propre du radiateur et sa capacite calortque, le coefflciejit de deperdition de l'etuve, etc., influent sur la valeur de cet ecart. Nous avons fait des experiences qui demontrent avec precision la part de cbacun de ces facteurs dans ce pbenomeue complexe ; nous ne les rapportons pas , pour ne point allonger saus necessite ce memoire. En pratique, V ecart en question peut etre reduit ä quelques XX, 2. Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. 159 dixiemes de degrc, meme 'pour de grandes etuves comme celle qiii est representee i)ar l;i fig. 1. Voici le resultat obtenii daus uue experience avec l'une de ces etuves. 31 Mars 1901. — Teraperature du laboratoire : 17"5*^. — Tem- perature moyenne de ratmosi)here Interieure de l'etuve: .S7'9^. — Consommation electrique : 170 watts (1 amp. 46X116 volts, 5). Duree de la periode comprise entre deux retablissements successifs du coui'ant: 4' 50", se decomposaiit en: temps de passage du couraiit 2', et temps d'interruption 2' 50". Ecart periodique des temperatures , dans l'air: O'ö''. Interruption a 38°, retablissement du courant a 37*8*^. Apres l'interruption , le tbermometre (place a cote du regulateurj monte encore jusqu'ä 38*2°; apres le reta- blissement, il descend encore jusqu'ä 37*7°. Dans uue etuve chautfee par une flamme exterieure, avec inter- position d'une quantite considerable de liquide entre les deux parois metalliques , l'ecart periodique des temperatures de l'atmosphere de l'etuve n'existe pas , ou tout au moins est imperceptible avec un tbermometre ordinaire. Cela tient ä ce que le regulateur (regulateur ä membrane) agit en augmentant ou en diminuant lentement la quantite de gaz brüle, par consequent en proportionnant exactement le nombre des calories produites au nombre variable des calories perdues. Si Ton tenait absolument ä posseder une etuve electrique dans laquelle les ecarts en question seraient tres reduits , on pour- rait recourir a Tun des moyens suivants : a) Adjonction ä l'etuve, construite comme Celles que nous venons de decrire , d'un agitateur d'air (ventilateur a helice). L'agitation permanente de l'atmospbere de l'etuve supprimerait la cause d'ecart resultant de la distance qui separe le radiateur du regulateur et du tbermometre ; b) Decomposition du radiateur en deux circuits distincts , dont un serait independant du regulateur (chauftage permanent) et l'autre sous sa dependance (chautfage interraittent). Le cbautfage perma- nent doit etre insuffisant pour amener ä lui seul l'atmosphere de r etuve au degre voulu, mais il doit Ten rapprocher le plus possible ; comme la depense calorique d'une etuve est extremement variable, ä cause des ditferences de temperatures exterieures , de l'ouverture plus ou moins frequente des portes, etc. il faudra qu'on puisse faire varier (par exemple au moyen d'un rheostat), la quantite de chaleur degagee par le circuit permanent. Dans une teile etuve, le courant 160 RegaudetFouilliand: Regulateur electro-thermique. XX, 2. intermittent aurait pour röle presque exclusif d'assiirer la regulation en compensant des pertes minimes de calories. c) Interposition d'une double paroi avec manchon liquide. II serait alors preferable d'iutroduire le radiateur dans le liquide de la double paroi. Pour aunihiler les effets düs a la distance qui separerait la surface chauflante du regulateur ä mercure et hydrogene, il serait avantageux de supprimer celui-ci et de profiter, pour la regulatiou, des variations volumetriques du liquide enferme daus la double paroi (celle-ci etant inextensible , et pouvant etre close her- metiquement). L'un de nous (16) a fait construire des appareils chautfes et regles par ce procede, et dont la precision est tout ä fait remarquable. Eu pratique et pour les besoins habituels de la culture bacterio- logique , la suppression du minime ecart thermique de quelques dixiemes de degre est tout ii fait inutile, d'aiitant plus que cet ecart n'est appreciable que dans Fair, et que la temperature d'une masse quelconque mise dans Vctuve (tube ou hallon de cidture , par exemple) est absolument invariable. C — L'homogeneite de la temperature dans les diverses regions de l'etuve est, par rapport aux deux precedentes, une qualite de second ordre : il est raoins important , en effet , que deux places n'aient pas tout a fait la meme temperature, pourvu que leur tem- perature soit connue et qu'elle ne varie pas. Nous nous sommes cependant efforces de realiser Thomogeneite du chauffage a quelques dixiemes de degre pres , dans toute l'etendue de Tespace utilisable des etuves, par une repartition convenable, d'ailleurs experimentale- ment determinee, du fil de chautfe. 2*^ Consommation d'electricite. — La consommaüon d'elec- tricite est proportionnelle au coefficient de deperdition de la paroi., ä la difference des temperatiires exterieure et interieure, et au renouvellement de l'air. Voici des exemples pratiques , relatifs aux deux etuves des fig. 1 et 2. i^*" exeinple. Grande etuve. ol Mars 1901. Temperature exterieure 17'5^, interieure o7*9*^. Consommation: 170 watts (1 amp., 46X116 volts, 5). Duree de la periode comprise entre deux retablissements suc- cessifs du courant 4' 50", se decoraposant en : temps de passage du courant 2' et temps d'interruption 2' 50" (raoyenne de 10 obser- vations consecutives). XX, 2. R e g a u d et F o u i 1 1 i a n d : Regulateur electro-thermique. 161 2' 41"4 Diiree du passage = ^^^, = j^- Soit im peil moins de 10 heiires par 24 heiires. Depense en 24 heures : 170 watts x 10 = 17 h. w. 2^ exetnpJe. — Petite etuve, nue. 14 Juin 1902. Temperature exterieure 19^, interieure 38*^. Consommation : 64 watts, 40 (0 amp., 56X115 volts). Diiree de la periode comprise entre deiix retablissements suc- cessifs du courant 5' 25", se decomposant en : temps de passage du courant 3' 15", et temps d'interruption 2' lO". ^ , , 3' 15" 60 Diiree du passage : ^^^, = ^^ soit 14'^ 24' par 24 heures. Depense en 24 beures : environ 9 b. w., 3. Lorsque cette etuve est recouverte d'une cberaise de feutre, la consommation est diminuee d'environ un tiers. II est interessant de comparer l'une a l'autre les deux etuves dont il est question daus les deux exemples precedents, au point de vue de l'atbermaneite de leurs parois. Les parois de la grande etuve comprennent de dedans en debors : une plaque de verre et deux plancbes de bois leger, de deux centim^tres d'epaisseur, sepa- rees par une coiicbe de plume de canard de deux centimetres. Les parois de la petite etuve sont formees de deux plaques de verre separees par ime coucbe d'air de deux centimetres. Lorsque les temperatures interieure et exterieure sont stationnaires, la quantite de cbäleur degagee par le radiateur est egale k celle perdue par l'etuve, en un temps donne. Dans la grande etuve ffig. 1 ) le courant fournit en une beure, dans les conditions de l'exemple cite V^ t Vit 116-5 X 1-46 X 3-600 X 0-414 ^^ ^^,, q cal. = rr^D = irr^ = tt^ = 60*792. ^ 4-17 R 4-17 4-17 L'etuve perd donc 60*792 calories par beure. 8a surface exterieure etaut de 37*456 qcm, cbaque centimetre carre perd r^^^.v^ ou 1*63 cal. par beure. Dans ces conditions, la ditference eutre les temperatures exterieure et interieure est de 20*4^. Zeitsehr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 2. 11 162 Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. XX, 2. Dans la petite etuve (fig. 2) , toujours daus les conditions de rexemple cite, le radiateur degage en iine heure : 115 X 0-56 X 3-600 X 0-6 oo oo > q cal. = j;y7 == 33-33»>. L'etuve perd donc 33*336 calories par lieure. Sa surface exterieure etaut de 9*722 qcm, cbaque eeiitimetre carre perd '^s-^ = 3*43 cal. par heure. Dans ces conditions, la difFerence des temperatures exterieure et Interieure est de 19". Par consequent le coefficient de deperdition calorique, c'est-ä- dire le nombre de calories perdues par l'unite de surface , dans l'unite de temps, pour une ditference de temperatures de l" est plus de deux fois plus considerable daus le cas de la petite que dans le cas de la grande etuve. Avantages des etuves electriques. — Les avantages des etuves que nous venons de decrire sont ji considerer au triple point de vue de la commodite , de la precision et de la depense de fonctionnement. Au point de vue de la commoditc , les etuves chautfees par des flammes (gaz , petrole , etc.) ne soutiennent evidemment pas la comparaison avec des etuves electriques : la proprete , la securite, Tautomatisme et la rapidite dans la mise en marcbe sont le precieux avantage de ces dernieres. La p7^ecision comporte , ainsi que nous l'avons dit , la fixite de la temperature moyemie et la reduction au mmimum des ecarts periodiques. Les regulateurs actuellement employes dans les etuves a gaz , a notre connaissance , ne permettent pas une tempe- rature moyenne rigoureusement fixe, pendaut un temi>s indefini, parce que ces Instruments portent en eux-memes des causes de dereglage spontane (deformations lentes de pieces metalliques ou autres , pour certains d'entre eux ; — encrassement du au gaz d'eclairage, etc.). Notre regulateur, au contraire , (lorsqu'il a ete convenablement construit et qu'il n'est pas traverse par un courant capable d'user le fil de platine au niveau duquel ont lieu les alternatives de con- tact et d'interruption) est susceptible de fonctionner indefininient a la meme temperature. — Quant aux ecarts periodiques , ils sont, nous l'avons vu , inevitables , mais peuvent etre reduits a quelques dixiemes de degre dans l'air. Parmi les regulateurs ä gaz , les XX, 2. Kegaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. 163 regulateiirs de d'Arsonval, ä membraiie, adaptes ä des etuves ä gaz a double paroi limitant un espace plein de liquide hermetiquement clos, permettent, il est vrai, de supprimer tont ecart periodique de teraperature. Nous avons coustruit uu regulateur electriciue tres simple fonctionnaut d'apres le meine principe (lö). Quant ji la depense de fonctionnement, c'est lä, en apparence, un obstacle a la diffusion des etuves electriques. En realite la depense est subordonnee au prix de revient de l'energie electrique, si different actuellement suivant les localites. 11 Importe d'ailleurs de remarquer que, si le prix de revient de la chaleur provenant de la transformation de l'energie electrique est eleve, eette chaleur peut eire, par contre, idilisee integndement, ce qui n'est pas le cas, bieu au contraire, de la chaleur produite par des flammes exte- rieures. En outre, dans le cas du cbauffage electrique interieur, oii peilt ttugmenter facUement, et presque autant qu'on le desire, V athermaneite des parois. Enfin l'automatisme absolu de la regulation et la rapidite du cbauffage (due j\ la faible capacite calorique) permettent autant d'interruptions qu'on le veut dans le fonctionnement d'une etuve electrique , sans qu'on ait k se preoccuper soit d'un nouveau reglage, soit du temps perdu pendant la mise en marche : dans ces conditions , une etuve electrique ne foyictioane que dans la stricte mesure des besoins. Nous croyons donc que la kitte dores et deja engagee entre l'electricite et le gaz d'eclairage, pour le cbauffage ä temperature constante des appareils de laboratoire, se terminera fatalement, plus ou moins tot, par la victoire de la premiere. V. Revue des travaux anterieurs sur le chauflfage et la regulation electrique des etuves. Nous avons donne , dans notre premier memoire (Journ. de Pkijsiol. et de Path. gmer. t. II, 1900, p. 457 et p. 464), l'indi- cation des quelques travaux parus jusqu'alors sur la regulation et le cbauffage electrique des etuves. Une interessante note de d'Arsonval (2) nous avait ecbappe. d'Arsonval a realise divers appareils ä temperature constante (etuve, autoclave, couveuse, platine cbauffante) cbauffes par des resistances 11* 164 Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. XX, 2. metalliques ou liquides (ean de l'autoclave) et regles automatiquement par des regulateurs metalliques sensibles et rapides. Ces regulateurs sont : soit un ruban bi-metallique , forme de deux lames tres minces d'inegale dilatabilite (dejä utilise daiis les thermometres metalliques), soit uue lame ou un fil monometallique , fixe aux deux extremites, legerement incurve, et dont on utilise les variations thermometriques de courbure, apres les avoir amplifies , pour etablir et interrompre automatiquement un contact electrique. d'Arsonval fait remarquer que de tels appareils sont susceptibles d'une grande sensibilite , et que le prix de revient tres eleve des calories produites electrique- ment est compense par leur utilisation parfaite. Abstraction faite de quelques appareils figurant dans les cata- logues de divers constructeurs, mais sur lesquels nous ne possedons pas de renseignements , voici Findicatiou des publicatious parvenues ä notre connaissauce et relatives aux appareils de chauflage elec- trique k regulation automatique. ^ L'etuve de Hanpland (7) est metallique et a double paroi. Entre les deux parois , il y a un mancbon d'eau , traverse par des tubes de cuivre. Dans ces tubes sont logees les spires de fil me- tallique (radiateur) traversees par le courant. Le regulateur est un tliermometre ä contacts electriques place dans l'atmospbere de l'etuve ; ce regulateur est relie electriquement k un relai electro-magnetique exterieur a l'etuve ; dans le regulateur et le relai passe un courant derive du courant principal. Deux lampes, intercalees l'une sur le courant principal, l'autre sur le courant derive, s'allument alter- nativement. L'auteur ne fournit aucun renseignement sur les qua- lites et defauts du regulateur, qu'il ne decrit meme pas, ni sur les resultats obtenus au point de vue des variations de temperature, ni sur la deperdition calorique de l'appareil. Le bain-marie electrique ii paraffine de Steen (9) et celui de Mark (13) sont regles par le moyen de thermometres a mercure a contacts electriques actionnant un electro-aimaut ; ils comportent des dispositifs plus ou moins compliques, II est regrettable que ni Tun ni Tautre de ces auteurs n'ait pris connaissauce du premier bain de paraffine electrique dont nous avons public la description (6) et ^) La regulation automatiquc etant le point capital de la question du chauffage electrique des appareils ä l'usage des sciences, nous ne mention- nerons, dans cette notice histori(iue, que ceux de ces appareils qui sont automatiquement regles. XX, 2. Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. 165 auquel leurs propres instruments sont extremement semblables, tout eu etaut plus compliqiies. Les inconvenients des thermometres ä mercure et ä contacts electriques, dans lesquels des etincelles, merae minimes, eclatent dans Fair , voire meme dans uii liquide tel qiie riiiiile de vaseliue , entre le mercure et un fil de platine, nous ont rapidement fait renoncer a notre propre appareil, apres un certain temps d'experience. Deux ans avant Mark nous avons alors fait connaitre un nouveau bain de parafiine electrique (8, 10) muni d'un regulateur ä liydrog^ne et ä mercure du meme genre que celui que nous veuons de decrire dans ce memoire. Cet Instrument fonctionne d'une fagon irrepro- chable, sur courant continu ou alternatif de 115 volts ; il ne demande aucun autre entretien que le renouvellement de la paraffine et l'ele- vation ou Tabaissement de la temperature de r^glage , suivant les Saisons. Le thermostat de Marie et Marquis (15) est aussi un bain- marie cliauife par un radiateur en fil de platine. Le liquide est agite par un agitateur a ailettes mü electriquement. La regulation est produite au moyen d'un thermometre ä liquide, reglable a une temperature quelconque , relie ä un electro-aimant ; ce dernier est actionne par un courant de pile. L'article interessant que le Dr. Marmier (11) a consacre re- cemment au chautfage et a la regulation electriques des etuves ne nous donne aucun reuseignement sur la nature et la position des radiateurs ainsi que sur la nature des parois. L'auteur parle de la temperature dune etuve , mais ne nous dit pas en quel point (par rapport au radiateur et au regulateurj eile est mesuree ; nous avons fait voir que ce detail peut avoir une grande importance. Le pre- mier Systeme de regulation dont M. Marmier s'est servi (regulateur bi-metallique de Roux adapte au chautfage electrique, avec un relai) ne parait pas lui avoir donne beaucoup de satisfaction. „Ce regu- lateur , dit-il, donne dans l'etiive une temperature suffisamment uni- forme : la courbe des temperatures presente a la fois des oscillations longues (plusieurs heures) et des oscillations tres courtes . . . Les variations de la temperature peuvent etre dans certains cas, et pour une Periode de quelques jours, reduites a un degre centigrade." Le resultat enonce par cette derniere phrase contredit la „tem- perature suffisamment uniforme" dont il est question d'abord. „Quand on desire une temperature plus constante" on peut employer le regulateur dont M. Marmier donne ensuite une descrip- 166 Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. XX, 2. tiou. On peut faire a ce dispositif quelques objections. 1^ L'auteur dit que son regulateur est uu thermometre ä air a pression sen- siblement constante. Or la brauche large etant ouverte dans l'atmo- sphere, les variatious de la pressiou atmosplierique feront varier de plusieurs millimetres le niveau dans la petite brauche, et par suite la temperature variera dans des limites qui depeudront de la capa- cite du reservoir a air, de rinclinaison et du diametre de cette brauche. La formule douuee par l'jUiteur (p. 782) n'est donc pas applicable. 2 ^ Avec le regulateur de M. Marmier , le courant passe cou- stammeut dans le radiateur. L'intensite du courant est seulement augmentee et dimiuuee par l'interposition ou le retrait automatiques de petites resistances a b^ bc^ etc., placees en tension avec le radia- teur, et qui etaient d'environ 1 ohm chacune dans l'exemple rapporte par l'auteur. Cela est tres bien your compenser des varioit07is mimmes daus la deperdition calorique de l'etuve. Mais supi)Osous que , par suite du fouctionnement normal du regulateur , ä la suite du refroidissement exterieur, par exemple, le mercure remonte en a (se reporter k la figure donnee par M. Marmier) ; dans cette Posi- tion , l'intensite du couraut est au maximum 5 si donc il survient k ce moment une nouvelle cause de refroidissement de l'etuve (ouver- ture des portes , par exemple) le regulateur n'y pourra remedier. Ün effet analogue se produira lorsque le niveau du mercure etant arrive en n l'etuve sera rechauttee par une cause exterieure (tem- perature du local). Par consequent, si Ion veut que le regulateur puisse fonctionner dans des limites assez etendues , et compenser avec une rapidite convenable les ecarts de temperature ([ui , en pratique^ peuvent etre considerables, on sera conduit k intercaler un nombre tres grand de resistances analogues ä ab, bc, etc.: d'oü grande complication de l'appareil , et augmentation des calories per- dues par les resistances additionnelles. 3^ Les resistances «6, />c, etc. degageut de la chaleur inu- tilisee. 4*^ Les indications des resultats experimentaux fouruis par regulateur sont insufiisantes. „La temperature est restee rigoureuse- ment constante si on se reporte aux indications du thermometre enregistreur. Elle a varie en realite de 3 de degre si on prend les indications donnees par les enregistreurs electriques places sur rapi)areil." Quehiues details supplemeutaires seraient necessaires pour expliquer ce que ce resultat sommaire a d'obscur et de contradictoire. XX, 2. Regaud et Fouilliand: Regulateur electro-thermique. 1(57 M. Marmier donne en terminant iine coraparaison entre le prix de revient du chauffage electriqiie et cehii du cliauffage au gaz, appliques successivement a la meine etuve. En realite, les condi- tious de deperdition ealoriques sont tout A fait differentes entre une etuve k gaz et une etuve specialeraent construite pour le chauftage electrique iuterieur ; aussi les resultats pecuniaires indiques par M. Marmier, quelque encourageants qu'il les trouve, sont-ils beaucoup nioins satisfaisants qu'ils auraient ete avec une des etuves dont nous avons donne la description. Bibliographie, par ordre chronologique , des publications relatives au cliauffage electrique des apjiareils ä temperature constante. ^ 1) GouY, Sur une etuve ä temperature constante (Journ. de Phys., 3« ser., t. VI, 1897, p. 479). 2) d'Arsonval, Chauftage et regulation electriques (C. R. de la Soc. de Biologie, 5 Mars 1898). 3) Kraus, R., lieber einen elektrisch geheizten und regulirbaren Object- tisch (Centralbl. f. Bacteriol., Abth. 1, Bd. XXIII, 1898, p. 16). 4) RoTHE, R., Ein Thermostat mit elektrischer Heizvorrichtung für Tem- peraturen bis 500'^ (Zeitschr. f. Instrumentenk. Bd. XIX, 1899, p. 143 [nous n'avons pas pu nous procurer ce travail]. 5) ReCtAud, Cl., et Fouilliand, R. , Chauftage et regulation des etuves par Telectricite (Journ. de Physiol. et de Pathol. gen. 1900, p. 457). 6) ReCtAUd, Cl. , et Fouilliand, R. , Bain de paraffine ä chauft"age elec- trique (Journ. de l'Anat. et de la Physiol. 1900, p. 574). 7) Hanfland, Fr., Brütschrank mit elektrischer Heizung und Regulirung (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XVII, 1900, p. 440). 8) Regaud, Cl., Demonstration d'une etuve electrique (C. R. de l'Assoc. des Anatomistes, 3e sess., Lyon, 1901, p. 200). — , — , Nouveau bain de paraffine chaufte par l'electricite (ibid., p. 261). 9) &TEEN, R. H., Electro-thermal paraffin-bath (British med. Journ. 1901, p. 319). 10) Regaud, Cl., Nouveau bain de paraffine ä chautfage et regulation electriques (Journ, de l'Anat. et de la Physiol. 1902, p. 193). 11) Marmier, L. , Sur le chauftage electrique des etuves ä temperature constante (Ann. de linst. Pasteur, t. XVI, 1902, p. 779). ^) Dans cette liste ne sont pas compris un certain nombre de travaux dans lesquels il est question de thermometres ä contacts electriques et d'electro-airaants utilises pour regier des etuves chauftees par des flammes exterieures. Nous les avons cites dans notre premiere puWication (5). Nous laissons aussi de cöte le chautfage electrique des appareils ä tempe- rature non constante. 168 Seh oe bei: Einfacher Auswaschapparat. XX, 2. 12) Regaud, Gl., et Fouilliand, R., Un regulateur de temperature pour etuves chauflfees par relectricite (C. R. de la Soc. de Biol., 8 Nov. 1902). — , — , Etuves electriques (ibid.). — , — , Regulateurs electro-thermiques et etuves electriques (Bull. Soc. med. des hopitaux de Lyon 1902). 13) Mark, E. L., A paraffin-bath heated by electricity (Amer. Naturalist, vol. XXXVII, 1903). 14) Regaud, Gl., Gouveuse electrique pour enfants nouveau-nes (Bull, Soc. med. des hopitaux de Lyon, 1903). 15) Marie et Marquis, Thermostat ä chauflfage et regulation electriques (G. R. des seances de l'Acad. des Sc, Paris, 9 Mars 1903). 16) Regaud, Gl., Platine-etuve electrique pour observations microscopi- ques (G. R. de la Soc. de Biologie, 7 Mars 1903). [Eingegangen am 1. October 1903.] Einfacher Auswaschapparat. •Von E. Schoebel in Neapel. Hierzu ein Holzschnitt. Soweit meine Kenntniss reicht, ist die iu folgenden Zeilen be- schriebene Vorrichtung zum Auswaschen von Objecten , wie es die Mikrotechnik vielfach erfordert , noch nicht in weiteren Kreisen be- kannt, verdient es aber vielleicht wegen der Einfachheit der Her- stellung und wegen der allgemeinen guten Verwendbarkeit zu werden. Speciell ist sie für kleine und kleinste Objecte bestimmt, lässt sich natürlich aber gleich gut für jede Grösse benutzen. Zur Herstellung der Auswaschschälchen nimmt man gewöhnliche Glasschälchen , wie man sie auch zu anderen Zwecken häufig braucht, und erhöht den freien Rand derselben um etwa 2 bis 3 cm durch einen darum- gelegten Streifen aus sogenannter Müllergaze , wie sie zu kleinen Netzen verwandt wird. Dies lässt sich am einfachsten so ausführen, dass man den Glasrand von aussen etwa einen halben Centimeter XX, 2. Schoebel: Einfacher Auswaschapparat. 169 breit, oder bei Schälchen mit Absatz, so breit wie dieser Absatz ist, mit einem Klebstoflf, Kleister, Gummiarabicuni oder dergleichen — dünn bestreicht und den zurecht geschnittenen Gazestreifen, der nicht nur um das ganze Schälchen herum reichen , sondern so lang sein muss, dass seine Enden sich etwa einen halben Centimeter über- decken, darüber legt und mit einem Faden fest umbindet. Das Auf- kleben ist nicht unbedingt nöthig, sondern erleichtert nur die Herstel- lung, denn nachdem der Klebstoff trocken geworden ist, überstreicht man den ganzen Auflagerand vorsichtig mit geschmolzenem Paraffin, und gleichzeitig klebt man mit solchem auch die sich überdeckenden Enden des Gazestreifens zusammen. Dieser Paraffin-Kittstreifen hat ferner noch den Zweck, den Gazecylinder zu ver- steifen, damit sich dieser, wenn er nass wird, nicht zusammenlegen kann. Man bringt gegenüber diesem Kittstreifen oder bei grös- seren Schalen in gleichen Abständen an noch mehr Stellen gleiche Verstei- fungen an. Nicht unbe- dingt nöthig, aber recht vortheilhaft ist es ferner, wenn man auch den oberen freien Rand des Gazecylin- ders mit einem Paraffin- reifen verstärkt. Man taucht zu diesem Zwecke den Rand einige Millimeter in geschmolzenes Paraffin , hebt heraus , lässt erkalten , taucht rasch nochmals ein, lässt wieder erkalten und fährt damit so lange fort, bis der Rand stark genug ist. Hat man eine nicht zu harte Sorte Paraffin ge- nommen , so kann man den Rand schliesslich leicht zurecht biegen und so bei einigem Geschick recht saubere und elegante Auswasch- schälcheu herstellen. Aber auch , wenn sie weniger elegant aus- fallen, so schadet das gar nichts, functioniren werden sie immer. In diese Schälchen bringt man, nachdem man die Gaze augefeuchtet hat, die Objecte und lässt in gewöhnlicher Weise einen schwachen Wasserstrahl zutliessen. Die Objecte tanzen im Schälchen umher, können aber natürlich nicht über den Rand wegschwimmen. 170 Schoebel: Einfacher Auswaschapparat. XX, 2. Häufig hat man gleichzeitig verschiedene Arten von Objecten auszuwaschen , die man nicht in ein Schälchen zusammen bringen kann. Für diesen Fall kann man sich den in Folgendem beschrie- benen einfachen Apparat zusammenstellen und dann mit einem Haupt- wasserstrahl — meist steht ja doch nur ein Wasserhahn zur Ver- fügung — beliebig viele Schälchen speisen. Auf einen nicht zu hohen Glascylinder als Fuss kittet man eine, am besten runde Glas- platte. Auf diese legt man eine mit der Glasplatte gleichgrosse Fliesspapierscheibe und über diese kreuzweise hinweg etwa ein Centi- meter breite, au den Enden zugespitzte Fliesspapierstreifen. Letztere müssen einige Centimeter länger als der Durchmesser der Glasplatte sein. Die überstehenden zugespitzten Enden biegt man rechtwinklig um , so dass sie nach abwärts hängen. Wem gewöhnliches Fliess- papier für diese Streifen zu wenig widerstandsfähig ist, kann ge- härtetes nehmen, oder aber eventuell mit gut entfetteten Fäden auszukommen suchen. Der auf einen in die Mitte der horizontal gestellten Glasplatte gelegten kleinen Schwamm geleitete , nicht zu kräftige Hauptwasserstrahl wird auf diese Weise in soviel Nebeu- strahlen getheilt , wie Fliesspapierenden über die Glasplatte ragen. Wünscht man , dass das Wasser sicher nur von den Streifenenden abläuft, so bestreicht man den Rand der auf der Glasplatte liegen- den Fliesspapierscheibe — natürlich so lange sie noch trocken ist — ■ mit Ausnahme der Stellen, über die die Ablaufstreifen liegen ein bis ein und einen halben Centimeter breit mehrmals mit geschmolzenem Paraffin, oder aber man nimmt an Stelle der ebenen Glasplatte ein grösseres flaches ührglas. Unter jedes Streifenende kann man ein Schälchen mit Material zum Auswaschen setzen. Alles zusammen baut man am besten auf ein kräftiges Drahtnetz , das auf einem Dreifuss liegt, und den ganzen Apparat stellt man in den Ausguss der Wasserleitung direct unter den Wasserhahn. Die umstehende Figur zeigt einen solchen Apparat für vier, aber mit nur zwei unter- gestellten Schälchen in ungefähr ein Drittel der natürlichen Grösse. Wem die beschriebene Vorrichtung noch zu complicirt ist , wird schliesslich Wege finden , ihre Grundidee auf primitivere Weise zu realisiren. Dass man die Auswaschschälchen auch für andere Zwecke gut verwenden kann, so z. B. um Thiere unter Wassercirculation zu setzen, braucht wohl nicht weiter ausgeführt zu werden. [Eingegangen am 19. October 1903.] I XX, 2. Hoffmann: Deckglastransporteur für Schnittfiirbung. 171 Deckglastransporteur für Schnittfiirbung. Von Dr. Walther Hoffmann, Assistenzarzt an der Heidelberger Universitätskinderklinik, vordem Assistent am Pathologischen Institut. Hierzu ein Holzschnitt. Den vielen und wichtigen Vorzügen der Paraffineiubettung steht für den praktischen Gebrauch bei den laufenden Untersuchungen an Untersuchungsstationeu vielfach der grosse Zeitaufwand entgegen, den die Färbung mit den bisher üb- lichen Mitteln erforderte. Um diesem sowie einigen anderen Missständen zu begegnen , ist nebenstehend abgebil- detes Instrument entstanden, das wohl weiteren Beschreibung kaum einer bedarf. Auf das Aufkleben der Schnitte auf Objectträger ist principiell verzichtet, welche grosse Farb- quanta , grosse besonders geformte Cuvetten u. a. m. nöthig: machten ausserdem eine nöthi grosse unbenutzte 61astlä.ehe mit den Farblösungen in Berührung brachten , und diese bei schnell auf einander folgenden Ueber- tragungen rasch verunreinigten. Die Schnitte werden auf die Deckgläschen nach den üblichen Me- thoden aufgezogen , am besten ohne Klebemittel , oder falls welches nöthig, auf mit Glycerin-Eiweiss bestrichenen Deckgläschen von der Oberfläche eines massig warmen Wasserbades abgehoben, wo mau die Streckung und Glättung der Schnitte bewirkte. Die mit den Schnitten beschickten Deckgläschen werden in die Spiralfeder an der Fnssplatte des Instrumentes eingeklemmt und nun mit diesem nach einander durch die verschiedenen Farbtlüssigkeiten geführt. Es 172 Heidenhain: Ueber die Verwerthung der Centrifuge. XX, 2. gelingt so in kürzester Zeit die Färbung von 6 bis 8 Deckgläseben gleichzeitig und gleichmässig ; dabei können dieselben Farbgefässe benützt werden , welche zur gleichen Zeit der Färbung von Gefrier- und Celloidinschnitten dienen , so dass auch eine Verringerung der Zahl der benutzten Glasschalen eintritt. Wie für Schnittpräparate kann das Instrument natürlich auch zur Färbung von Blut-, und mit gewisser Einschränkung auch für Bacterienpräparate verwandt werden, wobei ein saubereres Arbeiten als mit den üblichen Deckglas-Pincetten und -Zangen möglich ist. Natürlich lohnt sich diese Methode für Bacterienfärbungen nur dann, wenn eine grössere Anzahl Trockenpräparate in gleicher Weise ge- färbt werden soll. Bei der Herstellung des Instrumentes aus versilbertem Neusilber ist Rosten ausgeschlossen, und überhaupt eine Schädigung durch die Farblösungen und sonstigen Reagentien kaum zu befürchten. Die Fabrication hat die Firma F. Dröll in Heidelberg übernommen. [Eingegangen am 23. October 1903.] lieber die Verwerthung der Centrifuge bei Gelegenheit der Herstellung von Präparaten isolirter Zellen zu Kurszwecken. Von Prof. Dr. Martin Heidenhain in Tübingen. Da ich hier in Tübingen wiederum den mikroskopischen Unter- richt zu leiten habe, war es von Anfang an mein eifriges Bestreben, die Technik der mikroskopischen Kurse , besonders die Herstellung der Präparate zu verbessern. Da ich in dieser Beziehung im Laufe der Jahre Einiges erreicht habe , gedenke ich in einigen kleinen Artikeln meine Erfahrungen zum Besten zu geben. Die Technik der „Kurspräparate" ist, wie Jeder, der damit zu schaffen hat, wohl weiss, eine ganz eigenartige. Nicht jedes Prä- parat, welches zu gelehrten üntersuchungszwecken geeignet ist, kann XX, 2. Heidenhain: Ueber die Verwerthung der Centrifuge. 173 im Unterrichte verwerthet werden ; die Stiidentenpräparate sollen bei schwacher Vergrösserimg- übersichtlich sein , bei Anwendung stärkerer Trockenlinsen eine gewisse, nicht zu grosse Menge von Detail in möglichst lehrhafter Form zeigen. Abgesehen hiervon eignen sich nur solche technische Verfahrungsweisen, die eine Her- stellung der Präparate in unbegrenzter Menge erlauben ; auch muss das Verfahren einen derartigen Grad von Sicherheit besitzen, dass das Präparat Jahr für Jahr in der nämlichen Weise angefertigt werden kann. Es ist mir nun schon lange aufgefallen, dass die Herstellung der so überaus wichtigen, elementaren Präparate über isolirte Zellen (Blutzellen , Cyliuderepithel, Flimmerepithel etc.) relativ schwierig ist. Die ungefärbten Präparate lassen sich freilich frisch oder macerirt leicht untersuchen; die Färbung kann den Stu- direnden indessen nicht in die Hand gegeben werden ; denn diese Präparate werden zu Beginn der Kurse ausgegeben und zu dieser Zeit sind die jungen Leute noch ungeschickte Anfänger. Ausserdem ist es bei weitem leichter einen Schnitt zu färben als gerade Isola- tionspräparate. Man wird also den Schüler nicht gerade hiermit seine Studien über Färbung beginnen lassen wollen. Daher werden wohl die meisten Lehrer der Histologie die Färbung der Isolations- präparate selbst in die Hand nehmen. Ich bin nun schon seit Jahren darauf aufmerksam geworden, dass sich bei Färbung isolirter Zellen zweckmässig eine kleine Hand- centrifnge, wie sie heutzutage vielfach im Handel angeboten werden, benutzen lässt, ^ Die Art, wie man dabei vorgeht, versteht sich fast von selbst. Hat man das Gewebe in geeigneter Weise macerirt, so wird es im Reagensglas geschüttelt, bis die Elementartheile sich in gewünschter Weise isoliren. Bleiben dabei noch grobe Gewebe- theile übrig, welche von vorn herein beseitigt werden sollen, so lässt man kurz absetzen und decantirt dann die überstehende zellenreiche Flüssigkeit, Nunmehr schleudert man letztere auf der Centrifuge aus und erhält die Masse der Zellen als dicken Bodensatz ; man giesst jetzt die Macerationsflüssigkeit ab und schwemmt die Zellen in destillirtem Wasser auf, um sie zu waschen, schleudert abermals aus , decantirt das Waschwasser und giebt über den Bodensatz die ^) Ueber diesen Gegenstand wollte ich schon auf dem Bonner Con- gress berichten und hatte einen Vortrag darüber angezeigt, der indessen schliesslich fallen gelassen wurde. — Eine hübsche kleine Handcentrifuge (No. 345) erhält man bei Wagner und Münz in München für 26 Mark. 174 Heidenhain: lieber die Verwerthung der Centrifuge. XX, 2. Farbflüssig'keit, schwemmt die Zellen in der Farbe auf, lässt färben, schleudert wiederum aus, giesst die Farbe ab, mischt zum zweiten Mal mit Wasser, schleudert aus, härtet auf der Centrifuge in steigen- dem Alkohol nach, indem man die Zellen immer wieder als Boden- satz auf dem Grund des Gefässes sammelt, bringt sie auf diese Weise schliesslich in absoluten Alkohol, schleudert aus und giesst Xylol auf, mischt die Masse sorgfältig mit dem Xylol , schleudert zum letzten Mal aus und giesst reines Xylol über. Das so hergestellte Präparat ist in einem gut verkorkten Reagens- glas über Jahre hinaus haltbar. Schüttelt man die Zellen auf, so sinken sie sehr rasch wieder zu Boden, da ihre Masse im Verliält- niss zum Xylol sehr viel schwerer ist. Will man den Zellenschlamm in Gebrauch ziehen , so decantirt man das Xylol und giesst dick- flüssigen Canadabalsam hinzu. Mit einem Glasstäbchen rührt man die Masse gut durcheinander und theilt davon im Kurse tropfenweise aus. Hierbei ist zu beachten , dass ein etwa übrig bleibender Rest des Präparates nicht tauglich ist aufbewahrt zu werden , wenn be- reits Canadabalsam zugesetzt wurde. Denn die Zellen senken sich auch in dem Balsam allmählich zu Boden , bilden dann aber eine dicke, zähe, schmierige Masse , welche sich nicht zum zweiten Mal in dem Balsam aufschwemmen lässt. Wenn man daher der Meinung ist, dass man nicht die ganze Masse des Präparates auf einmal wird aufbrauchen können, so soll man die benöthigte Quantität abgiessen, bevor man Balsam zugesetzt hat. Dies wäre, wie man sieht. Alles sehr einfach. Die Ausnutzbar- keit der Methode wird nun ganz davon abhängen, inwieweit es ge- lingt, die verschiedenen Gewebe in zweckmässiger Weise so zu maceriren, dass sie ein Auseinanderschütteln der Elementartlieile er- lauben und vertragen. Eine Specialfrage ist ferner , ob man nicht zweckmässiger Weise bestimmte Gewebe schon vor dem Zerschütteln durchfärbt ; in diesem Falle würde die Arbeit auf der Centrifuge sich wesentlich abkürzen. Ferner kann man selbstverständlich auch auf die nämliche eben beschriebene Weise schöne B 1 u t p r ä p a - rate herstellen. Da sich mithin die technischen Verhältnisse bei ver- schiedenen Prä])araten im einzelnen wiederum verschieden gestalten, so sei mir erlaubt ül)er einige Kurspräparate Einzelangaben zu machen. Darmepithel vom Frosch: Zuerst macerirt man in Drittel- alkohol während 24 Stunden, alsdann färbt man in Carmalaun oder verdünntem DELAFiELü'schen Hämatoxylin, und hierauf erst schüttelt man das Epithel herunter. Das weitere wie oben. XX, 2. Heidenliain: Lieber die Verwertluing' der Centrifuge. 175 Flimiiierepithelzelleii: Das Isolationspräparat der Flimmer- epithelzellen wird nacli altem Usus gewöhnlich von der Trachea des Kalbes hergenommen; indessen habe ich gefunden, dass die Tracliea des Hundes viel schönere Zellen enthält. Auch hier wird nach der Maceration in Drittelalkohol sogleich gefärbt , in Carmalaun oder Hämatoxyün. Was das Herunterschütteln des Epithels anlangt , so bringt man es oft nicht oder nicht vollständig zu Wege , weil die Epithelzellen sehr fest auf der Unterlage aufsitzen. Daher schneide man die gefärbte Trachea in Längsstreifen und kratze das Epithel herunter, indem man ein scharfes Scalpell ziemlich senkrecht auf das Gewebe aufsetzt und dasselbe unter ziemlich starkem Drucke schiebend über den Streifen entlang gleiten lässt. Der Zellenbrei bleibt an dem Scalpell hängen und wird in destillirtem Wasser abgespült ; das weitere wie beschrieben. Leberzellen : Ein sehr anschauliches Zellenpräparat, welches für den Unterricht der Anfänger sehr geeignet ist, erhält man auf folgende Weise. Man schabt von der frischen Schnittfläche einer Rindsleber vermittels eines scharfen Scalpells eine gehörige Menge von Leberzellen und kleinsten Gewebefetzeu herunter. Die abge- strichenen Massen werden in Drittelalkohol von dem Scalpell herunter- gespült. Darauf lässt man das Präparat durch 24 Stunden stehen, zerschüttelt alsdann die Gewebefetzen , schleudert aus , mischt mit Wasser, schleudert abermals aus und färbt in Carmalaun ; die weitere Behandlung wie früher. Das fertige Präparat ist für Anfänger ausserordentlich instructiv. Zwar sind die völlig isolirten Leberzellen meist mehr oder weniger abgerundet , indessen hängen noch viele in Gruppen oder Reihen (Leberzellenbalken) aneinander und gewähren so ein Bild der natür- lichen -Anordnung. Ausserdem finden sich viele isolirte Kerne zertrümmerter Leberzellen, auch weisse Blutkörperchen und besonders auch Capillarwandzellen. Leukocyten : Es ist immer schwierig, dem Anfänger eine hin- reichende Vorstellung von den verschiedenen Formen und Arten der weissen Blutkörperchen zu verschatfen. Schon früher suchte ich zu diesem Zwecke gefärbte Knochenmarksschnitte vom Kaninchen zu be- nutzen; allein die Elemente liegen in diesem Gewebe so dicht gehäuft, dass sich die Anfänger in den Schnitten nicht zureclitfindcn kininen. Macerirt man nun rotlies Knochenmark vom Kaninchen in Drittelalkohol, scliüttelt die Zellen auseinander, schleudert aus, decantirt, färbt mög- lichst stark in Carmalaun , so erhält man unter Benutzung des an- 176 Heidenhain: lieber die Verwerthung der Centrifuge. XX, 2. gegebenen Verfahrens prächtige Präparate von Lymphocyten und Riesenzellen ; es ist wenigstens im Hinblick auf den Unterricht ein besonderer Vortheil, alle möglichen Formen von Leukocyten in colos- saler Menge völlig isolirt in den Präparaten zu haben. Eigentlich sollte man ja auch die kernhaltigen rothen Blutkörperchen von den farblosen Zellen unterscheiden können, indessen bei der angegebeneu einfachen Behandlungsweise vermag man sie nicht mit Sicherheit heraus zu erkennen. Dagegen findet man natürlich sehr verschieden- artige P'ormen von Knochenmarksriesenzellen (Megakaryocyten) und zwar sowohl die Entwicklungs- wie auch die Degenerationsformen. Glatte Muskelzellen : Die Maceration des glatten Muskel- gewebes habe ich gut nur nach der alten FRORiEp'schen Methode fertig bekommen. Ich kochte einen Katzendarm in 2"5procentiger Salicylsäurelösung und bewahrte ihn darin auf. Nach Monaten, even- tuell nach Jahr und Tag, lassen sich die glatten Muskelhäute voll- ständig zerschütteln. Es ist wunderbar zu sehen, wie sich die Zellen in vorzüglicher Erhaltung und in vollständiger Länge ganz von ein- ander trennen. Man wird bei dieser Gelegenheit sehen , dass die glatten Muskelzellen eigentlich länger sind, als man sich für ge- wöhnlich vorzustellen pflegt, denn bei Isolationspräparaten, die nach anderen Methoden erhalten werden , sind wohl die ungemein spitz zulaufenden Enden der Faserzellen häufig abgebrochen. Die Zellenmasse sammelt man nach der Centrifugenmethode, wäscht die Salicylsäure gut aus und färbt schliesslich mit einer alkoholischen Lösung von Congo - Corinth G (Elberfeld). Die Faser- zellen nehmen diesen Farbstoff gut auf und färben sich damit in ganzer Länge schön bordeauxroth 5 jedoch konnte ich die Kerne salicylisirter Gewebe bisher auf keine Weise färben. Die auf diese Weise hergestellten Präparate sind interessant zu untersuchen , da man hier und da auch Zelleugruppen trifft, die ihren natürlichen Zusammenhalt noch bewahrt haben. Jedoch konnte ich niemals die von Rouget früher beschriebenen Zellenketten finden, denn mehr als drei Zellen, die in einer Reihe hinter einander liegen und an einander anschliessen , kommen nicht vor, und auch dies scheint nur Zufall zu sein. Blutpräparate; Was die Anfertigung von Präparaten gefärbter Blutkörperchen anlangt , so habe ich darüber die folgenden Er- fahrungen gesammelt. Blut direct in eine Fixirungsflüssigkeit laufen zu lassen , geht nicht an , denn die Eiweisskörper des Blutplasmas werden mit aus- XX, 2, Heidenhiiin: Ueber die Verwerthung der Centrifuge. 177 gefällt und verschmutzen unter der Form von Gerinnseln das histologische Präparat. Daher müssen die Eiweisskörper des Blut- plasmas zunächst entfernt werden. Zu diesem Behufe kann man das Blut defibriniren und die Körperohen ausschleudern , worauf das Serum mit den in ihm enthaltenen P^iweissstotfen fortgegossen wird. Oder man verdünnt das Blut sogleich oder nach der Defibrinirung mit Kochsalzlösung, schleudert aus und giesst die überstehende Flüssigkeit ab. Dieses letztere Verfahren hat einen grossen Vor- theil. Die von mir empfohlene kleine Handcentrifuge reicht nämlich eigentlich zur Centrifugirung von Blut nicht aus , da das Serum viskos ist, und wegen der stärkeren Flüssigkeitsreibung die Blut- körperchen sich nur schwer absetzen. Wird dagegen Blut mit Koch- salzlösung verdünnt, so kann man leicht ausschleudern. Habe ich Säuger- oder Vogelblut , so defibrinire ich , verdünne mit Kochsalz- lösung, schleudere aus, decantire, setze wieder Kochsalzlösung hinzu und giesse das Gemisch in die Fixirungstlüssigkeit ; liabe ich Frosch- blut, so verfahre ich ebenso, verzichte aber auf das Defibriniren. Auf die beschriebene Weise verliert man allerdings meistentheils die Leukocyten, so dass es sich nur um Präparate von rothen Blut- körperchen handeln würde. Was die zweckmässigste Art der Fixirung des Blutes anlangt, so konnte ich noch nicht zu vollständig befriedigenden Resultaten kommen, bin aber auch bisher nicht in der Lage gewesen, diesem Gegenstande die genügende Aufmerksamkeit widmen zu können. Jedenfalls kann man das Blut durchaus nicht etwa so ohne weiteres zu einer der beliebten Fixirungsflüssigkeiten hinzulaufen lassen, denn man erhält auf diese Weise nur die ungeheuerlichsten Kmist- producte. Für Vogel- und Amphibienblut befriedigend , weniger gut für Säugerblut ist folgendes Fixirungsverfahren. Man bereitet sich eine Stamml(»sung aus 4 cc concentrirter Kochsalz -Sublimatlösung, 1 cc 2procentiger Osraiumsäure und 16 cc Wasser. Beim Gebrauch fügt man zu der bestimmten Quantität von 7 cc dieser Flüssigkeit 20 bis 28 cc physiologischer Kochsalzlösung und giebt die ganze Masse in ein ordinäres Champagnerkelchglas. Hierauf bereitet man das Blut zur Fixirung vor , indem man nach der angegebenen Methode die Blutkörperchen gewinnt und sie in Kochsalzlösung aufschwemmt, und zwar suspendirt mau die Blutkörperchenmasse in 12 cc physio- logischer Kochsalzlösung. Dies Gemisch wird unter stetem Um- rühren in die Fixirungsflüssigkeit gegeben. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 2. 12 178 Heiclenhain: Ueber die Verwerthung' der Centrifuge. XX, 2. Am anderen Tage decantirt man, schwemmt die Masse in destillirtem Wasser auf, schleudert aus und härtet auf der Centrifuge in steigendem Alkohol nach. Was die Färbung anlangt, so benutzte ich für Säugerblut- körpercben Eosin in alkoholischer Lösung. Bei kernhaltigen Blut- körperchen färbt man zunächst in verdünntem DELAFiELo'schen Hämatoxylin ; hierbei ist es räthlich, aus den Körperchen, ehe man die Farbe übergiesst , den Alkohol wiederum durch Wasser zu ver- drängen. Hat man die Kerne stark genug tingirt, so schleudert man die Körperchen aus, giesst die Farbe ab, wäscht in Wasser, entfernt das Waschwasser, giesst reines Wasser auf und macht dieses durch sehr wenig doppeltkohlensaures Natron alkalisch ; ist hierauf die Bläuung des Hämatoxylins eingetreten, so giesst man das alkalische Wasser ab , überträgt in Alkohol , schleudert aus und giesst dann zur Färbung des Protoplasmas eine alkoholische Lösung von Congo - Corinth G auf; eventuell kann man auch Benzopurpurin benutzen. Ist genügend gefärbt, so überträgt man der Reihe nach in reinem absoluten Alkohol imd Xylol , welches einmal gewech- selt wird. Die hier beschriebenen Procedureu scheinen sehr complicirt zu sein. Indessen verwirklichen sie sich sehr rasch. Ist einmal das Gewebe macerirt oder das Blut fixirt , so kann man das Präparat im übrigen binnen einer halben «Stunde vollkommen fertig zum Ge- brauch herstellen. Bei Herstellung vieler anderer Kurspräparate sind die Opfer au Zeit, welche der Gelehrte bringen muss, sicherlich viel grösser. [Eingegangen am 6. October 1903.] XX,2. Heldenhiiin: Verwendung d. Congo u. anderer Amidoazokörper. 179 lieber die zweckmässige Yerwenduiig des Congo und anderer Amidoazokörper , sowie über neue Neutralfarben. Von Prof. Dr. Martin Heidenliain in Tübingen. In Nachfolgendem will ich zunächst über einige prächtige Färbungen berichten , die ich mit den Congofarbstoifen und Benzo- purpurinen erhielt. Diese Farbkörper gehören zu der grossen Klasse der sauren AzofarbstofFe ; sie sind wie die meisten Körper dieser grossen Familie Sulfonsäuren. Ihre besondere , unterscheidende Eigenthümlichkeit besteht jedoch darin , dass an ihren organischen Kern A m i d o g r u p p e n angelagert sind. Mithin sind die ge- dachten Farbkörper, So wie sie in den Handel kommen, sämmtlich Natriumsalze verschiedener meist nahe verwandter Amidoazo- sulfonsäuren. Diese Körper sind meist von gelbrother oder kirschrother Farbe; sie pflegen sieh leicht in Wasser, schwerer in Alkohol zu lösen. Setzt man den Lösungen freies oder kohlen- saures Alkali zu , so fallen sie , ähnlich wie die freien Farbbasen unter den gleichen Umständen , wieder aus der Lösung äiis. Eine Betrachtung dieser Fäilungserscheimmgen würde oifenbar weit in das Gebiet der physikalischen Chemie hinüberführen, daher sei nur so viel erwähnt, dass es sich hier imi die Fällung kolloidaler Körper auf rein physikalischem Wege handelt. Für uns kommt praktisch nur in Betracht, dass diese Ausfällung der Amidoazokörper aus alkalischer Lösung bei der Färbimg der Gespinnstfasern industriell ausgenutzt wird. Dieses eigenthümliche Verfahren zu färben kann ohne wei- teres unseren histologischen Bedürfnissen angepasst werden. Zu diesem Behufe macht man die Schnitte selbst alkalisch und bringt sie alsdann in die Farblösung hinein ; nunmehr setzt sich die Farbe im Schnitte fest, denn die Alkalescenz der Gewebebestand- theile bewirkt, dass die Farbe unlöslich wird und sich in dem Gewebe fixirt. 12* 180 Heidenhain: Verwendung d. Congou. anderer Amidoazokörper. XX, '2. Der h i s 1 1 g i s c li e E f f e c t des Verfahrens besteht in erster Linie in einer prächtigen Färbnng des Bindegewebes, eventuell auch der elastischen Fasern , in zweiter Linie in einer Färbung dichter Protoplasmamassen, also z. B. der quergestreiften und der glatten Muskeln. Dies alles würde nun keine Veranlassung zu einer Ver- itffentlichung geben , wenn man nicht auf die gedachte Weise in praxi mit leichter Mühe prachtvolle Präparate erhielte , die ganz besonders gut für den Unterricht , speciell für den mikroskopischen Kursus sich eignen; und zwar fusst die allgemeine Anwendbarkeit der Methode darauf, dass in ihr das ideale Verfahren zur Nachfärbung der gewöhnlichen H ä ni at o xy linpräparate (nach Delafield, Böhmer etc.) gegeben ist. Ich will hier zunächst auseinandersetzen , warum das übliche Verfahren der Nachfärbuug blauer Hämatoxylinpräparate vermittels Eosin oder eines seiner Verwandten nicht den Anspruch auf den Namen einer irgendwie vollkommenen Methode machen darf. Wie allgemein bekannt, muss man die Aluminium -Hämatoxylinpräparate (nach Delafield, Böhmer, Paul Meyer u. a.) a 1 k alis ch aufheben, wenn sie auf die Dauer haltbar sein sollen. Vor 20 Jahren wusste man davon noch nichts 5 bei Semper in Würzburg, der mein Lehrer war, färbten wir sauer fixirte Gewebe (aus Chromsäure, Sublimat, MtJLLER'scher Flüssigkeit etc.) mit Hämatoxylin und legten die Schnitte ohne Anwendung irgend welcher Vorsichtsmaassregeln in den gewöhnlichen ebenfalls sauren Canadabalsam ein. Natürlich sind diese Präparate bis zum heutigen Tage alle mehr oder weniger verblichen. Ich für meine Person habe dann später, vom Winter 1887 bis 1888 an, sämmtliche Hämatoxylinpräparate vor dem end- gültigen Einlegen mit einer Spur von doppeltkohlensaurem Natron alkalisch gemacht. Die so behandelten Schnitte behalten immer jenes frische Aussehen, das sie unmittelbar nach der Herstellung der Präparate besitzen. Ende der achtziger Jahre kam auch das jetzt allgemein übliche Ausspülen der Hämatoxylinpräparate mit Leitungswasser auf, welches dem gleichen Zweck der Abstumpfung der im Schnitt enthaltenen Säure dient. Bedenkt man aber, dass alle blauen Hämatoxylinlösungen mit Alaun bereitet werden, dass der Alaun selbst stark sauer ist, ebenso wie beinahe alle Fixirungs- mittel, dass man ferner dem Canadabalsam in dieser Beziehung nie recht trauen kann, so wird man wohl zugeben, dass das absichtliche Alkalesciren der Hämatoxylinschnitte dem blossen Ausspülen in Brunnenwasser vorzuziehen ist. XX,2. Heidenliain: Verwendung d. Congou. anderer Amidoazokörper. 181 Färbt man nun mit Eosinen nacli, so befindet man sieb in dem Übeln Dilemma, dass diese Farben auf alkalische Schnitte eigentlich schlecht oder gar nicht auftarben. Wenn die Verwendbarkeit der Eosine nach Hämatoxylin trotz dessen immerhin noch ziemlich gross ist , so liegt das lediglich daran , dass zur Zeit die Verwendung chromhaltiger Fixirungsraittel noch immer im Vordergrunde steht (Chromsäure, FLEiiMiNo'sche und MtJLLER'sche Flüssigkeit etc.). Der Chromgehalt der Schnitte dient aber als Beize für Eosin und seine Verwandten. Hat man dagegen mit Hämatoxylin gefärbte, alkalische Schnitte, welche nicht chromirt w^aren, so wird man häufig finden, dass die Eosine beim Versuch des Auffärbens ganz versagen. Ferner sollten die nicht amidirten sauren Anilinfarben , hier die Eosine, eigentlich sauer aufgehoben werden, um die Haltbarkeit zu be- günstigen ; ging aber Hämatoxylin voran , so muss man ja alkalisch machen, und so passen Hämatoxylin und Eosin, im Princip betrachtet, eigentlich überhaupt nicht zusammen. Ganz anders stellt die Sache, wenn man zur Nachfärbung einen Amidoazokörper wählt. Diese Farben haben z u r B e d i n g u n g , dass man den Schnitt alkalisch macht, sie „ziehen" eben gerade auf die alkalischen Schnitte. Es kommt daher auch gar nicht darauf an, wie das Gewebe fixirt wurde. Mau färbt in gewohnter Weise mit einem der blauen Hämatoxyline , macht alkalisch und überträgt die Schnitte in eine Lösung von Congo oder Benzopurpurin (be- züglich der Literatur siehe die Encyklopädie der mikroskopischen Technik). Jetzt wird sich die Farbe im Schnitt festsetzen ; man darf sogar ein wenig überfärben und in absolutem Alkohol differen- ziren, worauf der Schnitt sofort durch Xylol in neutralen Balsam ge- bracht wird. Der Theorie nach muss die Färbung jetzt unbegrenzt haltbar sein. Im einzelnen ist Folgendes zu beachten. Ich verwende vorzüglich das Congo-Corinth G und das Benzopurpurin G B (Elberfelder Farb- werke , A'Ormals Friedrich Bayer & Co.) ; jenes färbt die Ge- webe mehr blauroth , dem Alaun-Carmin ähnlich, dieses liefert ein sehr feuriges Gelbroth. Das Congo - Corinth hat ferner die an- genehme Fähigkeit , stark zu egalisiren und ist somit sehr gut ver- wendbar für alte Stücke aus MtJLLER'scher Flüssigkeit, welclie etwa die Neigung haben sollten, sich an der Oberfläche anders zu färben als in der Tiefe. Diese Farben können entweder in Wasser oder in Alkohol ge- löst werden; ich für meinen Theil habe fast ausschliesslich frisch 182 Heidenhain: Verwendungd.Cong'ou. anderer Amidoazokörper. XX, 2. bereitete gesättigte calkoliolische Lösungen gebraucht, und zwar aus folgendem Grunde. Ich habe mich seit Jahren daran gewöhnt, fast alle Schnitte, auch zu Kurszweckeu, aufzukleben (wenn nöthig mit Eiweisslösung), denn die Färberei ist einmal bequemer, und ferner wird viel weniger Material vergeudet, wenn die Schnitte, sei es einzeln auf dem Object- träger, sei es in Masse auf der Glimmerplatte, fixirt sind. Macht man nun die auf die Unterlage aufgezogenen Schnitte im Wasser alkalisch durch Zusatz geringer Mengen doppeltkohlensauren Natrons, so haben sie die Neigung , sich abzulösen , da Alkah unter allen Umständen eiweisslösend wirkt. Daher übertrage ich die auf- geklebten und bereits mit Hämatoxylin gefärbten Schnitte in Alkohol und setzt diesem einen oder einige Tropfen Salmiakgeist, oder an Stelle dessen sehr geringe Mengen einer äusserst schwachen Natron- lauge (2 : 1000) zu. Nun werden die Schnitte sicherlich nicht davon- schwimmen , denn Eiweiss ist in starkem Alkohol unlöslich. Ich darf sie jetzt aber überhaupt nicht mehr in Wasser übertragen und muss daher auch die Farblösung al k o h o 1 i s c h nehmen. Zu dem Behufe gebe ich etwa eine Messerspitze der Farbe auf 100 cc Alkohol und suche durch längeres kräftiges Schütteln möglichst viel zu lösen. Hierauf wird filtrirt und die Farblösung über die in dem alkalischen Alkohol gebläuten Schnitte gegossen. Es ist gut, die Schnitte ein wenig, nicht viel, zu überfärben und darauf in reinen, absoluten Alkohol zu übertragen, welcher wiederum einen gewissen Antheil der Farbe auszieht. Danach kann in Xylol übertragen werden. Dieselben Färbungen habe ich mit grossem Vortheil auch nach Eisenhämatoxylin angewendet. Von den allgemeinen Färbungsresultaten habe ich schon ge- sprochen; nur möchte ich bemerken, dass im Verhältniss zum Eosin die Resultate bei weitem günstiger sind. Eosin färbt vergleichsweise diffuse, die Congofarbstoffe hingegen distinct. Ausserdem ist ein besonderer Vortheil, dass in vielen Präparaten die elastischen Fasern mit hinreichender Deutlichkeit zum Vorschein kommen , so dass sie bei Gelegenheit der mikroskopischen Kurse einen Gegenstand des Studiums bilden können. Es sind bereits eine ziemlich grosse Anzahl von Präparaten, die ich gelegentlich des Kurses mit DELAFiELü'schem Hämat- oxylin und nachfolgend mit Cougo - Corinth oder Benzopurpurin ge- färbt habe. Um eine Vorstellung davon zu geben, was sich er- XX,2. Heidenhain: Verwendungd.Congou. anderer Amidoazokörper. 183 reichen lässt, will ich Einiges davon kurz zur Besprechung bringen. Da ist z. B. die Schweinsleber^ deren Bindegewebssepten sich schön feuerroth färben lassen; ebenso ist ein gutes Object die Milz vom Menschen und von Thieren, deren Trabekel (mit Benzo- purpurin) prachtvoll leuchtend hervortreten. Hier, bei einem Organ mit vielen Gefässen, findet man gewöhnlich auch Gelegenheit, elastische Häute und elastische Fasern demoustriren zu können. Ueberaus schön Hessen sich in dieser Weise Schnitte der Fundusschleimhaut (von der Katze, Beuzopurpurin) färben: die Muscularis mucosae, das interstitielle Bindegewebe und vor allen Dingen die Belegzellen traten prächtig hervor. Besonders gut fiel die Färbung alter Rückenmarks- schnitte aus (nach Härtung in MtJLLER'scher Flüssigkeit) ; die Achsen- cylinder zeigen sich ebenso gut gefärbt wie bei guten Carmin- präparaten, und man hat dabei den Yortheil der blauen Färbung der Kerne ; in Folge dessen treten in der weissen Substanz die Gliakerne bei weitem besser hervor als bei jeder Carminfärbung. Für Färbung von Muskelquerschnitten eignet sich Congo-Corinth; ver- mittels dieser Farbe hatte ich auch prächtige Resultate an dem be- kannten, beliebten Präparat von der Froschblase, welches dem Her- kommen nach dazu dient, den Anfängern die glatte Musculatur zu zeigen. Hier färbten sich die feinsten Verästelungen der Muskel- bündelchen , und in den stärkeren Trabekeln konnte man sehr gut die einzelnen Faserzellen von einander unterscheiden. ^ In zweiter Linie wünsche ich einige neue Neutralfärbungen zu besprechen. In einer früheren Arbeit über das menschliche Herz^ habe ich gezeigt, dass es sich unter Umständen lohnen kann, die Neutralfarben im Schnitt zu entwickeln und darauf mit Alkohol, be- ^) Um dieses Präparat von der Froschblase gut zu erhalten, binde ich den Darm oberhalb der Blase ab und injicire vom After aus Drittel- alkohol, bis die Blase prall gespannt ist. Die Kanüle bindet man in der Weise ein, dass man die Haut um den Anus herum umschneidet und sie über der Kanüle zusammenbindet. Beim Herausziehen der letzteren bindet man den Anus auf die nämliche Weise ab. Nunmehr schneide ich den ganzen Körper des Frosches rund um die Blase herum ab und hänge sie auf 24 Stunden in Drittelalkohol ein. Am nächsten Tage wird die Blase ab- und aufgeschnitten, in Hämatoxylin gefärbt und das Epithel abgepinselt. Die Congofärbung folgt zuletzt nach. '-) Ueber die Structur des menschlichen Herzmuskels. (Anat. Anz. Bd. XX, 1901.) Siehe dort die allgemeine Technik der Neutralfärbungen. 184 Heidenhain: Verwendung d. Congou. anderer Amidoazokörper. XX,2. ziehiingsweise Methylalkohol zu diiferenziren. Au der quergestreiften Musculatur wenigstens bekommt man nnter Umständen auf diese Weise prächtige Färbungseffecte , und zwar sowohl ausgezeichnete, zum Theil ganz ueue Bilder der Querstreifung , wie auch speciell vom Herzen wunderbare, sehr scharfe Ausfärbungen der von mir so- genannten Schaltstücke. Seiner Zeit brachte ich "zur Besprechung, dass zwar nicht alle, wohl aber manche saure Anilinfarben, wenn sie auf den Schnitt auf- gefärbt werden, die Fähigkeit nicht verlieren, mit gewissen basischen Farben festhaftende , schwer lösliche Neutralfarben zu bilden ; diese sind es dann , welche vorzüglich die Färbung der Schaltstücke ermöglichen. Saure Anilinfarben der gedachten Art sind nach meinen früheren Erfahrungen Thiazinroth, Thiaz in- braun und CöruleinS; basische Farbkörper, welche mit den ge- nannten im Schnitt zu Neutralfarben sich vereinen , sind gegebeii in der Gruppe der LAUTH'schen Farbstoffe (Toluidiublau , Thioniu, Methylenblau) und im Safrauin. Obwohl nun die am Herzen erhalteneu Resultate zum Theil äusserst befriedigend waren, so zeigte sich doch, dass die bisherigen Färbungen nicht ausreichten , um bei Embryonen und jugendlichen Thieren die Schaltstücke zu färben , ein Ziel , das ich auch durch die neuen Versuche nicht vollständig erreichen konnte. Wohl aber gelang es mir, die alten Färbungen in zweckmässiger Weise zu variireu und zu erleichtern. Ich musste mir von vornherein sagen, dass besser wirkende basische Farbmittel sich nicht würden auf- finden lassen; wohl aber konnte ich darauf ausgehen, saure Farb- körper zu suchen, die an sich selbst schon die Fälligkeit hätten, jene viel umstrittenen Schaltstücke des Herzeus wenigstens einiger- maassen sichtbar zu machen. Diese sollten dann aber zweitens meinem Wunsche nach obendrein die Möglichkeit gewähren, sich durch Combination mit Safranin, Toluidiublau etc. in die entsprechenden Neutralfarben umwandeln zu lassen. Diese gesuchten Eigenschaften besitzen nun das Blauschwarz B und Brillantschwarz 3 B, zwei nahe verwandte hochmoleculare Azofarbstoffe , welche von der Badischen Anilin- und Sodafabrik hergestellt werden. ^ Ich gebe gern zu , dass , was die äusserste Schärfe der Dar- 1) Die Formeln siehe in dem Aufsatz : „Ueber chemische Umsetzungen zwischen Eiweisskörpern und Anilinfarben." (Arch. f. d. gesammte Phy- siol., Bd. XC, p. 214.) XX, 2. Heidenhain: Verwendung d. Congou. anderer Amidoazokörper. 185 Stellung anlangt, die früheren Combinationen Cörulein S-Safranin und Thiazinroth-Toluidinblau meinen neuen Färbungen überlegen sind; was aber die Leichtigkeit der Anfertigung und die Pracht der Färbung anlangt, so ist die neue Combination Brillantschwarz- Safranin das Beste , was mir gelungen ist. Ausserdem konnte ich vermöge der Combination Brillautschwarz-Toluidinblau zum ersten Male bei einem jugendlichen Thiere , dem Kalbe , die Lage und Verbreitung der Schaltstücke genauer überseben und ein Urtheil darüber gewinnen, warum eigentlich die Schaltstücke in diesem Falle so schwer aufzufinden sind. Hierüber werden später weitere Veröffentlicbungen erfolgen. Das Blauschwarz B und Brillantschwarz 3 B sind zwei sehr ähnliche Farbstoffe , deren Eigenschaften jedoch im einzelneu aus- einandergehen. Beide wende ich in einprocentiger Lösung auf dünne Schnitte nach Subliraatfixirung an. Beim Blauschwarz färbt man nur 5 bis 10 Minuten, da leicht Ueberfärbung eintritt; das Brillant- schwarz ist in dieser Beziehung sehr viel toleranter und erfordert nicht ein ängstliches Innehalten genau bestimmter Färbezeiten. Färbt man Drüsenschnitte, etwa Thyreoidea, in Blauschwarz, so sieht man gleich, dass die Epithelien und die Kerne nur schwach und wenig charakteristisch in röthlich violettem Tone tingirt werden; dagegen nimmt das Bindegewebe eine tief dunkel blauschwarze Färbung an. Hierbei werden auch die Bindegewebsfibrillen , die Basalmembranen der Epithelien und die lamellösen Formen des Bindegewebes gut herausdifferenzirt. Man erzielt daher einen hübschen Effect , wenn man einen Drüsenschnitt erst mit Carmin , dann mit Blauschwarz tingirt. In diesem Falle werden die Epithelien wesentlich nur die Farbe des Carmins , das Bindegewebe sammt den Basal- membranen die Nuance des Blauschwarz annehmen. Am Herzen muss man die Färbung der Zeit nach sorgfältig abpassen. Bleiben die Schnitte zu hell , so sind die Schaltstücke unscharf; werden sie zu dunkel, so sind die Präparate wenig brauchbar. Ist die Färbung richtig getrofi'en, so findet man an hin- reichend dünnen Schnitten (.3 bis 4/i) oft eine prächtige Färbung der Schaltstücke : der Nuance nach gehen sie und die Z - Streifen mehr nach dunkelblau , die übrige Muskelsubstanz mehr nach Roth- violett ; Bindegewebe und Capillarwände sind blau , letztere merk- würdig scharf gezeichnet. Die Metachromasie zwischen den blauen und rothen Tönen ist stark ausgesprochen; woher sie indessen rührt, vermag ich nicht zu sagen. Im ganzen muss ich von der directen 186 Heidenhain: Verwendiingd.Congou. anderer Amidoazokörper. XX, 2. Färbimg- der Herzmiiskelscbnitte mit Blauschwarz abrathen , da man zu viel unter- und überfärbtes Material erhält. Mau ist also darauf angewiesen , mit einem basischen Farbstoffe nachzufärben und die Neutralfarbe zu differeuziren. Hierfür eignet sich in diesem Falle das Toluidinblau, die nachgefärbten Schnitte sind leicht differenzirbar, und man erhält häufig sehr schöne Färbungen der Sclialtstücke. Das Br illant s eh war z 3 B liefert direct aufgefärbt sehr ähnliche Bilder wie das Blauschwarz. Jedoch sind keine so auf- fallenden Metachromasieu vorhanden. Die besonderen Eigenthümlich- keiten in der Färbung des Bindegewebes , der Capillarwände , der Z-Streifen und der Schaltstücke sind diesem Farbstoffe mit dem vorigen gemeinsam , dabei überfärbt er nicht so leicht und ist des- wegen angenehmer zu gebrauchen. Auf den Herzmuskel angewendet, habe ich mitunter auf directem Wege excellente Färbungen entstehen sehen ; doch kann man sich leider nicht darauf verlassen, und es ist besser, mit Toluidinblau oder Safranin nachzufärben und die Neutral- farbe zu differeuziren. Mit Toluidinblau erhält man eine sehr schwer difl'erenzir- bare Neutralfarbe , weswegen die Schnitte recht dünn sein müssen. Die Schaltstücke lassen sich recht gut färben, und ich erhielt mit dieser Combination sogar positive Resultate an dem schwer färbbaren Kalbsherzen. Diese Färbung taugt auch für andere Dinge. Nach Härtung in Trichloressigsäure (5- bis lOprocentig) kann man schwierig darstellbare Drüsengranula nach dieser Methode sichtbar machen, wenn man die in Brillantschwarz -Toluidinblau tingirten Präparate auf kurze Zeit in Safranin bringt und dann mit Alkohol auswäscht. Das Safranin wirkt hier wesentlich nur im Sinne einer Erleichterung der Lösung der Neutralfarbe. Auf diese Weise gelang es , die sehr schwer färbbaren Granula der Thränen- drüse in befriedigender Weise sichtbar zu machen. Lässt man auf Brillantschwarz sofort S af ran i n (Phenosafranin) folgen, so erhält man eine leicht differenzirbare Neutralfarbe, welche in der Anwendung auf den Herzmuskel die prächtigsten Bilder liefert. Diese Combination ist offenbar die bequemste und sicherste zur Dars t ellung d e r Schaltstücke und Z-Streifen, wenn auch, wie schon erwähnt, bei sehr starken Vergrösserungen, also beim Maximum der Ansprüche , die Combinationen Thiazinroth- Toluidinblau, Cörulem S-Safranin sich besser bewähren. [Eingegangen am 6. October 1903.] XX, 2. Harz: Paraffinöl als Eisatz für Canadabalsam. ig? Paraffiuöl als Ersatz für Canadabalsam zu mikro- skopischen Dauerpräparaten. Von Dr. C. 0. Harz in München. Zur Herstellung botanisch - mikroskopischer Präparate dient all- gemein und vorwiegend das Glycerin. Ein Ersatz desselben durch die seit über 30 Jahren versuchten Glycerin-Arabin und Glycerin- Gelatine hat sich meist als ganz misslungen erwiesen, wenigstens sind die von mir und einigen Freunden früher so hergestellten Prä- parate heute fast ausnahmslos veudorben. Wie in der Zoologie und anderwärts fast allgemein, ist auch bei botanischen, besonders vorbehandelteu und gehärteten, entwässerten Objecten der Canadabalsam in erster Reihe verwendet und seit etwa 30 Jahren auch der letztere durch Präparate aus Storax, Liquidambar und Tolubalsam theilweise ersetzt worden. Unter den niederen Organismen sind es besonders die mehr zu den Protisten als zu den Pilzen gehörenden Spaltpilze, welche fast ausschliesslich in Canadabalsam eingebettet werden. Der hohe Brechungsquotient des letzteren, seine bequeme Hand- habung, die leichte und billige Beschaffung in bester Qualität sichern diesem Balsam auch fernerhin für zahlreiche Objecte dauernden Gebrauch. Als Nachtheil wird allgemein anerkannt, dass eine spätere Um- bettung mit gewissen Uebelständen verknüpft ist, und dass es sich bei misslungenen oder sonst unbrauchbar gewordenen Präparaten kaum mehr lohnt, eine Reinigung von Deckglas und Objectträger vorzunehmen. Seit über zwei Jahren habe ich zahlreiche Präparate , nament- lich von Spaltpilzen , mittels s ä u r e f r cf e n , k r y s t a 1 1 h e 1 1 e n und farblosen Paraffinöles hergestellt und damit vorzügliche Re- sultate erzielt. Gleichzeitig und vergleichshalber mit Canadabalsam gefertigte Präparate derselben Objecte fielen vielfach zu Gunsten des Paraffinöles aus, so dass ich heute nicht zögere, letzterem den Vor- zug vor jenem zu geben. 188 Harz: Paraffinöl als Ersatz für Canaclabalsam. XX, 2. Die Spaltpilze werden in derselben Weise wie für die Canada- balsameinbettimg vorbeliaudelt , und nach vollkommener Trocknung in das Paraffinöl eingebettet. Die Spaltpilze zeigen dabei sehr scharfe Umgrenzungen , schrumpfen nicht und bewahren ihre Fär- bungen ebenso gut wie im Canadabalsam. Um der vollkommenen Wasserverdunstung sicher zu sein , lasse ich die gefärbten und ab- gewaschenen, lufttrockenen Objecte meist etwa eine Stunde bei 100 bis 110*^ C im Trockenschranke verweilen und bette erst nach der Abkühlung in das Paraffinöl ein. Den Verschluss bewirke ich mittels einer etwa lOprocentigen Gelatine , der ein Procent Carbolsäure zugesetzt wurde. Dieselbe befindet sich sammt einem feinen Pinsel in einer Probirröhre und wird vor jedesmaligem Gebrauch über einer Flamme verflüssigt. Mitunter ist ein geringer Zusatz von Farbstoif erwünscht : Anilin- farben, Zinnober, Mennige, Chromgelb etc. Die so hergestellten Präparate haben den Vortheil , falls sie nicht genügend gut ausgefallen oder überflüssig geworden, dass mau sie durch Einlegen in Wasser während einiger Minuten leicht aus einander nehmen und Deckglas und Objectträger ohne Mühe reinigen und wieder verwenden kann, da sich dasselbe unter anderem leicht löst in Petroleumäther, Xylol, Toluol u. a. bekannten Lösungsmitteln für Fette und physikalisch verwandte Substanzen. Herr Professor Dr. K. Fischer in München hatte die grosse Freundlichkeit, die von mir verwendeten Paraffinöle, Glycerin, Canada- balsam, sowie einige andere Flüssigkeiten auf deren Breclmngs- quotienten und Dispersion vergleichend zu untersuchen und dabei für 18^ C. folgende Werthe gefunden: n für r = ;'-Linie Dispersion n HZ Wasser . . . Glycerin . . Paraffine)! . . Xyl..l . . . Canadabalsam 1-3332 0-00554 1-4673 0-00749 1-4805 0-00833 1-4940 0-01523 1-5295 0-01235 Hieraus erklärt sich die dem Canadabalsam nahe kommende vorzügliche Verwendbarkeit des Paraffinöles. [Eingegangen am 22. August 1903. | XX, 2. Strehl: Ueber die Natur des Vorticellenstieles. 189 lieber die Natur des Yorticellenstieles. Von Karl Strehl in Erlangen. Unter obigem Titel schreibt Herr Dr. G. Brandes (Halle) in der Jenaischeu „Zeitschrift für Naturwissenschaften" 1903, p. 460: „Dieser Vorgang erklärt sich ganz ungezwungen, wenn wir den Stiel als eine elastische Faser ansehen, die nach der Art eines Gummi- bandes durch die lebendige Kraft gedehnt wird und beim Aufhören der Triebkraft sofort wieder in ihre ursprüngliche Lage zurück- schnellt." Er findet es schwierig, vom histologischen Standpunkt aus den Stiel als Muskelfaser anzusehen , vom physiologischen aus die Reizleitung als nervöse zu begreifen , zudem die spiralige Zu- sammenrolluug zu erklären. Abgesehen davon, dass die spiralförmige Ruhelage durch obige Annahme auch nicht erklärt wird , erinnere ich mich folgender meines Erachtens gegen diese entscheidenden Beobachtung: Eine Vorticelle hatte sich von ihrem Stiel losgerissen ; dieser (im Mo- ment des Losreissens natürlich gedehnt) rollte sich spiralig zu- sammen, dehnte sich hierauf langsam wieder aus; ob er sich schliesslich noch einmal zusammenrollte , ist mir leider nicht mehr erinnerlich. Ich musste unwillkürlich an die spontanen Zuckungen abgerissener Insectenbeine u. s. w. denken (den Stachel des abgeschnitteneu Hinterleibes einer Hornisse sah ich einmal eine halbe Stunde lang noch wie wüthend um sich stechen). Der Vorticellenstiel zeigt sich mithin mindestens als pseudomusculöses mit pseudonervöser Reizleitung begabtes Organ. Ich glaube nicht, dass genannte Erscheinung durch eine Art elastischer Nachwirkung wird erklärt werden können. Und somit übergebe ich meine bescheidene Beobachtung der Oeffentlichkeit zur geneigten Beurtheilung und eventuellen Verwerthung. [Eingegangen am 6. October 1903.] 190 Referate. XX, 2. Referate. 1. Lehr- und Handbücher. Reziiik, B. , Technika Mikroskopicka [Mikroskopische Technik]. Brihml903. 168 pp. 8*^. 2 K. ö. W. Die Kapitel I bis III bespreclien das Mikroskop imd seine Hülfs- mittel, IV erwähnt kurz die Mikrophotographie, V die nothwendigen Geräthschaften, VII bis IX die ersten Uebungen und die Verwahrung der Instrumente, X Beobachtung lebender Organismen, XI Beobach- tungen in indifferenten Flüssigkeiten, XII Maceriren, XIII Entkalkung, Entkieselung etc., XIV Fixiren, XV Härtung, XVI Aufhellung, XVII Einbettung, XVIII Schneiden, XIX Aufkleben der Schnitte, XX Fär- bung (Allgemeines und Theorie der Färbungen) , XXI, XXII Dauer- präparate , XXIII bacteriologische Präparate , XXIV Dünnschliffe, XXV Messungen , XXVI Bestimmung des specifischen Gewichtes, XXVII Imprägnationen , XXVIII Injectionen , XXIX Entomologische Objecte , XXX Präparation der Diatomeen , XXXI Planktonunter- suchung, XXXII Das Mikroskop im Dienste der Schule, XXXII 1 Das Mikroskop im Dienste der Justiz , Blutproben , XXXIV Andere An- wendungen des Mikroskopes. — Hierauf folgt ein „Receptarium", 104 Recepte zu F'ärbungen^ Einschlussmitteln, Reagentien etc. ent- haltend, daran schliessen sich ein Literaturverzeichniss (102 Nummern) und ein Register. Das Büchlein ist in einem bündigen Stile abge- fasst, um auf kurzem Wege das gesteckte Ziel zu erreichen. Es ist besonders für Lehrer und Studirende geschrieben , denen bisher ein solcher Katechismus in böhmischer Sprache fehlte. Was die Literatur- angaben anbelangt , so wurde besonders die deutsche , reichhaltige I XX, 2. Referate. 191 mikroskopische Literatur ziemlich eingehend angeführt , und auch im Text wurden überall die Autoren der betretfenden Methoden ge- nannt. F. Roxntk (Nnilia/fs i. B.). 2. Präparationsmethoden im allgemeinen. Bolles Lee, A., L'eclairage et Temploi du condensateur dans la micrographie histologique (La Cellule, T. XIX,' fasc. 2, 1901, p. 405—431). Man verwendet zum mikroskopischen Arbeiten als Beleuchtungs- quelle gewöhnlich das Tageslicht und nur im Nothfalle künstliches. Das ist nach Verf. durchaus unrichtig. Nach seiner etwa 30jährigen Erfahrung ist das künstliche Licht, richtig angewendet, immer besser als das Tageslicht. Für ganz leichte Beobachtungen, z. B. wenn man eine Reihe von Schnitten oberflächlich durchsehen will , um ein bestimmtes Stadium der Karyokinese zu tinden, kann man das Tages- licht wohl verwenden, aber auch hierfür ist Lampenlicht besser, falls die Arbeit längere Zeit dauert, da es viel angenehmer und weniger ermüdend für die Augen ist. Für wirklich feine Untersuchungen m u s s man dagegen die Lampe anwenden , da das Tageslicht bei weitem nicht so gute Resultate ergiebt. Verf. empfiehlt nun am meisten eine Petroleumlampe mit flachem Docht, am besten die von Nelson, welche an Stelle eines Glaseylinders mit einem Metallcyliuder versehen ist , der an seinem unteren Ende an einer Seite ein recht- eckiges Fenster besitzt, das durch eine plane Glasplatte verschlossen ist. Die grösseren Modelle sind mehr zu empfehlen, da die Ver- brennung bei ihnen vollständiger ist. Man vermag bei dieser Lampe bald die breite , bald die schmale Seite der Flamme einzustellen. Man kann dieses erreichen, indem man bei manchen Modellen den metallischen Cylinder um die Flamme dreht, bei anderen (z. B. dem von Swift oder dem von Beck) bleibt der Cylinder unbeweglich, und der Brenner der Lampe dreht sich. Dieses letztere Modell empfiehlt Verf. am meisten. Die Lampe von Beck ist mit zwei einander gegenül)er stehenden Fenstern versehen. Verf. hält das für einen Fehler, da Reflexe entstehen ; das Innere der Lampe muss möglichst mattschwarz sein. Die Lampe von Nelson ist mit einem verstell- baren „buU's eye" versehen, um die Strahlen parallel zu machen. 192 Referate. XX, 2. Die nach Verf. beste derartige Lupe, der „Aplanatic biiU's eye", wird von Baker (C. Baker, Optician , 244, High Holborn, London) her- gestellt. Er ist theurer als die anderen, dafür aber auch bedeutend besser. Es ist nach Verf. sehr wichtig, dass die Lupe mit der Lampe fest verbunden ist, man kann so in bedeutend kürzerer Zeit richtig einstellen. Die Lampe von Dallinger ist im wesentlichen ebenso gebaut wie die von Nelson, doch ist sie umständlicher in der Handhabung. Sobald die Lampe ausgelöscht ist, soll man den Metallcylinder entfernen, da er sich sonst bald mit einer Petroleum- schicht bedeckt und bei erneutem Anzünden riecht. Wenn man eine gute Beleuchtung haben will, muss man die Lampe wenigstens eine halbe Stunde vor Beginn der Arbeit anzünden. Verf. bespricht des weiteren sehr eingehend die Benutzung von farbigen Gläsern , die Benutzung des einfarbigen Lichtes, der Condensatoren etc., wes- wegen auf das Original verwiesen wird. Schieferdecker {Bonn). Jiistus , I. , U e b e r den physiologischen J o d g e h a 1 1 der Zelle (Virchow's Arch. Bd. TLXX, H. 3, 1902, p. 501 —517 m. 1 Tfi.). Verf. suchte eine Methode ausfindig zu machen, um das Jod mikrochemisch in den Zellen nachweisen zu können , und zwar auf Grewebsschnitten , die zur mikroskopischen Untersuchung geeignet blieben. Die Schilddrüse enthält das Jod in complicirten organischen Verbindungen, nicht als Ion, sondern in einem Complexe. Reagentien, welche mit dem Jod -Ion charakteristisch gefärbte Verbindungen er- geben, waren daher nur zu verwenden wenn das Jod als Ion befreit werden konnte. Zu diesem Zwecke hat sich Chlor als geeignet er- wiesen. Was zunächst die Herstellung und Prüfung der Reagentien anbetritft, so ist der Alkohol des Handels im allgemeinen jodfrei. Um einen etwaigen ffodgehalt zweifellos auszuschliessen , soll man den Alkohol mit 5 Procent kaustischen Kali überdestilliren. Chlor- g a s wird aus Braunsteinstückchen mit Salzsäure erzeugt , behufs Reinigung durch Wasser und Lösung von Kaliumhypermanganat ge- leitet und in destillirtem Wasser aufgefangen. Zur Erkennung einer Verunreinigung mit Jod versetze man das Chlorwasser mit etwas ül)erschüssiger schwefliger Säure und erzeuge mit salpetersaurem Silber einen dicken weissen Niederschlag. Letzterer löst sich leicht ohne Ueberrest in Ammoniak und gesättigter, warmer Kochsalzlösung, zum Beweise, dass weder Bromsilber noch Jodsilber darin enthalten sind. Ein anderes Verfahren, die Gegenwart von Jodsilber im Nieder- XX, 2. Referate. 193 schlage nachzuweisen, besteht darin , dass man denselben mit Salz- säure und Zinkmetall einer lange dauernden Reduction unterwirft und das Filtrat auf Jodzink untersucht. Zur Controle wurde ein jedes Reagenz der Reihe nach durch ein anderes ersetzt. Statt des Alko- hols wurde eine 4procentige Formollösung verwendet. Nach 24stün- diger Einwirkung wurden mit dem Rasirmesser dünne Schnitte angefertigt, in destillirtem Wasser ausgewaschen und mit Chlorwasser behandelt. Das Chlorwasser war als Reagenz ganz unentbehrlich, wurde aber auf verschiedene Weise hergestellt, so einmal aus Braun- stein und Kochsalz mit Schwefelsäure , das andere Mal aus chlor- saurem Kalium und Salzsäure. Methode: Die Schnitte des in Alkohol iixirten und in Celloidin eingebetteten Organes werden in einer Schale mit Wasser von dem Alkohol befreit , dann in ein kleines, mit gut passendem Glasstöpsel versehenes, weithalsiges Ge- fäss übertragen, das etwa zwei Finger hoch destillirtes Wasser ent- hält. Man giesst dann das Wasser von den Schnitten ab und etwa ebenso viel frisch bereitetes, grüngefärbtes Chlorwasser hinein. Die Schnitte verbleiben darin eine bis 2 Minuten (allenfalls bis zu ihrer vollständigen Entfärbung) in dem fest geschlossenen Glase und wer- den dann mit einer Glas- oder Platinnadel in eine verdünnte Lösung von salpetersaurem Silber übertragen. Hierin werden sie in kurzer Zeit blassgelb, darauf gelbgrün. Nach 2 bis ,3 Stunden (im Dunkeln) erreicht die Farbe ihre volle Intensität; in der Silberlösung entsteht ein wolkiger, weisser Niederschlag von Chlorsilber. Nach 2 bis 3 Stunden werden die Schnitte in eine gesättigte, warme Kochsalz- lösung gebracht, hellen sich in dieser, da das Chlorsilber gelöst wird, bald auf, imd zeigen eine reine, schwach gelbe bis canarien- gelbe Farbe, die Farbe des Jodsilbers in sehr dünner Schicht. Werden die Schnitte aus der Kochsalzlösung nach vorherigem Auswaschen in destillirtem Wasser in concentrirte 4- bis öprocentige Sublimatlösung gebracht, so wandelt sich die Farbe in einigen Augenblicken in blassgelbroth, rosa und endlich in Zinnober um, da das Jodsilber in Quecksilberjodid übergeht. Was die oben angewendete Silbernitrat- lösung anlangt, so Avird dieselbe am besten sehr verdünnt angewendet. Die Schnitte wurden aus dem Chlorwasser in 500 cc Wasser über- tragen, welchem 1 cc einer einprocentigen Lösung von Silbernitrat zugesetzt war. Trotzdem war es nicht möglich , die Bildung von Chlorsilber vollständig zu vermeiden, das sich zum Theil auch in den Schnitten niederschlägt. Zu der Auflösung dieses wurde ein econ- centrirte Kochsalzlösung benutzt (eine bis 2 Stunden, manchmal auch Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 2. 13 194 Referate. XX, 2. länger), in ihr behalten die Schnitte, auch bei Lichteinwirkuug, ihre gelbe Farbe einen bis 2 Tage ; nach längerer Zeit verblasst sie. Das Jodsilber in Quecksilberjodid umzuwandeln ist vortheilhaft , da die rothe Farbe unter dem Mikroskope besser hervortritt. Bevor mau die Schnitte aus der Kochsalzlösung in die Sublimatlösung überträgt, müssen sie erst in destillirtem Wasser ausgewaschen werden. Zur mikroskopischen Untersuchung müssen die Schnitte aufgehellt wer- den, doch sind die gewöhnlich hierzu verwendeten ätherischen Oele unbenutzbar , da sie die .Jodverbindungen schnell reduciren , ebenso Alkohol-Xylol. Am besten verwendet man mehrfach destillirtes, chemisch reines Glycerin, in dem die Schnitte ihre Farbe bis 24 Stunden be- wahren. Um die Farbe richtig zu beurtheilen, muss man ausserdem einen AsBE'schen Condensor verwenden, bei möglichst weit geöffnetem Diaphragma. Verf. kommt zu dem Resultate , dass alle Kerne Jod enthalten. Schiefferdecker (Bonti). Unna, P. G., Zur Differentialdiagnose z wisch en Hyalin und Bacillen hüllen im Rhinoskleromgewebe (Monatsh. f. prakt. Dermatol. Bd. XXXVI, 1903, p. 76—79). Unter Umständen ähneln die Hyalinkugeln solchen Bacterien, die eine breite, homogene Schleimhülle um sich herum ausbilden, z. B. Rhinosklerombacillen. So viele gute Färbemethoden es für das Hyalin giebt, so gab es doch nach Verf. bisher noch keine , welche gleichzeitig das Hyalin gut und die Bacillen in einem überall deut- lichen Contrast zeigt. Verf. theilt drei gute Methoden mit, welche an in Alkohol gehärtetem, allen anderen Färbungen zugänglichem Rhinoskleromgewebe jedes isolirte Hyaliuklümpchen von einem Bacillus mit SclileimhüUe diiferenzirt zeigen und dabei ebenso einfach wie sicher sein sollen. I. Polychromes Methylen blau-rot he Blutlaugen- salz-Methode. Polychrome Methylenblaulösung 5 Minuten, gut in Wasser abspülen , einprocentige Ijösung von rothem Blutlaugensalz. Man bringt die Schnitte mit der Platinnadel hinein und lässt sie eine bis 2 Minuten darin. Auch weiterhin ist, um Niederschläge zu vermeiden, eine Platinnadel zu verwenden. In Wasser gut abspülen. Saurer Alkohol (ein Procent Salzsäure) zur Entfärbung (eine bis 2 Minuten). Alkohol, Oel, Balsam. Der ganze Schnitt ist schwach grauviolett, nur Hyalin und Bacillen treten intensiver gefärbt hervor, und zwar mit einer Randfärbung, die der Beizung mit rothem Blutlaugensalze eigenthümlich ist. Das Hyalinklümpchen zeigt einen XX, 2. Referate. 195 dunkel violetten feinen Rand, einen ebenso gefärbten Kern und dazwischen eine ungefärbte Mittelzone. Bei den Bacillen ist nur die Eandparthie gefärbt, ein feiner he Uro th er Saum, Bacillus und Bacillenschleim sind entfärbt. II. Polychromes Methylenblau-Alkohol -(- Xylol- Anilin + Alaun m etho d e. Vor der Färbung sind die Schnitte von Celloidin zu befreien. Polychrome Methylenblaulösung 2 Minuten. In Wasser gut abspülen. Auf dem Spatel mit Fliesspapier vom Wasserüberfluss befreien. Absoluter Alkohol -f- Xylol ää. Der Schnitt wird , nur noch wenig feucht , mit dem Spatel rasch in die Mitte der Flüssigkeit gebracht und dann eine bis 2 Minuten darin gelassen zur Entwässerung. Xylol, zur p]ntfernung des Alkohols aus dem Schnitte , eine Minute. Anilin -|- Alaunmischung etwa 20 Mi- nuten, bei dicken Schnitten noch länger, zur Entfärbung. Xylol, Balsam. Das Granoplasma der Plasmazellen, die Körnung der Mast- zellen , das Spongioplasma der Schaumzellen sind trotz der starken Aufhellung des Schnittes noch deutlich. Hyalin und Hyalinzellen sind dunkelblau, bei starker Entfärbung manchmal blaugrün, Bacillen sammt Schleimhülle dunkelviolett. Auch das kleinste Schleimtheilchen ist durch die Färbung von einem Hyalinklümpchen scharf unter- schieden. Den Bacillenfaden kann mau bei der dunkeln Färbung nicht erkennen. Zu letzterem Zwecke dient die folgende Methode. III. Polychromes Methylenblau -\- Safrauin-Alkohol -f- Xylol-Anilin -|- Alaunmethode. Vor der Färbung Ent- fernung des Celloidins. Mischung von polychromer Methylenblau- lösimg 70 g und einprocentiger Safrauinlösung 30 g, Färbungsdauer 20 Minuten. In Wasser gut abspülen. Auf dem Spatel von Wasser- überschuss mit Fliesspapier befreien. Mit dem Spatel rasch in eine Mischung von absolutem Alkohol und Xylol ää bringen und eine bis 2 Minuten darin lassen zur Entwässerung. Xylol eine Minute zur Entfernung des Alkohols. Anilin -\- Alaun -|- Orangemischung 20 Minuten. Xylol , Balsam. Die Anilin -\- Alaun -)- Orange- mischung kann von Grübler fertig bezogen, aber auch jederzeit her- gestellt werden, indem man eine Messerspitze Orange auf ein Watte- bäuschcheu im Trichter bringt und die Alaun- Anilinmischung hin- durchfiltrirt, bis das Filtrat eine dunkelbraune Färbung angenommen hat. Der ganze Schnitt ist schwach violett. Die Zellen aller Art treten deutlich , wenn auch schwach gefärbt , hervor, Hyalin hell- (durchsichtig)safraninroth , ebenso , nur etwas dunkler , alle Schleim- hüllen der Bacillen , doch sind diese auf den ersten Blick zu er- 13* 196 Referate. XX, 2. kennen durch den dunkelvioletten , bacillären Achsenfaden , der sie alle constant durchzieht. Scltiefferdecker [Bonn). Unna, P. G. , Eine Modification der Pappenheim' sehen Färbung auf Granoplasma (Monatsh. f. prakt. Dermatol. Bd. XXXV, 1902, p. 76—80). Pappenheim hat bekanntlich vor kurzem seine Methylgrün- Pyroniu-Methode auch für Gewebsschnitte verwendbar gemacht (durch Resorcin). Unna hat sich nun , da er die grossen Vorzüge dieser Färbungsmethode für bestimmte Zwecke erkannt, bemüht, sie noch etwas sicherer und gleiclmiässiger wirkend zu gestalten. Die be- sonderen Vorzüge der PAPPENHEiM'schen F'ärbung begründen sich in letzter Instanz auf die Eigenschaft des Methylgrüns , das Kern- chromatin in ganz specifischer Weise zu färben und an demselben fest zu haften, mit den übrigen basophilen Substanzen des Gewebes dagegen , vor allem dem Granoplasma , sich nur so locker zu ver- binden, dass es aus ihnen durch alle, auch die einfachsten Ent- und Umfärbungsproceduren leicht und vollkommen zu entfernen ist. Ferner sind noch einige gute Eigenschaften der PAPPENHEiM'schen Methode hervorzuheben. Wenn man Schnitte desselben Gewebes einmal mit der polychromen Methylenblaulösung, ein anderes Mal mit Methylgrün behandelt, so sieht man, dass bei der ersteren die Kerne der Plasmazellen sich viel tiefer färben und das Chromatin in viel gröberen Strängen und Brocken zeigen als bei der letzteren. Hier sind die Kerne stets viel zarter und blasser gefärbt und weisen nie jene groben Chromatinnetze auf, auch wenn sie noch so lange und in noch so starker Methylgrünlösung gefärbt wurden. Es folgt daraus, dass die Kernbilder der polychromen Methylenblaulösung und des Methylgrüns nicht identisch sind. Bei einzeitigen Doppel- färbungen würde man demnach dem Methylgrün den Vorzug geben müssen , da doppelt gefärbte Schnitte um so klarer ausfallen , je zarter die Kernstructuren gefärbt sind. Auch das Pyronin war von Pappenheim sehr wohl gewählt. Verf. hat nun für Schnitte von Rhiiioskleromen , Ulcus molle und Lupus , die alle an Plasraa- zellen sehr reich und in Alkohol gehärtet waren, die folgende Mi- schung als die beste ausprobirt, bemerkt aber dabei, dass vielleicht für andere Gewebe und andere Fixirungsflüssigkeiten das beste Mischungsverhältniss wieder ein anderes sein werde. Methylgrün 0-15 g Pyronin 0"25 „ XX, 2. Referate. 197 Alkohol 2-50 g Glycerin 20*00 „ Carbolwasser, O'öprocentig 100"00 „ Färbimgsdauer 10 Minuten, Entfärbung in Alkohol, sichere und gute Contrastfärbung. Immerhin kann diese Methode es in einer Be- ziehung noch nicht mit der Färbung mittels der polychromen Methylenblaulösung aufnehmen. Das Granoplasma ist bei weitem weniger stark gefärbt , und daher entgehen der Untersuchung viele Granoplasmatheile, sowohl in den Lymphspalten wie im Umfange der Plasmatochterzellen , auf die Verf. das grösste Gewicht legt. Man kann diesen Nachtheil vermeiden , wenn man in der Wärme (30 bis 40*^) färbt. Der Unterschied ist überraschend, auch die kleinsten Granoplasmaspuren sind schön dunkelroth gefärbt, und alle Plasma- tochterzellen zeigen jene den meisten Histologen unbekannten Grano- plasma r e s t e , auf welche Verf. hauptsächlich die Herkunft der kleinen Plasmazelleu aus grossen Plasmazellen stützt. In dieser Weise ausgeführt hat die Methode einen gewissen Vortheil selbst vor der bisher zu diesem Zwecke besten Färbung (polychrome Methylenblaulösung , Alkohol -j- Xylol, Anilin -(- Alaun) voraus, in- dem die rothe Contrastfarbe das Erkennen der vielgestaltigen Grano- plasmareste an der Peripherie der blaugefärbten Kerne der kleinen Plasmazellen (Plasmatochterzellen) erleichtert. Man kann die Färbung natürlich in einem auf .37^ eingestellten Thermostaten vornehmen. Verf. bedient sich einer sehr primitiven aber vollständig ausreichen- den Vorrichtung-, die aus einem kleinen, mit Wasser halb gefüllten Metallgefässe besteht, welches durch eine darunter stehende kleine Oellampe (sogenannte Nachtlampe) beständig auf ungefähr 37^ er- halten wird. In dem Metallgefässe stehen ausser einem Thermometer einige Reagenzgläser, in denen zweckmässiger Weise die Färbung vorgenommen wird. Denn eine Hauptsache bei derselben ist die rasche Abkühlung der etwa 5 Minuten lang gefärbten Schnitte, was man durch Hin- und Herbewegen des Reagenzglases in einer grossen Schale mit kaltem Wasser oder unter dem strömenden Wasser der Leitung in wenigen Secunden erreicht. Unterlässt man diese rasche Abkühlung der Schnitte, so findet in der Farblösung wieder ein Auswaschen des Pyronins aus dem starkgefärbten Granoplasma statt , und man hat trotz der Ausfärbung in der Wärme schliesslich nur die unzureichend gefärbten Präparate , wie sie die Ausfärbung bei Zimmertemperatur ergiebt. Da der Gehalt der Misclmng an Carbolsäure dem Gewebe besonders in der Wärme bei längerer 198 Referate. XX, 2. Dauer nachtheilig werden kann, so dürfen die Schnitte nicht länger als höchstens 10 Minuten in den Reagenzgläsern verweilen. In fast allen Fällen genügt schon ein Aufenthalt von 5 Minuten in dem Wasserbade, dann rasches Abkühlen, Herausnehmen der Schnitte mit einer Platinnadel, Abspülen in Wasser, Entwässerung; schliesslich absoluter Alkohol, Bergamottöl, Canadabalsam. ScJtiefferdecker {Bonn). Fischer, B. , Ueber die Fettfärbung mit Sudan III und Scharlach R (Centralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XIII, 1902, No. 23, p. 94.3—946). Nach Verf. sind Sudan III und Scharlach R einander ziemlich gleichwerthig und der Osmiumsäure bedeutend überlegen. Sie färben, soweit sich das bis jetzt hat feststellen lassen, alles Fett (wenn auch die eine Fettart zuweilen weniger intensiv als die andere), und sie färben nur Fett, Es bestand die Befürchtung, dass, wenn man Schnitte längere Zeit in der alkoholischen Lösung eines der beiden Farbstoffe liegen liess, eventuell eine Auflösung von Fett eintreten könnte. Nach dem vom Verf. mit einer gesättigten Lösung der Farbstoffe in TOprocentigem Alkohol ausgeführten Versuche war auch nach 8 Tagen noch keine Abnahme des Fettes zu bemerken. Man kann die Farbstoffe also ruhig längere Zeit einwirken lassen, wo- durch die Färbimg bedeutend schöner und deutlicher wird (vom zweiten Tage an schlagen sich auf den Schnitten störende und kaum zu entfernende Farbstoff krystalle nieder, die natürlich mit der Zeit an Menge zunehmen). Je stärker die Farblösungen gesättigt sind, um so besser wirken sie. Am wenigsten erfüllt diese Anforderung eine frisch bereitete Lösung. Mit ihr erhält man selbst bei 24stün- diger Einwirkung oft noch recht blasse und schlechte Bilder. Eine frisch bereitete Lösung von Scharlach R in TOprocentigem Alkohol ist fast unbrauchbar. Lässt man aber diese Lösungen unter reich- lichem Zusätze überschüssigen Farbstoffes stehen, so werden sie all- mählich dunkler und ihre Färbekraft nimmt zu. Verf. hat lange Zeit nur Lösungen benutzt, die 6 Monate alt waren und damit sehr schöne Resultate erhalten. Die wirksamste von allen Farblösungen ei-hält man aber dadurch, dass man den TOprocentigen Alkohol kochend über den Farbstoff giesst. Verf. löst jetzt stets den Farb- stoff im Ueberschusse in dieser Weise und stellt die Flasche dann noch über Nacht in den Brütschrank. Mit dieser Lösimg erhält man ausgezeichnete Bilder nach 10 bis 15 Minuten bei Zimmertemperatur XX, 2. Referate. 199 oder nach einer bis 2 Minuten im Brütofen bei 37^. Die Farblösung muss vor dem Gebrauche stets frisch filtrirt, und die Farbscliälclien müssen sorgfältig zugedeclct werden. Trotzdem finden sich bei längerem Verweilen der Schnitte in der Lösung leicht FarbstotF- niederschläge auf ihnen ; bei sehr sorgfältigem Zudecken allerdings erst nach 2 bis 3 Tagen. Derartige Niederschläge lassen sich nun nicht entfernen. Eine Ditferenzirung mit öOprocentigem Alkohol ist nicht nur unnöthig sondern schädlich, da die Färbung blasser wird. Einfaches Abspülen in Wasser ist besser und sicherer. Verf. fixirt die auf Fett zu untersuchenden Stückchen 24 Stunden oder länger (im Nothfalle genügen auch wenige Stunden) in öprocentiger Formol- lösung und stellt sie dann 15 Minuten lang unter fliessendes Wasser. Dieses Auswässern der Formolpräparate wird zwar fast überall als unnöthig hingestellt, hat dem Verf. aber die besten Dienste geleistet, denn einmal gefriert ein in Formol fixirtes Object besser und leichter nach dem Auswässern, und dann werden auch die Färbungen stets hübscher. Die empfohlene Methode würde also die Folgende sein: 1) Fixiren in öprocentiger Formollösung (Formol - MtJLLER, Formol -Pikrinsäure). 2) Auswässern (15 Minuten) in fliessendem Wasser. 3) Schneiden mit dem Gefriermikrotom. Die Schnitte kommen in Wasser, dann 4) in Sudan oder Scharlachlösimg in 70- procentigem Alkohol (10 Minuten bis 24 Stunden je nach der Färbe- kraft der Lösung). Farbschälchen sorgfältig zudecken. 5) Abspülen in Wasser (2 Minuten). 6) Färben in Hämatoxylin- Alaun (eine bis 10 Minuten, je nach der Färbekraft). 7) Abspülen in Brunnenwasser (10 Minuten). 8) Einlegen in Glycerin. Schiefferdecker {Bonn). 3. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. A, Niedere Thiere, Issel , R. , Ancistridi del Golfo di Xapoli [Ancistrideu des Golfes von Neapel] (Mitth. a. d. Zool. Stat. z. Neapel Bd. XVI, 1903, p. 63—108, c. 3 tavv.). Um die Thiere lebend zu untersuchen , braucht man blos mit einer Pipette einige Tropfen des die Kiemen jener Mollusken , auf 200 Referate. XX, 2. denen sie leben , benetzenden Wassers aufzusaugen und unter das Mikroskop zu bringen. Die beste Methode , die interessirenden Protozoen zu fixiren , ist die mit Osmiumdämpfen. Färben kann man vortheilliaft mit Carmalaun oder mit Essigsäure - Methylgrün, einschliessen, nach Abspülen mit ammoniakalisehem Wasser in dem von Brun empfohlenen Gemisch (destillirtes Wasser 14 Th., Trauben- zucker 4 Th. , Kampferspiritus und Glycerin je 1 Th. ; der aus- fallende Kampfer wird abtiltrirt). Färbung mit Heidenhain's Eisen- hämatoxylin kann bei der Darstellung der Mikronucleolen von Vor- theil sein. Hat man reichlich Material zur Verfügung, so kann man auch , anstatt die einzelnen technischen Manipulationen unter dem Deckglas vorzunehmen , gelegentlich so verfahren, dass man auf die durch Zerdrücken von Kiemenstückchen erhaltene Flüssigkeit in einem Probirgläschen ein wenig oOprocentiges Formol (Mischung mit Seewasser) giesst und, wenn sich später die festen Partikelchen zu Boden gesetzt haben, decantirt und dann behufs Färbung der Reihe nach ein wenig Carmalaun, einprocentige Alaunlösung, Alkohol steigender Concentration , schliesslich absoluten Alkohol aufgiesst. Den so behandelten Bodensatz schüttet man in ein Uhrschälcheu, das ein Gemisch von 3 Th. absolutem Alkohol und 1 Th. Glycerin enthält. Nachdem der Alkohol langsam verdunstet ist , entnimmt man zur Untersuchung das Glycerin sammt dem darin vertheilten Bodensatz tropfenweise. Es gelingt durch Hin- und Herschieben des Deckglases nicht schwer, aus den verschiedenen Fremdtheilchen einzelne Protozoen zu isoliren und bequem zu beobachten. Will man auch das Plasma gefärbt haben , genügt es , dem Alkohol bei der Nachbehandlung nach der Färbung eine Spur Pikrinsäure zu- zusetzen. Zum Deutlichmachen der Cilien fügt man dem Alkohol noch ein wenig einer alkoholischen Lösung von Pyrogallussäure hinzu. Zum Fettnachweis wurde eine gesättigte Lösung von Sudan HI in TOprocentigem Alkohol benutzt. Schliesslich wurde noch Vital- färbung mit Neutralroth vorgenommen. E. Schoebel (Neapel.) Awerinzew , S. , U e b e r die S t r u c t u r der K a 1 k s c h a 1 e n mariner Rhizopoden (Zeitsclir. f. wiss. Zool. Bd. LXXIV, 1903, p. 478—490 m. 1 TU.). Ausser auf Schliffen wurde die Mikrostructur der Kalksubstanz der Schalen vorwiegend mittels der BtJTSCHLi'schen Methode der Erhitzung in Jodkalium studirt. Zu diesem Zwecke wurden haupt- sächlich Schalen benutzt, welclie des protoplasmatischen Lihaltes XX, 2. Referate. 201 entbehrten. Die trockenen Schalen wurden für einige Minuten in einem Platinlöftelchen in Jodkalium , das über einem Bunsenbrenner geschmolzen war (der Schmelzpunkt liegt bei 634^0.), übergeführt; nach dem Erstarren wurde das Jodkalium aufgelöst und die Präparate wurden dann zunächst in Wasser untersucht. Fragmente der auf diese Weise bearbeiteten Schalen wurden theils in gewöhnlicher Weise in Canadabalsam , theils aus absolutem Alkohol im Thermostaten getrocknet und darauf direct in geschmolzenem , rasch erhärten- dem Canadabalsam eingeschlossen. Gleichzeitig wurden Control- beobachtungen an Schalen , die nicht in Jodkalium erhitzt worden waren, gemacht. Zum Studium der wechselseitigen Beziehungen der organischen und anorganischen Substanz der Schalen wurden Präparate auf zweierlei Weise hergestellt: entweder wurde die Schale nach Entfernung des plasmatischen Inhaltes auf einmal ver- mittels schwacher Lösungen von Essigsäure und Methylenblau ent- kalkt und gefärbt, oder es wurde zunächst mit schwacher Säure- lösung der kohlensaure Kalk entfernt und dann die organische Substanz gefärbt. Zu empfehlen ist , den gesammten Verlauf der Entkalkung unter dem Mikroskope zu verfolgen. E. Schoebel (Neapel). Trinci, G., Di una nuova specie di Cytaeis gemmante del Golfo di Napoli [Ueber eine neue kno- spende Species von Cytaeis des Golfs von Neapel] (Mitth. a. d. Zool. Stat. z. Neapel Bd. XVI, 1903, p. 1 — 34 c. 2 figg. e 1 tav.). Ein Theil des Untersuchungsmaterials war mit FLEMMiNcVscher Flüssigkeit, ein anderer mit Sublimat fixirt. Im ersteren Reagens behalten die Thiere ihre Form recht gut, während sie im zweiten nicht unbeträchtliche Deformationen und Schrumpfungen erleiden, besitzen dafür aber eine wesentlich bessere Färbbarkeit. Als Far- ben kamen mit gutem Erfolg das EnRLiCH'sche Essigsäurecarmin und P. Mayer's Paracarmin zur Anwendung. Um genau orieutirte Schnitte zu erhalten, wurden die Objecte auf einer rechtwinklig zu- rechtgeschnittenen Scheibe coagulirten Eiweisses mittels Pinsel pa- rallel oder rechtwinklig zu einer der Seiten des rechten Winkels orientirt und mittels Eiweiss-Glycerin u'ud nachträglicher Coagulation desselben durch absoluten Alkohol in der betreffenden Lage lixirt. Die eingebettete Eiweissscheibe mit sammt den darauf orientirten Objecten wurde in gewöhnlicher Weise in Paraffin eingebettet und 202 Referate. XX, 2. konnte dann bequem in der gewünschten Riclitiiug geschnitten werden. E. Schoebel {Neapel). Schepotieff, A., Untersuchungen über den feineren Bau der Borsten einiger Chätopoden und Brachio- poden (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIV, 1903, p. 656 — 710 m. 1.5 Figg. u. 4 Tfln.). Das beste Mittel , um ganz saubere Borsten zu erhalten , an denen keine Gewebstheile mehr haften, ist die Zerstörung des ganzen Körpers des Thieres durch einprocentige Salzsäure oder noch besser durch künstliche Verdauungsflüssigkeit im Reagensglas bei 40 bis 50^ C. Schon nach 48stündiger Einwirkung jener Reagentien zer- fällt der ganze Körper beim Schütteln, und nur Borsten und Theile der Cuticula bleiben unversehrt. Nach Abgiessen des Absatzes in ein Uhrglas kann man die ganz saubereu Borsten leicht mit der Präparirnadel sammeln. Zerstören des Thierkörpers mit Kalilauge ist nicht zu empfehlen, da dieses Reagens zu stark auf die Borsten- substanz einwirkt. Es bildet sich dabei immer im Innern der Borsten ein Niederschlag von kleinen Krystallen , welche die wahre Structur verdecken. Von allen Methoden zur Untersuchung der Structur er- wiesen sich Austrocknen der Borsten, schwaches Erhitzen im trockenen Zustande oder Maceration als am besten geeignet. Zum Austrocknen wurden die Borsten entweder im trockenen Zustande auf einen Ob- jectträger gelegt und nur mit einem Uhrglas zum Schutz gegen Staub bedeckt, für einen bis 2 Tage auf den 40 bis 50 ^^ warmen Wärme- schrank gestellt, oder sie wurden in Xylol unter die Luftpumpe ge- bracht und im Vacuum getrocknet. Hierauf folgte in beiden Fällen sofortige Uebertragung in gewöhnlichen gelösten oder in geschmol- zeneu Canadabalsam. Die ausgetrockneten Borsten zeigen keine Ver- änderung ihrer äusseren Form ; nur entsteht manchmal bei 2tägigem Aufenthalt auf dem Wärmeschrank eine ganz schwache Braunfärbung. Gewisse Structureigeuheiten treten noch besser durch Erhitzen der Borsten hervor. Zu diesem Zwecke wurden die frischen oder in Xylol befludlichen Borsten auf einem Objectträger über der sehr kleinen Flamme eines Bunsenbrenners einige Minuten erhitzt. Wie nach der Austrocknung wurden auch nach dieser Procedur die Borsten direct in gewöhnlichen oder geschmolzen Balsam einge- schlossen. Zur Maceration der Borsten wurde oTprocentige Salz- säure, 35procentige Kalilauge, 99'5procentige Essigsäure und Eau de Javelle theils bei gewöhnliclier Temperatur, theils unter Erhitzen XX, 2. Referate. 203 benutzt. Letztgenanntes Macerationsmittel wirkt zweifellos am besten, und die damit behandelten und gut ausgewaschenen Borsten können leicht gefärbt werden. Zur Färbung wurden wasserlösliches Gen- tianaviolett, halbprocentige wässerige Eosinlösung, wässerige Lösung von Bismarckbraun (ein halb bis ein Procent oder stärker), Eisen- hämatoxylin (2- bis Sstündige Behandlung mit 2procentigem Eisen- alaun, kurzes Auswaschen in Wasser und 24stündiges Färben in einprocentigem wässerigem Hämatoxylin) , Orcein, Säurefuchsin (80- procentig in Alkohol) , Thionin (halbprocentig in Wasser) , Methylen- blau und Safranin benutzt. Die 5 letztgenannten Farben färben die Borsten sehr schlecht, Dahlialösung in Alkohol gar nicht. Triphenylros- anilintrisulfosaures Natron giebt eine gute Blaufärbung, besonders der Oberfläche. Am besten für die Untersuchung der nach der Maceration zerklopften Borsten eignen sich Gentianaviolett und Bismarckbraun. Die gefärbten Borsten werden am besten unter Wasser untersucht, mit Paraffinverschluss des Deckglases. Durch schwaches Klopfen auf das Deckglas kann man dann leicht den Zerfall der Borste be- wirken. Ueberführung in Canadabalsam ist wegen der Feinheit der Fragmente und des geringen Unterschiedes der Lichtbrechung nicht rathsam. Schliesslich kamen noch Schnitte , welche durch die in Gummiglycerin an der Luft eingetrockneten Borsten mit dem Rasir- messer angefertigt waren, und Mikrotomschnitte nach Paraffineinbet- tung zur Untersuchung. E. Schocbd (Neapel). Goldsclimidt, R. , Histologische Untersuchungen an Nematoden. L Die Sinnesorgane von Ascaris lumbricoides L. und A. megalocephala Cloqu. (Zool. Jahrb., Abth. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XVIII, 1903, - p. 1—57, m. 4 Figg. u. 5 Tfln.). Die Untersuchungsobjecte wurden an Ort und Stelle direct nach der Entnahme aus dem Darm des Wirthes (Schwein oder Pferd) in die Fixirungsflüssigkeit eingelegt. Es ist dabei unbedingt nöthig, so kleine Stücke wie möglich zu nehmen, da ein schnelles Eindringen der Flüssigkeit sonst ausgeschlossen ist. Werden ganze Thiere un- verletzt eingelegt, so sind sie nach Ansicht des Verf. immer schlecht conservirt, da die dicke Cuticula sich für Fixirungsflüssigkeiten als ausserordentlich undurchlässig erweist. Verf. schneidet den lebenden Würmern das Vordereude nicht weit hinter dem Nervenring ab, ebenso das Hiuterende der Männchen , so weit die Genitalpapillen reichen , und bringt sie sofort in die Fixirungsflüssigkeit. Beim 204 Referate. XX, 2. männlicben Hintereude empfiehlt es sich noch , den dorsalen Theil mit dem Rasirmesser abziitrageu oder dorsal aufzuschneiden. Die besten Resultate ergab Sublimat-Essigsäure (Sublimatlösung concentrirt und Wasser gleiche Theile -|- 2 Procent Eisessig). Nächstdem erwies sich als brauchbar concentrirte Sublimatlösung, PERENYi'sche Flüssigkeit und Alkohol-Essigsäure (Alkohol TOprocentig 4 Th., Essigsäure 43pro- centig 1 Th.). Schlechte Resultate gaben Pikriuschwefelsäure, Pikrin- essigsäure , Chromessigsäure, Hermann' sehe Flüssigkeit. Eingebettet wurde in Chloroform-Paraffin. Die Objecte wurden theils im Stück, theils im Schnitt gefärbt. Zur Stückfärbung ist ganz besonders die ältere HEioENHAiN'sche Methode mit Hämatosylin-chromsaurem Kali zu empfehlen. Die Stücke kommen über Nacht in eine ^j^- bis ^/.,procentige wässerige Hämatoxylinlösung und dann sofort für eben so lange Zeit in eine einprocentige Lösung von chromsaurem Kali, werden darauf mit Wasser ausgewaschen und in gewohnter Weise eingebettet. Man erhält so eine recht intensive , aber doch durch- sichtige Färbung. Zum Färben der Schnitte wurde hauptsächlich Delafield's Hämatoxylin combinirt mit Eosin angewandt. Auch Hämatoxylin - Säurefuchsin - Pikrinsäure nach van Gieson gab recht gute Bilder. E. Schoebel {Neapel). Martini , E. , Ueber Furchung und Gastrulation bei Cucullanus elegans Zed. (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIV, 1903, p. 501—556 m. 8 Figg. u. 3 Tfln.). Zum Fixiren der durch Zerzupfen des Mutterthieres freigemachten Embryonen verwandte Verf. 1) die von BtJTSCHLi empfohlene 2pro- centige Lösung von Essigsäure in physiologischer Kochsalzlösung und erhielt bei Färbung mit Alauncarmin sehr gute Totalpräparate, 2) Pikrinessigsäure und 3) Pikriuschwefelsäure , welche Fixirungeu mit Boraxcarminfärbung ebenfalls recht brauchbare Totalpräparate lieferten. Auch Sublimat, Platinchlorid, sowie Gemische der Chrom- und Osmiumsäure fixirten zwar gut , Hessen aber keine so schönen Färbungen zu wie erstgenannte Reagentien. Endlich wurden mit 0'5procentiger Osmiumsäure mit oder ohne Zusatz von 2 Procent Essigsäure bei Verzicht auf weitere Färbung für die Untersuchung der ersten Furchungsstadien brauchbare Präparate erhalten. Das zum Schneiden bestimmte Material wurde mit dem vom RATn'schen Platinchlorid - Pikrin-Osmium-Essigsäuregemisch , mit Pikrinessigsäure oder mit Formol fixirt. Die Schnitte des mit dem Osraiumgemisch behandelten Materials wurden mit rohem Holzessig behandelt, die des XX, 2. Referate. 205 anderen mit sehr verdünntem Hämatoxylin oder besser mit Alauncarmin geförbt und mit sehr schwacher Essigsäure oder salzsaurem Alkohol differenzirt, wodurch es gelang, sowohl die Kerne als auch die Zell- grenzen deutlich zu machen. Doppelfarbung mit Orange G zeigte keine Vortheile. Zum Studium der ersten Furchungsvorgänge ist es nothwendig , denselben Embryo von allen Seiten betrachten und zeichnen zu können. Zu diesem Zwecke brachte Verf. das zu unter- suchende Object in dicken Canadabalsam und bedeckte es mit einem durch feine Glasfäden gestützten Deckglas. Durch Ver- schiebung des letzteren kann der Embryo leicht nach allen Seiten hin- und hergerollt werden. Für die Untersuchung lebender Objecte ist zu berücksichtigen, dass Kochsalz- oder Eiweisslösung dieselben sofort verändern. E. Schoebel {Neapel). Neuhaus , C , Die postembryonale Entwicklung der Rhabditis nigrovenosa (Jenaische Zeitschr. f. Naturwiss. Bd. XXXVII, 1903, p. 6.53—690 m. 1 Fig. u. 3 Tfln.). Gute Resultate bei der Fixirung des Materials gab folgende Methode. Den Würmern wird Kopf- und Schwänzende abgeschnitten, dann kommen sie 24 Stunden in Boveri's Pikrinessigsäure , werden mehrere Tage mit TOprocentigem Alkohol ausgewaschen und darauf in gewöhnlicher Weise weiter behandelt. Sehr schöne Kern- und Dotterfärbung ergab Doppelfärbung mit Hämatoxylin und Orange G ; deutliche Zellgrenzen lieferte Doppelfärbung mit Hämatoxylin und Alauncarmin. Zur Controle der Schnittmethode dienten Totalpräparate, die nach folgender Methode hergestellt wurden: Um Embryonen jeder Entwicklungsstufe in grösserer Menge isolirt zu erhalten, werden die Rhabdouemen zerschnitten und zerzupft. Nach 24stündiger Behand- lung mit Pikrinessigsäure und genügendem Auswaschen mit TOpro- centigem Alkohol wird ein Theil des Materials in eine schwache, kaum rosarothe Mischung von reinem Glycerin und essigsaurem Carmin gebracht. Der Alkohol dunstet ab , und nach einem bis 2 Tagen ist die nöthige Färbung eingetreten. Die Präparate sind vollständig durchsichtig, aber wenig haltbar. Um die späteren Stadien der ausserhalb der Eischale sich abspielenden Entwicklung in grösserer Anzahl zu erhalten , wurde folgende Züchtungsmethode angewandt. Es wurde Mastdarminhalt des Frosches und Erde gemischt und durch stärkeres Erhitzen gewissermaassen sterilisirt. Wenn sich dann in dem Gemisch die für das Fortkommen der Rhabditis nöthige Fäulniss 206 Referate. XX, 2, wieder eingestellt hat, erfolgt die Aussaat des durch Zerzupfen der Rhabdonemen erhaltenen Materials. E. Schoebel {Neapel). Reuss, H., Die Cercarie und Sporocyste des Distomum duplicatum Baer (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIV, 1903, p. 458—477 m. 1 Fig. u. 1 Tfl.). Die Anatomie der ausgeschlüpften Cercarie, wie man sie durch Druck oder Zerzupfen aus den ältesten Sporocysteu erhält, wurde fast ausschliesslich am lebenden Thiere studirt. Die so erhaltenen Bilder wurden durch Schnitte ergänzt und coutrolirt. Für zu conservirendes Material gab Fixirung in schwacher FLEMMiNC4'scher Flüssigkeit mit Färbung in Boraxcarmin die besten Resultate. Die entwicklungsgeschichtlichen Untersuchungen wurden ausschliesslich an conservirtera Material angestellt , da zahlreiche in die Wand der Sporocysten eingelagerte Fetttropfen die Keimschläuche vollständig- undurchsichtig macheu. Durch Zerzupfen des inficirten Muskel- gewebes wurden die Sporocysten freigelegt, mit schwacher FLEMMiNG'scher Lösung fixirt und mit Boraxcarmin gefärbt. Der grösste Theil der untersuchten Keimzellen und Keimballen wurde durch Präparatiou mit Nadeln aus den Sporocysten entfernt. Durch diese Methode wurde eine Veränderung der Lage der Keimballen unter dem Mikroskop und dadurch eine genauere Einsicht in die Lage- beziehungen der Zellen zu einander ermöglicht. Weniger brauchbare Bilder ergaben Schnitte. E. Schoebel {Neapel). Stevens, N. M., Ou the ovogenesis and spermatogenesis of Sagitta bipunctata (Zool. Jahrb., Abth. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XVIII, 1903, p. 227—240 m. 2 Tun.). Die Thiere wurden in toto in die Fixirungsflüssigkeiten gebracht. Als solche wurden versucht Hermann's und Flemming's Gemisch, ferner Boveri's Pikrinessigsäure, 70procentiger Alkohol und Sublimat- Eisessig ; nur letzteres Reagens , concentrirte wässerige Sublimat- lösung mit 2- bis öprocentigem Eisessig, gab indessen befriedigende Resultate. Ein Theil des Materials wurde in toto mit Boraxcarmin und in Delapield's Hämatoxylin tingirt. Die besten Bilder gab aber entschieden Schnittfärbung mit Heidenhain's Eisenhämatoxylin. E. Schoebel {Neapel). Kotte, E., Beiträge zur Kenntniss der Hautsinnesorgane und des peripheren Nervensystems der Tief- XX, 2. Referate. 207 see-Dekapoden (Zool. Jahrb., Abtb. f. Anat. u. Outogen. Bd. XVII, 1903, p. 619—658 m. 5 Tflii.). Verf. interessirten bei seiner Untersuchung hauptsächlich jene merkwürdigen Pinsel von Sinneshaaren, die an den Endgliedern der letzten Rumpffiisse einiger Nematocarcinus-Arten durch ihre monströse Entfaltung auffallen. Trotzdem das Material — es handelt sich um solches von der deutschen Tiefsee-Expedition — eigens für Nerven- untersuchuugen mittels Osmiumsäure ßsirt worden war , stellte sich doch bei Anfertigung der Schnittserien heraus , dass die Gewebe so- stark macerirt waren, dass feinere Untersuchungen unmöglich wurden. Versuche , das Chitin behufs besserer Schuittfähigkeit zu erweichen, blieben gänzlich erfolglos. Man muss sich auf den Zufall verlasseu, Thiere zu erhalten, deren Häutung noch nicht lange vor der Fixiruug stattgefunden hat, deren Chitinpanzer also noch verhältnissmässig weich ist. Als Färbemittel benutzte Verf. hauptsächlich Böhmer's Hämatoxylin uud Säurecarmin. Recht gute Bilder wurden auch mit der HEiDENHAix'schen Eisenhämatoxylinfärbung (24 Stunden in der Eisenalauulösung , 6 Stunden in der Farbe) erzielt. Nachfärbungen mit Orange-G scheinen Verf. nicht räthlich , da dieser Farbstoff die Gewebe sehr stark angreifen und verändern soll, E. Sckoebel (Neapel). Prentiss, C. W., Ueber die Fibrillengitter in dem Neu- ropil von Hirudo und Astacus und ilire Be- ziehung zu den sogenannten Neuronen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXII, 1903, p. 592—606 m. 1 Tfl.). Als Untersuchungsmaterial dienten die Bauchganglieu. Zw Dar- stellung der Neurofibrillen in den Nervenfasern und im Neuropil von Hirudo" diente das von Bethe angegebene Molybdänverfahren. Als Fixirungsmittel erwies sich Sublimat geeigneter als Salpetersäure, da es ein besseres Differenziren erlaubte. Eine sehr schwache Lösung von Ammoniummolybdat (1 : 4000) ergab geringeren Niederschlag an der Oberfläche der Präparate als die stärkeren Lösungen, die Bethe für wirbellose Thiere empfiehlt. Im einzelnen erwies sich folgender Modus procedendi als bester. Ein Stück der Bauch- ganglienkette wird dem lebenden Thiere entnommen , in physio- logischer Kochsalzlösung abgespült und auf einen Korkstreifen aufgespannt. Fixirt wird dann während 12 bis 24 Stunden in concentrirter wässeriger Sublimatlösung und das Fixatif ausge- waschen, erst 2 Stunden mit fliessendem Wasser, darauf 48 Stunden 208 Referate. XX, 2. iu mehrmals gewechseltem Jod - Alkohol. Die mit Eiweissglycerin aufgeklebten Paraffiuschnitte werden, nachdem sie iu gewöhnlicher Weise in Wasser übergeführt sind, wenigstens 10 Minuten iu einer wässerigen Lösung von Ammoniummolybdat 1 : 4000 bei einer Tem- peratur von Sö^ C. gefärbt, kommen dann für eine bis 2 Minuten in destillirtes Wasser, das eine Temperatur von 55** bis 60 "^ C. hat, und schliesslich 5 Minuten in eine wässerige Lösung von Toluidinblau 1 : 3000 von gleicher Temperatur. Darauf werden die Schnitte ab- gespült , in Xylol gebracht und in Canadabalsam eingeschlossen, wobei wohl darauf Acht zu geben ist, dass sie vollständig vom Wasser und Alkohol frei sind. Bei guten Präparaten sind die Fibrillen dunkelblau und undurchsichtig, während die Perifibrillärsubstanz gar nicht gefärbt ist. Leider bildet sich recht oft ein Niederschlag an der Oberfläche des Präparates , welcher zuweilen die sonst gute Differenzirung der Fibrillen verdeckt. Die Präparate sind nicht beständig, halten sich aber einige Wochen oder Monate laug unver- ändert. Um die Neurofibrillen in den Ganglienzellen darzustellen, wurde die Nissl - Substanz , die beim Färben sehr dunkel und bei gewöhnlichen Präparaten die Fibrillen undeutlich macht , vermittels schwacher Lösungen von Ammoniak und Salzsäure nach der Bethe- schen Methode ausgezogen. Von Astacus wurden Methylenblau- präparate durch Einspritzen einer einproceutigen wässerigen Lösung des Farbstoffes in die Herzgegend angefertigt. Die gefärbten Objecte wurden in pikrinsaurem Ammoniak fixirt und in einer Mischung der Lösung des pikrinsauren Ammoniaks und Glyceriu eingeschlossen. Zum Studium der Fibrillen erwies sich diese Fixirungsmethode besser als di§ mit Ammoniummolybdat. E. Schoebel {Neapel}. Gross, J. , Untersuchungen über die Histologie des Insectenovariums (Zool. Jahrb. , Abth. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XVHI, 1903, p. 71 — 186 m. 9 Tfln.). Für die Untersuchung auf Schnittserien verwendete Verf. theils unter physiologischer Kochsalzlösung herauspräparirte Ovarien, theils ganze Abdomina. Letzteres geschah, um die Eierstöcke in ihrem natürlichen Situs zu erhalten. Da aber die Fixirungsflüssigkeiten nur schlecht eindringen, empfiehlt sich diese Methode wenig. An Fixirungsmitteln wurden versucht Sublimat, Pikrinsublimat , Chrom- essigsäure , FLEMMiNG'sche Flüssigkeit , vom RATn'sche Pikriuplatin- chlorid-Essigsäure u. a. Alle Sublimatgemische machen die Mitosen vollständig undeutlich. Direct zu warnen ist vor der Verwendung XX, 2. Referate. 209 von Chromessigsäure. Die besten Resultate erzielte Verf. entschieden mit den vom PiATH'schen und FLEMMiNo'schen Lösungen. Gefärbt wurden die Schnitte mit BÖHMER'sehem Hämatoxylin in Combination mit Orange , Eosin und Safranin. Eosin eignet sich besonders als bekannter Dotterfarbstoff. Safranin hat den grossen Vorzug, Zell- grenzen ganz ausserordentlich scharf hervorzuheben. Einige in Pikrinplatinchlorid- Essigsäure fixirte Ovarien wurden auch im Stück mit Mayer's Hämalaun gefärbt, wobei die ungenügend ausgewachsene Pikrinsäure der Fixirungsllüssigkeit gut als Plasmafarbstoff fungirte. E. Schoebd (Neapel). Grünberg , K. , Untersuchungen über die Keim- und N ä h r z e 1 1 e n in den Hoden und Ovarien der L e p i d p t e r e n. Ein Beitrag zur K e n u t n i s s der Entwicklung und Ausbildung der Keimdrüsen bei den Insecten (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXIV, 1903, p. 327—395 m. 3 Tfln.). Die Präparation der Geschlechtsorgane , an denen die Unter- suchungen ausgeführt wurden, ist auch bei den ausgewachsenen Raupen eine sehr einfache. Bei den Embryonen und jungen Räupchen ist ein Herauspräpariren wegen der Kleinheit der Objecte nicht aus- führbar. Die Embryonen wurden deshalb in toto tixirt, und bei den 5 bis 15 mm langen Räupchen wurde das Segment, welches die Genitalanlagen enthält , herausgeschnitten und nach Entfernung des Darmes ebenfalls in toto fixirt. Es ist entschieden zweck- mässig, den Darm herauszunelmien , da derselbe mit kleinen Blatt- stückchen angefüllt ist, die auf den Präparaten sehr störend wirken können. Von den verschiedenen probeweise versuchten Fixirungs- flüssigkeiten lieferte starke FLEMMiNo'sche Flüssigkeit (Einwirkungs- dauer 24 Stunden) bei weitem die besten Resultate. Beim Schneiden muss man, um gute Sagittalschnitte durch die Genitalanlagen zu er- halten, die in toto conservirten Objecte etwas schräg orientiren, da die Sagittalebene der Geschlechtsorgane nicht genau mit der Frontal- ebene des Thieres zusammenfällt. Die von den älteren Stadien durch Präparation gewonnenen Geschlechtsorgane wurden mit Platinchlorid- Osmium-Essigsäure fixirt. Als Färbemittel diente Heidenhain's Eisenhämatoxylin. E. ScJiocbel (Neapel). Schnabel, H. , Ueber die Embryonal e utwicklung der Radula bei den Mollusken. IL Die Entwicklung Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XX, 2. 14 210 Referate. XX, 2. clerRadula bei den Gaste ropo den (Zeitsclir. f. wiss. Zool. Bd. LXXIV, p. 616—655 m. 3 Tfln.). Zur Fixiruiig- des für Schnittserien bestimmten Materials wurde die HERMANN'sche Lösung als besonders vortheilbaft befunden. Subli- matfixirung ist nur für Totalpräparate der Radula brauchbar. Das Herauspräpariren gestaltet sich bei solchem Material nach Behandlung mit verdünnter Kalilauge sehr einfach. Für die für Schnittserien noth- wendige genaue Orientirung der Embryonen wurde die von Hoff- mann beschriebene NelkenölcoUodiummetbode^ mit Erfolg angewendet. Die Schnittserien wurden meist einer Doppelfärbung mit Hämatoxyliu- Bismarckbraun unterzogen. Die mit Hämatoxylin — am besten nach der HEiDENHAiN'schen Methode — vorgefärbten Präparate kamen auf eine bis 2 Minuten in eine alkoholische Lösung von Bismarck- braun. Zur Feststellung der einfachen , noch nicht mit Zähnen be- setzten Basalmembran von Paludina vivipara lieferte aber auch dieses Nachfärben mit Bismarckbraun noch keine genügenden Resultate, da sowohl Eiweiss wie auch die Substanz der jungen Radula braun gefärbt wurde. In diesem Fall ist Färbung mit wässerigem Pikroni- grosin zu empfehlen ; hierbei färbt sich die Radula selbst blau, während das in der Radulatasche enthaltene und oft recht störende Eiweiss eine blassgrüne Färbung annimmt. E. Schoehel {Neapel). Illiiig'WOrth, J. F., The anatomy of Lucapi na crenulata Gray (Zool. Jahrb., Abth. f. Anat. u. Ontogen, Bd. XVI, 1902, p. 449—480, w. 15 figg. a. 3 pltes.). Das Material wurde für alle Zwecke der Untersuchung so frisch als möglich durch Injection der van Gebuchten' sehen Flüssigkeit (Alkohol 95procentig 60 Th. , Chloroform 30 Th. , Eisessig 10 Th.) in das Gefässsystem abgetödtet, dann für einige Stunden in 70pro- centigen Alkohol und schliesslich bis zum Gebrauch in 85procen- tigen Alkohol eingelegt. Für die Präparation der feineren Ner- venstämme wurden die Thiere indessen mit 5- bis lOprocentiger Salpetersäure injicirt und dann nach Entfernung der Schale für eine oder mehrere Stunden in gleichstarke Säure eingelegt. Während des Macerationsprocesses, der einen Monat oder länger dauern kann, setzt man die Objecte am besten starkem Licht aus , weil sich nur dann die Nerven deutlich von den Muskeln durch die Farbe ab- heben. Die Präparation führt Verf. so aus , dass er als Präparir- 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XV, 1899, p. 312. XX, 2. Referate. 211 nadel eine feine ausgezogene Glasröhre , die mit einem längereu Kautschukschlauch an die Wasserleitung angeschlossen ist und aus der beständig ein entsprechend kräftige Wasserstrahl fliesst, benutzt. E. Sekoebel (Neapel). Dumez, R. , Rapports du cytoplasme et du noyau dans l'oeuf de la Cytherea chione L. (La Cellule t. XIX, 1902, fasc. 2, p. 437—452, av. 2 plches.). . Verf. hat das Ei von Cytherea chione gewählt, da es scheint, dass man an diesem beweisen kann, dass der Kern dem Cytoplasmä nicht nur gelöste Stoffe abgiebt, sondern dass er auch durch seine Membran Körper hindurch treten lassen kann , welche sich dann später auflösen. Die Ovarien waren in GiLsoN'scher Flüssigkeit fixirt, in Paraffin eingebettet, die Schnitte 3 ju dick. Gefärbt wurde mit Eisenhämatoxylin nach Heidenhain und Hämatoxylin nach Delafield ; als Contrastfarbe diente Congoroth. Um die Natur der ausgetretenen Körper festzustellen oder aufzuklären, verwandte Verf. Methylgrün und die Reactionen für Nuclein , jedoch ohne Erfolg, vielleicht weil die Präparate schon zu lange im Alkohol gelegen hatten. Schieferdecker {Bonn). B. Wirbelthiere. Dogiel, A. S., Das p eriphere Nervensystem des Amphioxus [B r an chios tom a lanceolatum] (Anat. Hefte, H. 66 .[Bd. XXI, H. 1], 1903, p. 147—213, m. 18 Tfln.). Verf. wandte in dieser Arbeit sein Augenmerk zunächst der Endigungsweise der sensibeln Nerven zu, gleichzeitig bemühte er sich, die Vertheilung der Nerven und ihr Verhalten zu den Kiemen, zu dem queren Bauchmuskel u. s. w. genauer festzustellen, und studirte endlich auch die motorischen Wurzeln und das Central- nervensystem. Zur Nervenfärbung benutzte er die Methoden von GoLGi, Apathy und das Methylenblauverfahren. Das Methylenblau und Silber erwiesen sich als die brauchbarsten Mittel, ersteres für die Färbung des peripheren, letzteres für die Imprägnation des centralen Nervensystemes. Um eine Nervenfärbung zu erhalten, brachte Verf. die lebenden Thiere in Seewasser, dem Methylenblau 14* 212 Referate. XX, 2. iu Substanz oder in einprocentiger Lösung soviel zugesetzt wurde, dass das Wasser eine schwachblaue Farbe annahm. Da sich dabei blaue oder violette uadelförmige Krystalle bilden, welche die Färbung hindern, so wurde das Wasser filtrirt bevor die Thiere hinein kamen; diese fühlten sich darin wohl und lebten mehrere Tage. In gewissen Zwischenräumen wurde ein Exemplar aus dem Wasser heraus- genommen und auf dem Objectträger bei schwacher Vergrösserung untersucht. Die sensibeln Nerven färben sich bereits nach 20 bis 40 Minuten mehr oder weniger stark. Die Färbung der motorischen Nerven und der Elemente des Centralnervensystemes tritt erst nach einer bis anderthalb Stunden ein. Während das Thier auf dem Objectträger lag, wurde die Färbung der Nerven stärker, erreichte nach einer gewissen Zeit ihr Maximum , worauf dann allmählich ein Abblassen eintritt. Um eine ausreichende Nervenfärbung zu erhalten, muss der richtige Augenblick der intensivsten Färbung abgepasst und das Thier alsdann sofort iu die Fixirungsflüssigkeit übertragen werden. Das Abblassen der sensibeln Nerven tritt schneller ein als das der motorischen und der Nervenzellen, und es ist in Folge dessen nicht möglich , beide auf demselben Präparate gleich voll- ständig zu erhalten. Zur Färbung der Nervenzellen erwies sich das folgende Verfahren als besonders günstig. Lebende Exemplare von Amphioxus wurden für anderthalb bis 3 Stunden in eine Schale mit einer schwachen Methylenblaulösung in physiologischer Kochsalz- lösung gelegt, dann auf breite Objectträger übertragen und von Zeit zu Zeit bei schwacher Vergrösserung untersucht. Bei genügender Intensität Fixirung nach einem der weiter unten angeführten Ver- fahren. Die Oberfläche der auf dem Objectträger liegenden Thiere muss immer wieder mit denselben schwachen Farbstotflösungen be- feuchtet werden, sonst bilden sich auf der eintrocknenden Haut- oberfläche blaue , nadeiförmige Krystalle , welche die Untersuchung hindern. Die Thiere sterben bei diesem Verfahren recht bald ab und weisen zur Zeit der Fixirung nur schwache Lebens- zeichen auf. Immer ist nur diejenige Körperseite genügend stark gefärbt , welche dem Objectträger nicht aufliegt. Zur Fixirung be- nutzte Verf. gewöhnlich eine gesättigte wässerige Lösung von pikrin- saurem Ammoniu